COSTA, M. R.

MOURA, E. F.

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Uso de marcadores moleculares RAPD na caracterização de germoplasma de Ipeca (Phsychotria ipecacuanha), timbó (Denis urucu) e pimenta-do-reino (Piper nigrum).

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'Bolsista PIBIC/CNPq/EMBRAPA, aluna do 7' semestre de Biologia da UFPA'Pesquisadora MK Embrapa Amazônia Oriental37\USO DE MARCADORES MOLECULARES RAPO NA CARACTERIZAÇÃO DE GERMOPLASMA DE IPECA(Phsychotria ipecacuanha i,TlMBÓ (Derris urucu i E PIMENTA-DO-REINO (Piper nigrum sMOURA,Elisa Ferreira.' & COSTA, Maria Rosa.'Usa se o termo recursos genéticos para definir os componentes biológicos com uso atual ou potencial e de valor para ahumanidade. Apesar da grande importância, esses recursos têm sofrido gravíssimas ameaças,já que as atividades de extrativismo,sem plano de manejo, combinadas com a devastação das áreas verdes, têm contribuído para a grande erosão genética de materialvegetal. A formação de bancos de germoplasma é uma maneira de se tentar preservar a variabilidade genética de materiaisbiológicos, incluindo vegetal, com risco de extinção e que tem grande potencial agronômico, comercial e/ou medicinal. A escassezde informações sobre estes materiais é um problema que deve ser resolvido e a caracterização de germoplasma torna se necessária.Isto está evidente nas espécies vegetais medicinais e industriais como a ipeca iPhsychotria ipecacuanhai, timbó (De/Tis W'UCll) e apimenta-do-reino (Piper nigrum), cujo potencial sócio-econômico para a região Amazônica é grande. Os marcadores molecularessurgem como uma importante ferramenta na caracterização de germoplasma,já que avaliam diretamente o genótipo do indivíduo,evitando, assim, a expressão do fenótipo e a influência do ambiente sobre ele, além de ter uma abrangência maior sobre o genomadas amostras, ao contrário dos marcadores morfológicos e protéicos, que só abrangem a parte ativa (genes) do genoma. Estetrabalho é considerado prioritário devido a demanda existente nos bancos de gerrnoplasma da Embrapa Amazônia Oriental. onde aspesquisas visam quantificar a variabilidade genética as espécies. Diversas técnicas moleculares vêm sendo desenvolvidas e pelasimplicidade e rapidez, além de atender aos objetivos do trabalho. escolheu se para a fase inicial dos trabalhos. os marcadoresRAPO ( Random Amplified Polymorphic ONA ). Espera-se obter a caracterização mo\ecular das espécies trabalhadas. seusprodutos e informações, que podem ser de uso tanto da comunidade científica, quanto da sociedade em geral, representada pelosprodutores, indústrias e técnicos. Para a obtenção dos resultados, objetiva se otimizar o protocolo de extração de DNA, realizar aseleção de prirners e realizar o estudo dadivergência genética do germoplasrna das três espécies. O protocolo de extração deverá serbaseado no descrito por Doyle & Doyle, em 1990, com modificações, sempre visando a obtenção de quantidade ótima de DNA ecom um minímo de impurezas. Para a seleção de prirners "screening" - serão utilizados kits de primers arbitrários, num total de 80primers, que serão testados em quatro acessos de cada espécie. Os primers que apresentarem melhor amplificação de fragmentos epelo menos quatro bandas polimórficas serão selecionados. Serão feitas as reações RA PD, conforme protocolo descrito porWilliarns e outros autores, em 1990 para a construção de matriz de dados moleculares e análise de divergência genética em acessosde ipeca, pimenta-da-reino e timbó, Para a análise dos dados, as bandas que possuírem a mesma mobilidade serão consideradasidênticas. independente de sua identidade. Bandas muito fracas, ou que ocorrerem em um só indivíduo não serão consideradas. Osfragmentos polimórficos amplificados serão computados na forma de matriz retangular binária onde o "O" representará a ausência eo" I" a presença da banda. Para as análises utilizar-se-à o programa NTSYS-ps (Numerical Taxonomy and Multivariate System). Asim i laridade entre as amostras será estimada mediante a utilização dos coeficientes de Jacard e Dice.'Bolsista PIBIClCNPq/EMBRAPA, aluna do 7' semestre de Biologia da UFPA'Pesquisadora Msc. Embrapa Amazônia Oriental371

Uso de marcadores moleculares RAPD na caracterização de germoplasma de Ipeca (Phsychotria ipecacuanha), timbó (Denis urucu) e pimenta-do-reino (Piper nigrum).

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