Búsqueda de genes regulados por el receptor de hormona tiroidea

Abstract

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Bioquímica. Fecha de lectura: 05-10-1995En este trabajo se ha desarrollado una mueva metodología para la búsqueda de genes regulados por el receptor de hormona tiroidea (TR) in vivo . En un primer paso se seleccionaron los fragmentos del DNA genómico unidos por el receptor in vitro. En el segundo paso se seleccionaron los fragmentos que contienen-sitios-de-unión-cercanos-a-genes-activamente-transcritos-en-el-hígadomediante una hibridación con cDNA. El análisis de la expresión de estos genes mostró que mas del 90% estaban regulados in vivo por hormona tiroidea. Este resultado, junto con la presencia de sitios de unión del TR, sugiere que los fragmentos seleccionados pueden contener elementos de respuesta a hormona tiroidea funcionales. Esta aproximación podría ser de utilidad para la búsqueda de genes regulados por otros factores de transcripción.A new methodology for the identification of genes modulated by the thyroid hormone receptor (TR) in vivo is described. Mouse genomic DNA fragments bound by the TR were selected and amplified in vitro. Subsequent hybridisation with biotinylated cDNA allowed the selection of those DNA fragments containing binding sites for TR that corresponded to transcribed DNA. Expression analysis of the corresponding genes showed that more than 90% are indeed modulated by thyroid hormones in vivo in the liver. Together with the presence of consensus binding sites for TR this result suggests that the selected DNA fragments may contain TR transcriptional regulatory elements. This method might be useful to other transcription factors with slight modifications