No presente estudo investigou-se os efeitos anti-Leishmania chagasi do extrato hexânco A. chica, tendo como alvos celulares peptidases dos parasitos

ALVIANO, C. S.

BARROS, M. M. A.

CHAVES, F. C. M.

RODRIGUES, I. de A.

ROSA, M. do S. S.

VERMELHO, A. B.

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C. Ciências Biológicas - 10. Microbiologia - 1. Biologia e Fisiologia dos MicroorganismoEFEITO INIBITÓRIO DO EXTRATO HEXÂNICO DE Arrabidaea chica (Bignoniaceae) SOBREPEPTIDASES DE Leishmania chagasiO extrato hexânico obtido das folhas de A. chica apresentou atividade leishmanicida. Esta atividade pode estarassociada à inibição de peptidases importantes para o crescimento e infectividade de formas promastigotas deLeishmania chagasi.Igor de Almeida Rodrigues1Mariana Maria Azevedo Barros2Francisco Celio Maia Chaves3Celuta Sales Alviano4Maria do Socorro Santos Rosa5Alane Beatriz Vermelho61. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, UFRJ, Rio de Janeiro/RJ2. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, UFRJ, Rio de Janeiro/RJ3. EMBRAPA Amazônia Ocidental, Manaus/AM4. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, UFRJ, Rio de Janeiro/RJ5. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, UFRJ, Rio de Janeiro/RJ6. Profª Drª/Orientadora - Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, UFRJ, Rio de Janeiro/RJINTRODUÇÃO:Dentre  as doenças tropicais negligenciadas existentes a  leishmaniose  visceral  está  entre  as doenças maisimportantes causadas por protozoários no mundo devido a sua incidência, alta mortalidade em indivíduos nãotratados e crianças desnutridas e emergência em indivíduos portadores da infecção por HIV. Os medicamentosmais  usados  contra  a  leishmaniose  visceral  são  baseados  em  compostos  antimoniais  pentavalentes.  Noentanto,  o tratamento é doloroso,  os medicamentos são injetáveis e apresentam efeitos colaterais tóxicos,podendo ser fatais. Produtos naturais constituem uma importante fonte de novos agentes anti-microbianos compotencial  para,  no  futuro,  substituir  ou complementar  os tratamentos convencionais  que  possuam  efeitoscolaterais severos.  Arrabidaea chica ou crajirú, como é conhecida popularmente,  é uma planta utilizada namedicina  indígena  como  antiinflamatório  nas  inflamações  uterinas  e  vaginais,  como  anti-hemorrágico,cicatrizante e como agente adstringente. No presente estudo investigamos os efeitos anti-Leishmania chagasido extrato hexânco A. chica, tendo como alvos celulares peptidases dos parasitos.MÉTODOS:Formas promastigotas de L.  chagasi,  106 parasitas/ml,  foram incubadas por 120 horas em meio PBHIL napresença ou na ausência de diferentes concentrações (1 a 1000 µ/ml) do extrato hexânico de A. chica à 28ºCpara a determinação da concentração mínima inibitória (CMI). A viabilidade dos parasitas foi avaliada pelatécnica  em  microplaca  baseada  na  redução  da  resarzurina  descrita  por  Rólon e  colaboradores (2006).  Aultraestrutura dos parasitas também foi avaliada por microscopia eletrônica de transmissão. Os efeitos sobrepeptidases dos parasitas foram avaliadas por meio da determinação quantitativa da atividade em substrato degelatina. Macrófagos peritoneais de camundongos infectados ou não com formas promastigostas de L. chagasiforam  ainda  tratados  com  concentrações  inibitórias  e  sub-inibitórias  do  extrato  hexânico  e  a  eficácia  naeliminação de parasitas intracelulares foi determinada pela recuperação de promastigotas, como descrito porPassero e colaboradores (2011).RESULTADOS E DISCUSSÃO:A CMI do extrato hexânico de A. chica para formas promastigotas de L. chagasi foi de 31,1 µg/ml. O extratohexânico  parece  causar  danos  irreversíveis  às  células  tratadas,  uma  vez  que,  quando  reincubadas  comconcentração igual ou superior à inibitória, não são capazes de reestabelecer o crescimento. Quando avaliada aatividade de peptidases em extratos celulares de L. chagasi, aqueles tratados com a CMI do extrato hexânicoapresentaram  100%  de  inibição.  A  concentração  sub-inibitória  (15,5  µg/ml)  foi  capaz  de  reduzir  emaproximadamente 40% a atividade peptidásica dos lisados testados. Na avaliação da eficácia do extrato emmacrófagos previamente infectados com L. chagasi, ambas as concentrações, CMI e sub-inibitória, reduziram onúmero de parasitas internalizados e não se mostraram tóxicas para as células hospedeiras.CONCLUSÕES:Desta maneira, pudemos observar que o extrato hexânico de A. chica apresentou atividade leishmanicida paraL.  chagasi.  Sua atividade pode estar  relacionada a inibição de enzimas importantes para o crescimento einfectividade dos parasitas. Além disso, nenhuma toxidez foi observada para as células do hospedeiro mamífero(macrófagos) nas concentrações utilizadas neste  estudo.  Tais resultados mostram o potencial  de  produtosnaturais como o extrato de crajirú para a obtenção de compostos que poderiam ser utilizados na terapia dafile:///C:/Users/MARIAN~1/AppData/Local/Temp/resumo_SBPC2012.htm1 de 2 06/06/2012 16:06leishmaniose visceral.  Estudos em nosso laboratório estão em progresso para a caracterização química doextrato, bem como de seu(s) composto(s) ativo(s).Instituição de Fomento: CAPES, FAPERJ e CNPqTrabalho relativo a estudo/relato de caso/experiênciaPalavras-chave: Leishmania chagasi, Arrabidaea chica, Inibição de peptidasesfile:///C:/Users/MARIAN~1/AppData/Local/Temp/resumo_SBPC2012.htm2 de 2 06/06/2012 16:06

Efeito inibitório do extrato hexânico de Arrabidaea chica (Bignoniaceae) sobre peptidases de Leishmania chagasi.

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