ANGELOTTI, F.

BARBOSA, L. G.

FERNANDES, H. A.

MAGALHÃES, E. E. de

PINHEIRO, G. S.

ZUCAL, M. P. M.

O objetivo do trabalho foi determinar o comportamento de F. oxysporum f. sp. tracheiphilum quanto à produção de esporos e ao crescimento vegetativo em diferentes temperaturas

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263 Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum ...Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum sob diferentes temperaturasGrowth and sporulation of Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum under different temperaturesResumoGiselle Souza Pinheiro1; Laise Guerra Barbosa2; Francislene Angelotti3; Edineide Eliza de Magalhães4; Heraldo Alves Fernades5; Marisa Perpétua Martins Zucal6 1Bolsista PIBIC CNPq/Embrapa Semiárido, Petrolina, PE.2Tecnóloga em Fruticultura Irrigada/Embrapa Semiárido, Petrolina, PE.3Engenheira-agrônoma, D.Sc. em Agronomia, pesquisadora da Embrapa Semiárido, Petrolina, PE,  fran.angelotti@cpatsa.embrapa.br.4Bióloga, Mestranda em Horticultura Irrigada, UNEB, Juazeiro, BA.5Biólogo, Bolsista FACEPE/ Embrapa Semiárido, Petrolina, PE.6Engenheira-agrônoma, bolsista FACEPE/ Embrapa Semiárido, Petrolina, PE.A murcha-de-fusarium é uma severa doença vascular do feijão-caupi. O desenvolvimento de estudos sobre este patossistema requer inoculações artificiais, sendo necessária a reprodução massal do inóculo. Sendo assim, o objetivo do trabalho foi determinar o comportamento de F. oxysporum f. sp. tracheiphilum quanto à produção de esporos e o crescimento vegetativo em diferentes temperaturas. O inóculo utilizado para o ensaio foi obtido de plantas de feijão-caupi, com infecção natural. Placas de Petri com meio de cultura BDA, contendo discos da cultura, foram mantidas a 15 ºC, 20 ºC, 25 ºC, 30 ºC e 35 ºC, sob fotoperíodo de 12 horas. Foi avaliado o diâmetro das colônias, durante 15 dias, e ao final do ensaio, em câmara de Neubauer, quantificou-se o número de esporos produzidos em 1 mL de suspensão. A temperatura influenciou o crescimento micelial do fungo, sendo o maior crescimento observado 264Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum ...Introduçãoa 30 oC. A maior produção de esporos foi em placas submetidas à temperatura de 35 oC. Verificou-se que a temperatura tem efeito no crescimento micelial e na produção de conídios de F. oxysporum f. sp. tracheiphilum, sendo que a faixa ótima, entre 30 °C35 oC, otimizam o crescimento e a esporulação do fungo.Palavras-chave: murcha-de-fusarium, feijão-caupi, conídios.A murcha-de-fusarium, causada pelo fungo Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum (Smith) Snyder & Hansen, é uma das principais doenças que ocorrem no feijão-caupi. A ocorrência da doença é mais frequente em regiões secas com altas temperaturas. O sintoma típico da doença é a murcha, entretanto, em um primeiro estágio ocorre a redução do crescimento e clorose, acompanhada de queda prematura de folhas, seguida da murcha típica e a morte das plantas (ATHAYDE SOBRINHO et al., 2005). Esta é uma doença potencialmente importante no Nordeste brasileiro, podendo causar perdas significativas em áreas produtoras de feijão-caupi (ELOY; MICHEREFF, 2003).Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum é um habitante de solo e vive saprofiticamente sobre a matéria orgânica e restos culturais, podendo sobreviver por vários anos na forma de clamidósporos. A disseminação ocorre por meio de sementes contaminadas, pelo vento e água de irrigação que transportam partículas de solo infestado e conídios (COELHO, 2001).As mudanças no clima podem produzir impactos significativos sobre os problemas fitossanitários, alterando a distribuição geográfica e temporal dos patógenos (GHINI et al., 2011). Desta maneira, o desenvolvimento de estudos sobre este patossistema requer inoculações artificiais, sendo necessária a reprodução massal de inóculo do patógeno. Sabe-se que a temperatura é um dos principais fatores ambientais que afeta a taxa de crescimento vegetativo e produção de esporos de diversos patógenos (WINDER, 1999; TEIXEIRA et al., 2006). Assim, a determinação da temperatura para as condições de cultivo de F. oxysporum f. sp. tracheiphilum poderá otimizar o crescimento e esporulação do fungo, sendo importante para a realização de estudos sobre os impactos das mudanças climáticas no crescimento do patógeno e sua relação com a planta hospedeira. O objetivo do trabalho foi determinar o comportamento 265 Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum ...Material e Métodosde F. oxysporum f. sp. tracheiphilum quanto à produção de esporos e ao crescimento vegetativo em diferentes temperaturas.O isolamento do patógeno foi realizado a partir de planta de feijão-caupi com infecção natural. Para o isolamento, coletou-se uma massa de esporos do caule com uma agulha esterilizada e os esporos foram transferidos para meio de Batata-Dextrose-Ágar (BDA) em placas de Petri. Após o isolamento, discos de micélio com 5 mm de diâmetro foram transferidos para placas contendo BDA e submetidas às temperaturas de 15 °C, 20 °C, 25 °C, 30 °C e 35 °C, sob fotoperíodo de 12 horas. O diâmetro das colônias nas diferentes temperaturas foi avaliado diariamente durante 15 dias, com o auxílio de uma régua milimetrada. Ao final deste período, foi avaliada a produção de esporos nas diferentes temperaturas. Para esta avaliação, foram adicionados 20 mL de água destilada esterilizada sobre a superfície da colônia, removendo o crescimento fúngico com o auxílio de uma espátula esterilizada. A suspensão obtida foi filtrada através de gaze de camada dupla esterilizada e a contagem de conídios, realizada, utilizando-se o hemacitômetro tipo Neubauer. O ensaio foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado e cada tratamento (temperatura) constituído de quatro repetições, sendo uma placa de Petri por repetição. As análises estatísticas foram realizadas no programa estatístico SISVAR (FERREIRA, 2000), por meio da análise de regressão.Resultados e DiscussãoVerificou-se que a temperatura influenciou o crescimento micelial do fungo, determinado pelo diâmetro da colônia. O crescimento micelial de F. oxysporum f. sp. tracheiphilum foi maior na temperatura  de 30 oC (Figura 1). Estudo semelhante foi realizado para F. oxysporum f. sp. psidii e F. solani, observando-se a maior taxa de crescimento da colônia em temperatura de 28 oC (GUPTA et al., 2010). Já para F. graminearum, F. culmorum e F. poae, a temperatura ótima para o crescimento das colônias foi 25 oC (DOOHAN et al., 2003).Houve efeito significativo da temperatura sobre a produção de esporos. A 35 ºC ocorreu maior esporulação (Figura 2). A relação 266Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum ...entre a temperatura e a produção de esporos foi descrita pela equação Y = 243304x2 - 792946x + 742500 (R2 = 0,94), onde y = número de conídos/mL e x = temperatura. Para a maioria das espécies de Fusarium, a temperatura ótima para a produção de esporos está na faixa que varia de 25 °C a 35 oC (DESAI et al., 2003; GUPTA et al., 2010). Para F. avenaceum, a temperatura diurna de 30 ºC e promoveu maior produção de conídios quando comparada com a temperatura de 20 ºC (WINDER, 1999). y = -0,3958x3 + 