CRESPO, L. M.

MACHADO, O. L. T.

OLIVEIRA, N. D. de

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V Congresso Brasileiro de Mamona / II Simpósio Internacional de Oleaginosas Energéticas & I Fórum Capixaba de Pinhão Manso, Guarapari (ES) – 2012 CONGRESSO BRASILEIRO DE MAMONA, 5 ; SIMPÓSIO INTERNACIONAL DE OLEAGINOSAS ENERGÉTICAS, 2 & I FÓRUM CAPIXABA DE PINHÃO MANSO, 2012, Guarapari. Desafios e Oportunidades: Anais... Campina grande: Embrapa Algodão, 2012. p. 20.    AVALIAÇÃO DE POTENCIAIS EPITOPOS ALERGÊNICOS DE ALBUMINA 2S DE  JATROPHA CURCAS L.   Lívia Maia Crespo.1; Natália Deus de Oliveira.2; Olga Lima Tavares Machado.3  1. Mestranda do curso de Biociência e Biotecnologia da UENF – liviamaiac@gmail.com; 2. Doutoranda do curso de Biociência e Biotecnologia da UENF – deusnaty@yahoo.com.br; 3. Professora UENF –olgauenf@yahoo.com.br  RESUMO – O pinhão-manso (Jatropha curcas L.) é uma planta de origem provável no México e América Central, apresenta algumas semelhanças com a mamona, ambas são euforbiáceas oleaginosas. Em ambas oleaginosas, alérgenos pertencentes à família das albumina 2S já foram caracterizados. As albuminas 2S são proteínas de reserva presentes em sementes de diversas plantas. O reconhecimento de epitopos alergênicos é de fundamental importância para a elaboração de novas estratégias para a desativação de alérgenos e para o desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento da alergia. O objetivo deste estudo foi elucidar possíveis epitopos ligantes de IgE em albuminas 2S de pinhão manso. A extração da proteína Jat c 1, um alérgeno presente nas sementes de pinhão-manso seguiu a metodologia descrita por Maciel e colaboradores em 2009. A proteína Jat c 1 foi isolada por cromatografia de exclusão molecular (Sephadex-G-50), seguido de cromatografia de fase reversa em coluna C2C18, sistema HPLC (High Performance Liquid Chromatography). A estrutura primária da proteína foi elucidada empregando o sequenciamento automático. A partir desta estrutura quatro peptídeos foram sintetizados (P1, P5, P6 e P8). Com base nos conhecimentos prévios que as albuminas 2S de mamona possuem aminoácidos ácidos (Glutâmico [E]  ou Aspártico [D]) na constituição dos seus epitopos alergênicos, buscamos os mesmos aminoácidos na estrutura primária de Pinhão Manso. Os peptídeos sintéticos foram tratados com reagente Woodward's K (WRK), um composta que reage com o grupamento carboxílico destes aminoácidos, e o potencial alergênico destes peptídeos foi investigado por  ensaios de desgranulação de mastócitos de rato. Os peptídeos modificados com o reagente WRK apresentaram menor percentual de desgranulação do que aqueles não tratados. Imunoensaios (ELISA) foram realizados e possibilitou detectar e quantificar a capacidade ligante de anticorpos específicos contra albumina 2S de pinhão-manso isolada. Nossos resultados apontam para a participação de aminoácidos dicarboxílicos na formação de epitopos nas albuminas 2S de pinhão manso. O reconhecimento de epitopos alergênicos é de fundamental importância para o desenvolvimento de futuras vacinas e agentes farmacológicos, deste modo, maiores estudos com relação a estrutura-função de albuminas 2S de J. curcas necessitam de especial atenção.  Palavras-chave: albumina 2S, epitopo, Jat c 1  Apoio: FINEP, CNPq, FAPERJ e EMBRAP  

Avaliação de potenciais epitopos alergênicos de albumina 2S de JATROPHA CURCAS L.

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