Regulation of murine solid tumors dissemination by retinoic acid system and its receptors

Abstract

El presente trabajo tuvo como objetivo estudiar el rol del sistema retinoide en la progresión del tumor mamario murino LM38-LP, haciendo énfasis en las interacciones celulares entre su componente luminal (LEP) y mioepitelial (MEP). Determinamos que la línea LM38-LP expresa receptores retinoides y que los mismos son funcionales. El tratamiento con retinoides induce en la línea un arresto del ciclo celular. El mismo tratamiento induce apoptosis sólo en el compartimiento LEP y senescencia en las células MEP, mientras que una pequeña población celular que mediaría la interacción entre ambos componentes continúa ciclando. Asimismo se ha podido determinar la existencia de una población con características de células stem/progenitoras parcialmente resistentes al tratamiento con retinoides. Hemos estudiado además mecanismos implicados en la diseminación metastásica de la línea LM38-LP. En este sentido hemos observado que los retinoides inhiben tanto la actividad de proteasas secretadas como la capacidad migratoria, mientras que aumentan la capacidad adhesiva a componentes de la matriz extracelular. Los retinoides inhiben la invasión sólo en la población MEP de la línea LM38-LP. Se analizó la transcripción de un panel de genes implicados en el proceso de transición epitelio-mesenquimática. Se pudo determinar que el ácido retinoico modula estos genes diferencialmente entre los compartimientos LEP y MEP conduciendo a la línea hacia un fenotipo menos agresivo. Se generaron sublíneas que presentan silenciados o sobreexpresados los distintos receptores retinoideos, lo que permitió evaluar la participación de cada uno de ellos en la progresión tumoral maligna de la línea en estudio. Este trabajo sugiere que los retinoides ejercen efectos pro-apoptóticos y citostáticos diferenciales en los diferentes compartimentos celulares de la línea LM38-LP. Asimismo los resultados sugieren la existencia de una tercera población con capacidad clonogénica y resistente a los retinoides.The objective of the present work is to study the role of retinoid system in the murine mammary tumor LM38-LP progression, emphasizing luminal and myoepithelial cellular interactions. We determined that LM38-LP cell line expresses retinoic acid receptors and that these are functional. Retinoid treatment induces cell cycle arrest in the cell line. Same treatment induces apoptosis only in LEP compartment, senescence in MEP cells, while a small cellular population that mediates interaction between LEP and MEP compartment remains cycling. We determined the presence of a small cell population with characteristics of stem/progenitor cells, partially resistant to retinoid treatment. Besides, we studied some mechanism involved in metastatic dissemination in LM38-LP cell line. In this way, we observed that retinoids inhibit both secreted protease activity and migratory capacity, while increase adhesion capacity to some components of extracellular matrix. Retinoids inhibit invasion only in LM38-LP cell line MEP population. A set of genes implicated in epithelial-mesechymal transition were analyzed employing a qPCR array. We could determine that retinoic acid modulated these genes in a differential way in LEP and MEP compartments, leading to a less aggressive phenotype. By using sub lines generated either silencing or over expressing different retinoic acid receptors, we analyzed the role of the different receptors in the metastatic progression of LM38-LP cells. This work suggests that retinoids exert differential pro apoptotic and citostatic functions on the different cell components of the mammary tumor cell line LM38-LP. Likewise, these results suggest the existence of a third cell population with clonogenic capacity and resistant to retinoids.Fil:Campodónico, Paola Bernadette. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina