BATISTA, L. A. R.

FERREIRA, E. C.

GODOY, R.

NOGUEIRA, A. R. de A.

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FOR-195-INFLUÊNCIA DO TEMPO E DAS CONDiÇÕES DE ARMAZENAMENTONA DETERMINAÇÃO DE TANINO EM SEMENTES DE GUANDU(1)EDILENE c. FERREIRA(2), LUIZ A. R. BATISTA(3), RODOLFO GODOY(3), ANA RITA A.NOGUEIRA(3)(1)Parte de Projeto de Iniciação Científica do primeiro autor-projeto financiado pelaFAPESP e EMBRAPA.(2)Estudante de Mestrado em Química-UFSCar-13560-970-São Carlos-SP(3)Pesquisador Científico, Embrapa Pecuária Sudeste, C.P. 339, 13.560-970-SãoCarlos-SP, e-mail: anarita@cppse.embrapa.brRESUMO: Três diferentes acessos de guandu (Cajanus cajan (L.) Millsp) foramplantados em casa de vegetação. Amostras de sementes foram coletadas,imediatamente analisadas e armazenadas em diferentes condições ("freezer", câmarafria e temperatura ambiente). As amostras foram então analisadas a cada 30 diasdurante um período de 285 dias. Os teores de tanino foram significativamentediferentes nos vários períodos de armazenamento, enfatizando a necessidade de seanalisar as amostras imediatamente após a coleta, para se ter resultados comparáveisentre acessos.PALAVRAS-CHAVE: acessos, polifenóis, seleção, taninos condensadosINFLUENCE OF STORAGE PERIOD ANO CONDITIONS ON TANNINDETERMINATION OF GUANDU SEEDSABSTRACT: Three differents accessions of guandu (Cajanus cajan (L.) Millsp) wereplanted in a greenhouse. The plots were harvested and immediately analyzed andstored in different conditions (freezer, cold camera and room temperature). Thesamples were analyzed each 30 days during a period of 285 days. The tanninconcentration showed to be significantly different in different storage period. Itindicates the need to analyze the samples immediately after the harvest in order tohave comparable results between accessions.KEYWORDS: accessions, condensed tannin, poliphenols, selectionINTRODUÇÃOAtualmente os taninos estão divididos em dois grandes grupos: os hidrolisáveis e oscondensados (DESHPANDE et aI., 1986). Os hidrolisáveis são ésteres hidrolisáveispor ácidos, tais como o ácido gálico e o ácido elágico, álcalis e tanase. Oscondensados mostram estruturas complexas, dímeros, trímeros, oligômeros epolímeros das estruturas básicas apresentadas pelas catequinas, antocianidinas eflavonas.Os sistemas biológicos sofrem interferências dos taninos, pois eles são potenciaisagentes quelantes de íons metálicos e antioxidantes biológicos, além de precipitar asPROCI-1999.00053FER1999SP-1999.00053proteínas. Estudos mostram pequenas evidências de que o consumo moderado éprejudicial à saúde, porém uma dieta com baixos teores seria benéfica pararuminantes e possivelmente para o homem (LEES et aI., 1992).Tendo em vista os estudos de melhoramento do guandu (Cajanus cajan (L.) Millsp)para alimentação animal, em execução na Embrapa Pecuária Sudeste (GODOY et aI.,1994) e tendo como base os estudos desenvolvidos por LEES e colaboradores(1992), atenta-se para a necessidade de correta quantificação dos taninoscondensados paralela à de fenóis totais, assim como às melhores condições dearmazenamento das amostras após a coleta e antes da quantificação.MATERIAL E MÉTODOSO trabalho, com duração de doze meses, consistiu de plantio e coleta das amostras,armazenamento em três condições de temperatura ("freeze r" , câmara fria etemperatura ambiente) e análise em períodos de tempo