Participation of the endocannabinoid system in the implantation site and infiltrating cells in LPS-induced embryonic resorption

Abstract

Se ha demostrado una estrecha asociación entre el aborto y cambios en el sistema endocannabinoide (SEC) en linfocitos periféricos de mujeres. En un modelo murino de reabsorción embrionaria (RE) inducida por LPS estudiamos la participación del SEC tanto del sitio de implantación como de las células inmunes infiltrantes y su posible regulación por progesterona (P). En este modelo observamos niveles plasmáticos elevados del principal endocannabinoide, anandamida (AEA). Por otro lado encontramos que la RE inducida por LPS era mucho menor en ratones transgénicos deficientes en el receptor de cannabinoides tipo 1, como así también la disminución de los niveles séricos de P. Demostramos la presencia del SEC en las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de ratón y que la actividad de la enzima metabolizante de la AEA (hidrolasa de amidas de ácidos grasos, FAAH) de las PBMC de ratones preñados es mayor que la de los ratones no preñados. Asimismo observamos un efecto protector de la P sobre la actividad de la FAAH y que el mismo estaba mediado por los receptores clásicos de esta hormona (PR). Encontramos que el 70% de las PBMC estudiadas son linfocitos T, demostramos la presencia de los PR en estas células. Por otro lado el LPS incrementó tanto los niveles de óxido nítrico (NO), como de la enzima que lo sintetiza (NOSi). La P abolió el incremento inducido por el LPS, actuando a través de los receptores de glucocorticoides. Durante la RE, la decidua es infiltrada por células del sistema inmune, sufre importantes daños y finalmente es expulsada. Investigamos el efecto de la infiltración leucocitaria sobre la actividad de FAAH en las deciduas mediante un sistema de cocultivo. Cuando las deciduas de animales controles se cultivaron en presencia de PBMC provenientes de animales preñados tratados con LPS, la actividad de la FAAH decidual disminuyó, efecto que fue revertido por la coadministración de P o la de un inhibidor selectivo de la NOSi, aminoguanidina. Asimismo observamos un aumento en la nitración de las proteínas deciduales y específicamente de la FAAH cuando las decidua se co-cultivaban junto a las PBMC de animales tratados con LPS y que este efecto fue revertido por la P. Este trabajo demuestra que el SEC participa en la RE inducida por LPS y que los cambios de este sistema en la decidua están influenciados tanto por las células inmunes infiltrantes como por alteraciones en el sistema endócrino. Palabras claves: Reabsorción embrionaria - Lipopolisacárido - Sistema endocannabinoide - Células mononucleares de sangre periférica - Progesterona - Anandamida - Óxido nítricoA close association between abortion and changes of the endocannabinoid system (eCS) in peripheral lymphocytes of women has been demonstrated. In a murine model of LPSinduced embryonic resorption (EmR), we studied the involvement of eCS in the site of implantation and in the infiltrating immune cells and its possible regulation by progesterone (P). We observed an elevated anandamide (AEA) plasma levels, a major endocannabinoid, in this model. On the other hand, we found that the LPS-induced less EmR in cannabinoid receptor 1 (CB1) knock-out mice, together with a lower drop of P plasma levels. We showed the presence of eCS in murine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and that the PBMC’s fatty acid amide hydrolase activity (FAAH, the main catalytic enzyme for AEA) from pregnant mice was higher than from non pregnant mice. Moreover, we observed that P, via its classical receptors for this hormone (PR), has a protective effect on FAAH activity. Given that the 70% of PBMC are lymphocytes, we demonstrated the presence of PR in this subpopulation. Furthermore, LPS produced an increased levels of both nitric oxide (NO) and inducible NO synthase (iNOS). Interestingly, P abolished these LPS effects acting through glucocorticoid receptors. During EmR, decidua is infiltrated with immune system cells, suffers important damage and is finally expelled. Using a co-culture system, we investigated the effects of leukocytary infiltration on decidual FAAH activity. When deciduas from control mice were cultured in presence of PBMC from LPS-treated animals, decidual FAAH activity was abolished. This effect was reverted by the co-administration of P or aminoguanidine (a selective inhibitor of iNOS). When deciduas were co-cultured with PBMC from LPS treated mice, we observed an increase in decidual protein nitration and particularly in FAAH enzyme; an effect that was reverted by P. This work shows that the eCS is involved in the LPS-induced EmR and that changes in the decidua are influenced both by infiltrating immune cells as well as by alterations in the endocrine system. Keywords: Embryonic resorption - Lipopolysaccharide - Endocannabinoid system - Peripheral blood mononuclear cells - Progesterone - Anandamide - Nitric oxideFil:Wolfson, Manuel Luis. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina