A Camaratuba (Cratylia argentea) é uma leguminosa arbustiva com potencial forrageiro devido sua elevada produtividade, alto valor nutritivo, resistência à seca e adaptação a solos ácidos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a similaridade genética entre 14 acessos de Camaratuba do Banco de Germoplasma da Embrapa Meio-Norte. Foram selecionados oito primers para acessar o DNA genômico destes acessos. Através dos marcadores selecionados foi construída uma matriz binária a partir da qual foram realizadas análises para estimar as distâncias genéticas entre os acessos. O coeficiente de similaridade variou entre 0,25 a 0,7391. Os resultados obtidos indicam que os acessos do Banco de Germoplasma de Camaratuba apresenta

ARAUJO NETO, R. B. de

GOMES, S. O.

LEITE, K. de S.

LIMA, P. S. da C.

LUZ, G. de A.

NASCIMENTO, M. do S. B. do

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Similaridade genética entre acessos do banco de germoplasma de Camaratuba (Cratylia argentea) baseada em marcadores ISSR.

NASCIMENTO, M. do P. S. C. B.

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l1-SESSAO POSTER 0125/09/2012 17:30-18:30CAMAROTE A/BClique para abrir 0 Artigo Completo/Clickto open the paperVEGETALSIMILARIDADE GENETICA ENTRE ACESSOS DO BANCO DE GERMOPLASMA DE CAMARATUBA(CRATYLIA ARGENTEA) BASEADA EM MARCADORES ISSR.GIZELE DE ANDRADE LUZ1; KARINA DE SOUSA LEITE2; SULIMARY OLIVEIRA GOMES3; RAIMUNDO BEZERRADE ARAUJO NET04; MARIA DO SOCORRO CORTEZ BONA DO NASCIMENT05; PAULO SARMANHO DA COSTALIMA6;1.UNIVER SIDA DE ESTADUAL DO PIAU] - UESPI, TERESINA, PI, BRASIL; 2.FACULDADE ALIANc;A, TERESINA,PI, BRASIL; 3. UNIVER SIDA DE FEDERAL DO PIAU] - UFPI, TERESINA, PI, BRASIL; 4,5,6.EMBRAPA MEIO-NORTE, TERESINA, PI, BRASIL;gyz luz@hotmail.comA Camaratuba (Cratylia argentea) e uma leguminosa arbustiva com potencial forrageiro devido sua elevadaprodutividade, alto valor nutritivo, resistencia a seca e adaptac;ao a solos acidos. Este trabalho teve comoobjetivo avaliar a similaridade genetica entre 14 acessos de Camaratuba do Banco de Germoplasma daEmbrapa Meio-Norte. Foram selecionados oito primers para acessar 0 DNA gen6mico destes acessos. Atravesdos marcadores selecionados foi construida uma matriz binaria a partir da qual foram realizadas analises paraestimar as disUlncias geneticas entre os acessos. 0 coeficiente de similaridade variou entre 0,25 a 0,7391. Osresultados obtidos indicam que os acessos do Banco de Germoplasma de Camaratuba apresentam baixasimilaridade genetica com genitores potenciais para 0 melhoramento genetico.SIMILARIDADE GENETICA ENTRE ACESSOS DO BANCO DE GERMOPLASMA DECAMARA TUBA (Cratylia argentea) BASEADA EM MARCADORES ISSRResumo: A Camaratuba (Cratylia argentea) e uma leguminosa arbustiva com potencial forrageirodevido sua elevada produtividade, alto valor nutritivo, resistencia a seca e adaptayao a solos acidos.Este trabalho teve como objetivo avaliar a similaridade genetica entre 14 acessos de Camaratuba doBanco de Germoplasma da Embrapa Meio-Norte. Foram selecionados oito primers para acessar 0DNA genomico destes acessos. Atraves dos marcadores selecionados foi construida uma matrizbinaria a partir da qual foram realizadas anaIises para estimar as disHincias gen6ticas entre os acessos.o coeficiente de similaridade variou entre 0,25 a 0,7391. Os resultados obtidos indicam que os acessosdo Banco de Germoplasma de Camaratuba apresentam baixa similaridade genetica com genitorespotenciais