pré-estabelecidos. Amostrasde guandu, provenientes de três acessos contrastantes em relação ao teor de tanino,ora denominados G-84, G-146 e G-155, foram plantados em casa de vegetação.Todas as amostras, independentemente do método de análise, passaram pelo mesmoprocesso de extração (adição de 10 mL da solução 1% HCI em metanol a 0,25 g deamostra, 20 min de agitação, centrifugação por 8 min a 2000 rpm, separação dosextratos e análise) para quantificação de seus fenóis totais e taninos condensados.Após a obtenção dos primeiros resultados, cada amostra foi dividida em três porçõese armazenada, para as análises posteriores, em "freezer" (T=-200C), câmara fria(T=100C e umidade=25%) e temperatura ambiente (25 a 35°C, aproximadamente).Para análise dos fenóis totais foi utilizado método espectrofotométrico de "Folin Denis"(SWANN & HILLS, 1959), sendo empregado catecol como padrão colorimétrico. Paraa determinação dos taninos condensados foi utilizado o método da vanilina(DESHPANDE et aI., 1985; PRICE et aI., 1978), sendo utilizado como padrão a(-)-epicatequina.RESULTADOS E DISCUSSÃOO Quadro 1 apresenta os resultados das análises de variância, sendo que avariabilidade apresentada entre acessos foi maior do que as dos efeitos de época earmazenamento, permitindo a seleção de acessos com teores de tanino condensadoe fenóis totais diferenciados. A significância da interação entre acesso por épocadelimita o tempo que deve existir entre uma análise e outra para que a seleção sejamais efetiva. O Quadro 2 apresenta comparação entre médias das variáveis avaliadas.Os gráficos apresentados na Figura 1 mostram um comportamento esperado para asespécies químicas em questão. O teor de fenóis totais permaneceu superior ao dostaninos condensados do início ao final do período decorrido entre as análises (285dias), apresentando acentuada ascendência para as três variedades analisadas emfunção do tempo. Isto geralmente ocorre, pois atividades enzimáticas não estãototalmente inativadas, podendo haver interconversão entre espécies, detectadas pelosistema de análise de fenóis totais. Também conforme esperado, o teor de taninoscondensados apresentou menores variações, pois há menores probabilidades de queas atividades enzimáticas sejam responsáveis pela conversão de espécies maissimples em espécies quimicamente mais complexas, tais como as dos taninoscondensados.CONCLUSÕESO armazenamento das amostras mesmo por períodos inferiores a 30 dias não érecomendado, principalmente quando da determinação dos polifenóis totais. Ostaninos condensados, que melhor representariam as propriedades antinutricionais,apresentam-se menos susceptíveis a variações durante o armazenamento,especialmente quando este é realizado em câmara fria.REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS1. DESHPANDE, S.S.; CHERYAN, M. Evaluation of vanillin assays for tannin analysisof dry beans. J. Food Sci. V. 50, p. 905-910, 19852. DESHPANDE, S.S.; CHERYAN, M.; SALUNKHE, D.K. Tannin analisys offoodproducts. CRC Crit. Rev. Food Sci. Nutr. V. 24, p. 401-449, 1986.3. GODOY, R., BATISTA, L.A.R., NEGREIROS, G.F., Avaliação agronômica eseleção de germoplasma de guandu forrageiro (Cajanus cajan (L.) Millsp). Rev.Soc. Bras. Zoot., v. 23, n. 5, p. 730-742,1994.4. LEES, G.L. IN: HEMINGWAY, R.W.; LAKS, P.E. (Editors). Plant Polyphenols.Synthesis, Properties, Significance, Page 915, Plenum Press: New York, 1992.5. PRICE, M.L.; VAN SCOYOC, S.; BUTLER, L. G.; A critical of evaluation ofthevanillin reaction as an assay for tannin in sorghum grain. J. Agric. Food Chem, v.26, p. 1214-1218, 1978.6. SWAIN, T.; HILLlS, W. E.; The phenolic constituents of pruus domestica 1.