3,4286x2 - 7,6756x + 7,3825R2 = 0,9948012345670 1 2 3 4 5 65 0 25 30 35T e m p e ra tu ra  (oC)Di!metro da col"nia (mm)Di!metro da col"nia (mm)Figura 1. Crescimento micelial de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum, medido pelo diâmetro da colônia, em meio de cultura BDA, em função da temperatura (ºC).y = 243304x2 - 792946x + 742500R2 = 0,94805000001000000150000020000002500000300000035000000 1 2 3 4 5 615 20 25 30 35T e m p e ra tu ra  (oC)Con#dios/mL(x105)5101520253035Con#dios/mL(x105)5101520253035Figura 2. Esporulação (conídios/mL x 105) de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum, em meio de cultura BDA, em função da temperatura (ºC).267 Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum ...ConclusãoAgradecimentosOs resultados deste estudo determinaram as condições de cultivo necessárias para otimizar o crescimento e esporulação do fungo, sendo importante para a realização de estudos futuros sobre os impactos das mudanças climáticas no crescimento do patógeno e sua relação com a planta hospedeira.A temperatura tem efeito no crescimento micelial e na produção de conídios de F. oxysporum f. sp. tracheiphilum. As temperaturas entre 30 °C35 oC otimizam o crescimento e a esporulação do fungo.Ao CNPq, pelo incentivo financeiro e à Embrapa Semiárido, pelo apoio às atividades de pesquisa.ReferênciasATHAYDE SOBRINHO, C.; VIANA, F. M. P.; SANTOS, A. A. Doenças fúngicas e bacterianas. In: FREIRE FILHO, F. R.; LIMA, J. A. A.; RIBEIRO, V. Q. (Ed.). Feijão-Caupi: avanços tecnológicos. Brasília, DF: Embrapa Informação Tecnológica, p. 463-486, 2005.COELHO, R. S. B. Doenças fúngicas do caupi. In: REUNIÃO NACIONAL DE PESQUISA DO CAUPI, 5., 2001, Teresina. Anais... Teresina: Embrapa Meio Norte, 2001. p. 321-322.DESAI A. G.; DANGE S. R. S.; PATEL D. S.; PATEL D. B. Variability of Fusarium oxysporum f. sp. ricini causing wilt of castor. Journal Mycologycal Plant Pathology, Punjab, v. 33, p. 3741, 2003.DOOHAN, F. M.; BRENNAN, J.; COOKE, B. M. Influence of climatic factors on Fusarium species pathogenic to cereals. European Journal of Plant Pathology, Wageningen, v. 109, p. 755-768, 2003. ELOY, A. P.; MICHEREFF, S. J. Redução no rendimento do caupi em duas épocas de plantio devido à murcha-de-fusário. Summa Phytopathologica, Botucatu, v. 29, p. 330-333, 2003.268Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum ...FERREIRA, D. F. Manual do sistema Sisvar para análises estatísticas. Lavras: UFLA, 2000. 66 p.     GHINI, R.; BETTIOL, W.; HAMADA, E. Diseases in tropical and plantation crops as affected by climate changes: current knowledge and perspectives. Plant Pathology, Nottingham, v. 60, p. 122132, 2011.GUPTA, V. K.; MISRA, A. K.; GAUR, R. K. Growth characteristics of Fusarium spp. causing wilt disease in Psidium guajava l. in Índia. Journal of Plant Protection Research, Cambridge, v. 50, p. 451-462, 2010.TEIXEIRA, L. D.; ZOTTARELLI, C. L. A. P.; KIMATI, H. Efeito da temperatura no crescimento micelial e patogenicidade de Pythium spp. que ocorrem em alface hidropônica. Summa phytopathologica, Botucatu, v. 32, n. 3, p. 221-226, 2006. WINDER, R. S. The influence of substrate and temperature on the sporulation of Fusarium avenaceum and its virulence on marsh reed grass. Mycological Research, [New York], v. 103, p. 1.145-1.151, 1999. 

Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum sob diferentes temperaturas.

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Crescimento e esporulação de Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum sob diferentes temperaturas.

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