Cámara, Carmen

Luque-García, José Luis

López-Heras, Isabel

Madrid, Yolanda

Martín, Pilar

Santos-Aninciaçao, Daniela

Sánchez, Raquel

Repositorio Institucional de la Universidad de Córdoba

PROTEÓMICA                           Número 8, Febrero 2012 Pósters                                     S1: Proteómica Cuantitativa  86 P8 Análisis de la posible citotoxicidad asociada a las nanopartículas de selenio mediante herramientas de proteómica cuantitativa Isabel López-Heras1, Raquel Sánchez1, Daniela Santos-Anunciação1,2, Yolanda Madrid1, Pilar Martin3, Jose Luis Luque-García1, Carmen Cámara1 1 Dpto Química Analítica. Universidad Complutense de Madrid. Ciudad Universitaria s/n, 28040, Madrid; 2 Dpto Química Analítica. Universidad Federal de Bahia. Brasil; 3 Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares mailopez@quim.ucm.es El Selenio (Se) es un micronutriente esencial con importantes funciones biológicas y bioquímicas. Sus efectos beneficiosos han sido estudiados en numerosas ocasiones, sin embargo se sabe muy poco acerca de los efectos que presenta el selenio elemental en forma de nanopartículas (nano-Se) [1]. En estudios anteriores se ha demostrado la capacidad antioxidante de las nano-Se presentando una menor toxicidad que otros selenocompuestos orgánicos, como la selenometionina y selenometilselenocisteína [2].  El presente estudio se ha centrado en evaluar la posible toxicidad asociada a las nano-Se mediante el desarrollo de un estudio in-vitro. Para ello, se ha estudiado la influencia de las nano-Se en la proliferación celular empleando células de hepatocarcinoma humano (HepG2), así como las diferencias encontradas en la expresión de proteínas tras la exposición de dichas células a las nano-Se. En primer lugar, se optimizó un método de síntesis de nano-Se basado empleando el polisacárido chitosan como agente estabilizante. La presencia de un 0.1% de chitosan en el medio de síntesis fue esencial para obtener nano-Se estables de 40-50 nm. Con el fin de evaluar la proliferación celular, se emplearon diferentes concentraciones de nano-Se (0.1, 0.5, 1, 10 and 20 µg·mL-1) y diferentes tiempos de exposición (24 y 48 horas). Las diferencias encontradas en la expresión proteica fueron estudiadas, tras el tratamiento de las células con 0.1 ug nano-Se·mL-1 y 48 horas de incubación, mediante la estrategia SILAC seguida de SDS-PAGE y nano-LC-MS. Con objeto de complementar la estrategia proteómica, se han empleado otras técnicas tales como la citometría de flujo, la microscopía electrónica de transmisión y la inmunofluorescencia que han permitido por una parte validar los resultados obtenidos y por otra profundizar en los mecanismos biomoléculares involucrados en la interacción existente entre las nano-Se y dichas células.   [1] Zeng H. Selenite and Selenomethionine promote HL-60 cell cycle progression. The Journal of Nutrition 2002:674-79. [2] Zhang J, Wang X y Xu T. Elemental Selenium at Nano size (Nano-Se) as a potencial chemopreventive agent with reduced risk of selenium toxicity: comparison with Se-Methylselenocysteine in mice. Toxicological Sciences 2008:101:22-31. 

Análisis de la posible citotoxicidad asociada a las nanopartículas de selenio mediante herramientas de Proteómica cuantitativa

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