Thesis (Doctor of Environmental Studies)--University of Tsukuba, (A), no. 5763, 2011.3.25Includes bibliographical references (leaves 80-93

関 笛

筑波大学University of Tsukuba博士（環境学）Doctor of Philosophy in Environmental Studies2010【要旨】thesi

関, 笛

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Tsukuba Repository  (Tulips-R)

Study on physiological activity of Actinidiakolomikta roots extracts著者 関 笛内容記述 Thesis (Doctor of EnvironmentalStudies)--University of Tsukuba, (A), no.5763, 2011.3.25Includes bibliographical references (leaves80-93)発行年 2011URL http://hdl.handle.net/2241/114648関[242] 笛(中国)氏名(本籍)学位の種類学位記番号学位授与年月日学位授与の要件審査研究科学位論文題目????博 士(環境学)博甲第 5763 号平成 23年3月25B 学位規則第4条第 l項該当生命環境科学研究科Study on Physiological Activity of Actinidia kolomikta Roots正xtracts(Actinidia kolom治的の根の抽出物における生理活性とその評価に関する研究)????筑波大学教授筑波大学教授筑波大学教授筑波大学准教授博士(農学) 張 振亜農学博士 杉浦員Ij夫学術博士 氷銘揚四郎博士(生物工学) 楊 英男論文の内容の要旨Actinidia kolomikta (Rupr. et Maxim.)はActinidia中の落葉性の植物の一種で、その根はラオスで伝統的に糖尿病の治療薬として使用されてきた。本論文はバイオマスや植物資源の利活用の視点で、 A.kolomiktaの抽出物に対して、抗酸化活性、ガンの抑制活性及び免疫増強活性について検討し、低利用植物資源である A.kolomiktaから健康促進や病気治療のための新規医薬または機能性食品素材の開発を目的とした。本研究では、ラオス国から入手したActinidiakolomiktaの根を用いそれぞれの抽出物の総炭水化物とポリーフェノールの含有量を測定し、抗酸化活性、 DLD-1ガン細胞の増殖抑制作用及びマクロファージの免疫調節活性について評価を行った。結果として、 1000Cでの抽出物は 400Cの抽出物と比べ、より高い抗酸化活性を持つことがわかった。同じ温度での WE-EPの中の総炭水化物は WE-ESより高かったが、ポリーフェノールの含有量は WE-ESのほうが高かった。さらに、 SOD様活性と DPPHラジカル捕捉活性について、羽屯-ESのほうが高かった。よって、ポリーフェノール含有量が高いほど抗酸化活性が高いと考えられる。また、 WE-ESはDLD・1ガン細胞の増殖の抑制作用が抽出物の添加濃度及び添加時間に依存することがわかった。よって、 WE-EPと比べ、WE-ESのガン細胞の増殖抑制活性が高かった。DLD-1ガン細胞のアポトーシスを誘導する実験では、WE-ESによりガン細胞のアポトーシスが確認された。免疫細胞であるマクロファージ細胞を用いて、 ¥VE-EP、DEAE-WとDEAE-NaClの免疫調節活性を評価したところ、 2.5μg/ml-25μg/mlの濃度範囲で、抽出物はマクロファージの増殖、 NO産生と異物貧食を促進したことが判明した。さらに、汎用されている抗ガン剤である Doxorubicin(DOX)による免疫細胞へのダメージや副作用に対する緩和や保護効果について、実験を行ったところ、 DOX(5ドM)の添加でマクロファージの増殖が80%以上抑制され、 36%のアポトーシス誘導も確認されたことに対し、抽出物の添加 (25ほIml)の場合、 DOXによるマクロファージ細胞へのダメージが緩和され、マクロファージの増殖の抑制率は5%、アポトーシス誘導率は 20%までに改善されたことから、 WEεP、DEAE-WとDEAE司NaClはマクロファージの免疫強化活性を持っていることが認められた。541 さらに、 DEAE-WとDEAE-NaClはDEAE-SephadexA-50カラムクロマトグラフィーをj召し、て分離を行ったところ、 lOOOC¥VE-EPから得た多糖類のうち、 DEAE勾Wは中性多糖、 DEAE-NaClは酸性多糖であり、DEAE-NaClにより DEAE-Wのほうは免疫調節活性が高いことがわかった。 WE-EPはマクロファージに対して免疫調節活性を持つことが明らかとなった。また、粗多糖類に比べると、分離した多糖類のほうは活性が高いことがわかったD それらの抽出物について、汎用されている抗ガン剤である Doxorubicinによる免疫細胞へのダメージや副作用に対する高い緩和や保護効果が確認された。審査の結果の要旨本論文はバイオマスや植物資源の利活用の視点から、 Actiniduzの中の落葉性の植物の一種である Actinidiakolomikta (A. kolomikta)の抽出物に対して、抗酸化活性、ガンの抑制活性及び免疫増強活性について検討し、低利用植物資源である A.kolomiktaから健康促進や病気治療のための新規底薬または機能性食品素材の開発に科学的根拠を提供したものである。体内に過剰に作られた「活性酸素jはさまざまな病気の原習と言われており、正常な細胞を攻撃し、酸化させ、細胞内の DNAを傷つけたりすることにより、ガン細胞を発生させることもある。先行の研究ではカロテノイド類やフラボノイド類などの多くの天然植物出来物質はガンの予防や治療に有効であることが判明した。本研究では、まず、 Actinidiβkolomiktaの根の水抽出物であるWE-EPとWE-ESは高い抗酸化活性を持ち、 DLD-lガン細胞に対して増殖抑制活性も有することが判明した。100 oCでの抽出物は 400Cの抽出物と比べ、より高い抗酸化活性を持つことが明らかとなった。ポリーフェノール含有量が高いほど抗酸化活性が高いと認められた。そして、 WE-EPはDLD-lガン細胞の増殖に抑制作用があり、その抑制効果は濃度依存的であり、 WE-ESはDLD-lガン細胞の増殖の抑制作用が抽出物の添加濃度及び添加時間に依存するという貴重な知見が得られた。よって、 WE-EPと比べ、 WE主Sのガン細胞の増殖抑制活性が高かったことが示唆された。また、 WE-EPはマクロファージに対する免疫強化活性を持つことが明らかとなった。粗多糖類に比べると、分離した多糖類のほうが活性は高いことがわかった。それらの抽出物について、汎用されている抗ガン剤である Doxorubicinによる免疫細胞へのダメージや副作用に対する高い緩和や保護効果が確認され、非常に重要な知見であると判断される。 A.Iwlom治的の根の抽出物に対して、貴重な実験データが得られ、今後、生物資源の手IJ活用の視点から、 A.Iwlomiktαから糖尿病の治療薬をはじめ、ガンの治療と免疫強化活性のある新規医薬品の開発への応用に科学的かつ技術的助言が提供できた点をオリジナリティに富む研究として高く評価できる。よって、著者は博士(環境学)の学位を受けるに十分な資格を有するものと認める。542 

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