para 0 melhoramento genetico.Introdm;aoA Camaratuba (Cratylia argentea (Desv.) Kuntze) e urn arbusto que pertence a familia Fabaceaepredominante no cerrado brasileiro. Caracteriza-se pela sua extrema adaptayao a solos acidos e a ahatolen'incia a seca. Alem de alta retenyao de folhas verdes e capacidade de germinar durante 0 periododa seca, constituindo uma forragem de qualidade nesta epoca (ARGEL; PIZARRO, 1998; RAMOS;SOUZA; PIZARRO, 2003). Segundo Kamada (2006), a variabilidade genica entre individuos de umamesma especie ou entre grupos de cruzamentos interespecificos constitui-se uma etapa imprescindivelno processo de melhoramento genetico. Pois para obterem-se as variedades agronomicas e necessarioformar grupos de individuos a partir da diversidade das caracteristicas desejadas. Portanto, efundamental 0 conhecimento da variabilidade genetica, sobretudo em especies que ainda nao foramdomesticadas. Os marcadores moleculares tern sido uteis no estudo da diversidade genetica. Entre osmarcadores baseados em PCR (Polimerase Chain Reaction), 0 ISSR (Inter Simple Sequance Repeats) euma tecnica simples, rapida, eficiente, de alta reprodutibilidade. E, envolve a amplificayao desegmentos de DNA presentes entre duas regioes microssatelites identicas orientadas em direyoesopostas (REDDY; SARLA; SIDDIQ, 2002). Este trabalho teve como objetivo avaliar a similaridadegenetica entre 14 acessos de Camaratuba do Banco de Germoplasma da Embrapa Meio-Norte.Material e MetodosForam coletadas folhas jovens de 14 acessos de Camaratuba oriundos do Banco de Germoplasmade forrageiras nativas da Embrapa Meio-Norte em Teresina. 0 DNA gen6mico foi extraido com 0 kitQiagen, quantificado em gel de agarose (0,8%) com TBE 0,5x e corado com GelRed™, comparando-oao DNA A na concentrayao de 100ng. As amostras de DNA foram amplificadas via PCR. Cada reayaocontinha: tampao Ix [10 mM Tris-HCl; 50 mM KCl; 1,5 mM MgCh] (Biolabs), 1 mM de dNTP, 0,3f.1Mde primer, 0,5 U de Taq DNA Polimerase (Biolabs), 0,5 f.1Lde DNA gen6mico (7 ng), H20 MiliQem urn volume final de 10 f.1L.Foram selecionados os oito primers desenvolvidos pelo Laborat6rio deBiotecnologia da British Columbia University (UBC 808, UBC 818, UBC 827, UBC 830, UBC 835,UBC 836, UBC 848 e UBC 886). As amplificayoes foram realizadas em termociclador VeritiTM 96Well Thermal Cycler (Applied Biosystems) sob as seguintes condiyoes: 1 ciclo de 94°C-l '30"; 40ciclos (94°C-40", 50°C-45", 72°C-2'); 72°C-7'; 4°C-oo. Os produtos amplificados foram separados emgel de agarose (1,5%) conduzido a 110 V por 4 horas, corados com GelRed™ e fotodocumentados sobluz ultravioleta. Foi construida uma matriz para os fragmentos amplificados codificados em sistemabinario, atribuindo-se (l) para presenya e (0) para ausencia de bandas. Para calculo do coeficiente desimilaridade de Jaccard, coeficiente de correlayao cofenetico (r) e indice de confiabilidade debootstrap foi usado 0 programa Past v.1.34 (HAMMER et at., 2001). A analise de agrupamento foirealizada pelo metodo de ligayao media entre grupos (UPGMA).Resultados e DiscussaoForam selecionados oito primers ISSR que proporcionaram bandas polim6rficas, indicando aexistencia de diversidade genetica entre os acessos utilizados de Camaratuba. 0 numero de bandasgeradas por cada primer variou entre cinco e 23. A matriz de similaridade demonstrou a existencia devariabilidade entre os acessos, com coeficientes de similaridade variando entre 0,25 e 0,7391 (Tabela1). A maior similaridade esta entre os acessos cinco e 11 e a menor entre os acessos quatro e 14. Acorrelayao cofenetica de 0,89 indicou que nao ha distoryoes significativas entre a matriz e 0dendrograma obtido. 