Erythropoietin as a protective factor in rat CNS cells receiving radiotherapy: An in vitro study

Abstract

Objetivo. Investigar el efecto de la eritropoyetina en cultivos celulares de corteza cerebral de ratas cuando se administra radioterapia. Materiales y métodos. El estudio se desarrolla con la obtención de corteza cerebral de embriones de 17 días de preñez de ratas Wistar. Las células cultivadas después de 72 horas de la extracción de la corteza se dividieron en dos grupos, a uno de ellos se le administró eritropoyetina alfa a una concentración de 30 pM y el otro era el grupo control. A los dos grupos de células se les radió con 6 Gy mediante un aparato Phoenix. Tras la radioterapia permanecieron 24 horas en la incubadora antes de fijarlas. Las células fueron fijadas con formaldehído al 4%. A continuación, con la técnica de TUNEL, se valoró el número de células apoptóticas en los cultivos radiados. Resultados. Se observó un porcentaje de apoptosis del 25,22% del grupo de cultivo sin eritropoyetina, mientras que en el grupo de células radiadas con eritropoyetina fue del 15,5%. Las variables cuantitativas se analizaron mediante el test t de Student y el resultado de la comparación entre los dos grupos fue estadísticamente significativo (p < 0,0001). Conclusión. En nuestro modelo experimental in vitro se comprobó que la eritropoyetina es eficaz en la prevención de la apoptosis en células del sistema nervioso central de ratas por radiación. Esto abre nuevos campos para la investigación del efecto protector del sistema nerviosoAim. To investigate the effect of erythropoietin in cultured rat cerebral cortex cells receiving radiotherapy. Materials and methods. Cerebral cortex was taken from 17-day-old Wistar rat embryos and placed in culture. At 72 hours, the cultures were divided into two groups, one receiving 30 pM erythropoietin alpha and the other was the control group. Both groups received 6 Gy from a Phoenix apparatus and were incubated for another 24 hours before fixation in 4% formaldehyde. TUNEL technique was employed to calculate the number of apoptotic cells in the irradiated cultures. 206 www.neurologia.com Rev Neurol 2014; 58 (5): 199-206 A. Gómez-De la Riva, et al Results. Apoptosis affected 25.22% of the cells cultured without erythropoietin and 15.5% in the group receiving erithropoyetin. Student’s t-test was used to analyse quantitative variables and showed a significant difference in apoptosis between the two groups (p < 0.0001). Conclusion. Our in vitro experimental model demonstrated that erythropoietin effectively prevents apoptosis in irradiated rat SNC cells, opening new fields for investigation into protective agents for the nervous syste