- Thequantitative analysis of phenolic constituents. J. Agric. Food Chem, v. 10, p. 63-68,1959.QUADRO 1.Resumo das análises de variância com quadrados médio (QM) e as significâncias peloteste de Snedecor (F) para Tanino condensado (TC), Fenóis Totais (FT) e a relação entre ambos(TC/FT) nas diferentes fontes de variação (FV).FV : Grau de Liberdade : QM , Fl, •• Significativo a nível de 1% de probabilidade • Significativo a nível de 5% de probabilidadeNS Não significativo a nível mínimo de probabilidade de 5%.Influência do tempo e das1999 Sp-1999.00053\ \\1\1\ \\\1\ 1\\\1 \\1\\ 1\1\\ \\1\ \\\11\ \\1\ \\1\15247-1QUADRO 2.Médias, grupo de significância e número de observações envolvidos no contraste para ascaracterísticas tanino condensado (TC), polifenóis totais (FT) e a relação destes, nasdiferentes variedades e condições de armazenamento (câmara fria (CF), temperaturaambiente (TA) e "freezer" (F)).Fonte Varo ,Média Grupo, Núm.obs. ,, VARIEDA~~ , . TC FT' TC/FT : TC: FT 'TC/FT' TC FT: TC/FT ::G84 ' 667,15: 1384,71: 0,54458: A: B B' 40 40, 40:0146" - - - - - - ~ - 373,H'- -515"(5B~ - 'O~0{34V lr -,- - -Á - - ~ - -C- - ~- -,fQ- - - - - 40 - -,- - - 40 - -::G155 : 663,22: 1181,50: 0,63998: A: C ' A '40 40' 40 ''ARMAZ:CF 601,98: 2695,16' 0,4264 t A: A A 39 39, 39~TÂ ~ . 593 83'" '2EilB'43~ . D'426f6'" À' ',' . 'Á .. ~ .. A' . ~ . '4'2" 42 . " .. 42 .. :~F - - - - - - - - - ~ - 505:72:- -254-ÚT - 'O~41l484:- H -:- - -9 - - ~ - - A - - ~ - -J9- - - - - 39 - -:- - - 39 - - ::EPOCA " , , ":0 , 835,99, 1745,93: 0,62217, A, E , A ,3 3 3,,3D- - - - - - - - ",- 757~11 ~ - "3'010,1 F -0',55J87~ - 8 - ~- - 8- - ".- - '8- - ". - - -9"- - - - - 9 - - ~- - -5"4-- -,:6'0"- - - - - - - - ~- "493,59'- -258"8J9~ - 'O)908Y -C- -,- - -C - - ~ - -C -~- -J6- - - - - 36 - -,- - - "9- - - ::90 : 512,63: 1958,20: 0,28173: C: D : D : 54 54: 36 :'285 - - - - - - - -,- -1,tr6"47 - -47547Y -O'271"3B~-8 - 7 - - À- - -,- - n- - -,- - ~8 - - - - -1"8- - ~ - - -1"8- --,, I I I, I !, ,1. Médias seguidas pela mesma letra não diferem entre si pelo teste Tukey (P«O,05)~.----------------------------,••••--~---~----~----~------~Amostra G146 (a)_FrrrQol;'2Qf• FT"C,aJ'N.'rt.a•. FTT . .lIlMb.-T'Crrw..,- - T'C (oIfM.PrIil• TC T.,H'Mb.-••-r----------------------------,..•.,...~-r---~~~==~~~~~--~--~•...•••• T Il'_or Am ostra G155 (b)• FTCill'H.PrloI• FTT, tilfMb_T'C~Qf4 T'C C.il1'tf •••• 1.3T"C T• .lIJ'Nb,....:,,' .~- ..•. -.~--------~----------------~•••• ••r--=-:--..., Am ostra GB4 (C)~ FTrrQQ'2Qf• FTColIf".'rlo1•. FTT, ••"..b-T'Cfl'OQ2or---- T'C <.11M • PrLJ• T'C T.ilJ'Nb;-' "-.,'••.~----------------~--------~• •••FIGURA 1 .Teores de polifenóis totais (FT) e tanino condensado (Te) nos três ecessos de guandu: (a) G146; (b) G155e (c) G84, nas três formas de armazenamento (''free:zer'', câmara fria e temperftura ambiente) em turçêo dotempo._J

Influência do tempo e das condições de armazenamento na determinação de tanino em sementes de guandu.

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Influência do tempo e das condições de armazenamento na determinação de tanino em sementes de guandu.

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