0 dendrograma gerado com media de similaridade de 0,4775 permitiu aseparayao dos gen6tipos em cinco grupos (Figura 1). A utilizayao de acessos com baixa similaridadegenetica em cruzamentos e uma estrategia frequentemente empregada pelos programas demelhoramento com objetivo de obter maior valor hibrido. Com base nos resultados observados namatriz de similaridade e no dendrograma, constatou-se que os acessos 1, 4, 6, e 14 san genitorespotenciais para 0 melhoramento genetico. Pois 0 reconhecimento de individuos com alta variabilidadegenetica otimiza a selel(ao de genitores para cruzamentos, uma vez que, 0 cruzamento entre os maisdivergentes deve gerar maior segregal(ao (FRANCO; CASSINI; OLIVEIRA, 2001) .11 12 0,60873 0,63834 0,25935 0,52946 0,27277 0,53068 0,45469 0,449010 0,423111 0,428612 0,423713 0,444414 0,440710,55320,25490,54170,37500,47970,46150,45650,42860,40740,40350,37060,396610,34000,54000,38000,51020,49060,45830,46000,43640,45610,45280,448310,4167 10,4634 0,42860,3830 0,70460,3462 0,53850,3261 0,54350,3913 0,60870,4583 0,73910,3454 0,58490,3600 0,52940,2500 '0,440710,3674 10,4400 0,71110,3696 0,47830,3750 0,54350,4400 0,60420,4074 0,52830,3462 0,56250,2623 0,46430,7~'":g,lll 0,(.~en10,40380,58330,54720,56360,48150,450010,48890,48980,45280,44900,344810,61700,70210,57450,396610,59260,50940,450010,7143 10,4444 0,3934 1---,-----r--··-....,-----T--~-·-··---.....,-··~I --I ~--'.-o 1,6 32 4.1' 6.4 I' 9,6 11,2 12,1' 14.4Figura 1: Analise de agrupamento para os 14 acessos de Camaratuba (Cratylia argentea)ConclusaoFoi verificada baixa similaridade genetica entre os acessos analisados. Portanto, 0 Banco deGermoplasma de Camaratuba apresenta grande diversidade genica com genitores promissores paraprograrnas de melhoramento genetico.Os marcadares moleculares ISSR sao eficientes para avaliar a similaridade genetica deCamaratuba.AgradecimentosPAC/ Embrapa pelo suparte financeiro. A FUNARBE pela bolsa.ReferenciasARGEL, PJ. & LASCANO, C.E .. Cratylia argentea: una nueva leguminosa arbustiva para suelos<icidosen zonas subhumedas tropicales. Pasturas tropicales, v.20, n.1, p.37-43, 1998.FRANCO, M.C.; CASSINI, S. T. A; OLIVEIRA, V. R.; TSAI, S. M. Caracterizac;ao da diversidadegenetica em feijao par meio de marcadores RAPD. Pesquisa Agropecuaria Brasileira, Brasilia, v. 36,n. 2, p. 381-385, fev. 1997.HAMMER, 0.; HARPER, D.AT.; RYAN, P.D .. PAST: Parelontological Statistics software packagefor education and data analysis. Paleontologia Electronica, vA, issue 1, artA, 9pp. 2001.KAMADA, T .. Avalia~ao da diversidade geneiica de popula~oes de fafia (Pfaffia glomerata(Spreng.) Pedersen) por RAPD, caracteres morfologicos e teor de beta-ecdisona. Tese dedoutorado. Vic;osa: UFV, 106f. 2006.RAMOS, A.K.B; SOUZA, M.A de; PIZARRO, E. A. Algumas informac;5es sobre a produc;ao e 0armazenamento de sementes de Cratylia argentea. In: EMBRAP A Centro de pesquisa agropecuariados cerrados (Planaltina, DF). Circular tecnica 25. Planaltina, p.l- 4. ISSN 1517-0187. 2003.REEDY, M.P.; SARLA, N.; SIDDIQ, E.A. Inter simple sequence repeat (ISSR) polymorphism and itsapplication in plant breeding. Euphytica, v.128, p.9-17, 2002.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/953111/1/17910001.pdf

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