thesis

Molekulare Analysen zur Oligosaccharidbildung in Actinoplanes sp.

Abstract

Während der Fermentation bildet Actinoplanes sp. Pseudooligosaccharide als Sekundärmetabolite, deren gemeinsame Core-Grundstruktur aus ungesättigten C7N-Cycliten (Valienamin) und einer 4,6-Didesoxy-D-glucopyranose besteht. Die beiden Moleküle sind dabei über (-1,4-N-glycodische Bindung verknüpft. Die als Acarviosin bezeichnete Core-Struktur ist essentiell für die Hemmwirkung. Bei der (-Glucosidase Inhibitor Acarbose ist Acarviosyl-Core mit einer Maltosyleinheit verbunden. Neben Acarbose konnten verschiedene Homologen der Acarbosereihe im Kulturfiltrat gefunden werden. Bei der Komponente C wird der Acarviosyl-Core mit Trehalose statt Maltose verknüpft. In Actinoplanes sp. wurde Trehalose durch drei verschiedenen Biosynthesewege synthetisiert; (1) die Trehalose-Bildung aus Maltooligosaccharid mittels der MTSase (TreY) zusammen mit der MTHase (TreZ), (2) die Umsetzung von Maltose zu Trehalose durch die TreSase (TreS), (3) die Trehalose-6-Phosphat-Biosynthese aus aktivierten Vorstufen wie UDP-Glucose und Glucose-6-Phosphat durch die Tps1ase (Tps1). Nach der Inkubation von Acarbose mit dem Enzym MTSase (TreY) wurde die in vitro-Bildung von Komponente C mittels HPLC nachgewiesen

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