HABITFloraciones Algales Nocivas en Capas Fina

González-Gil, S. (Sonsoles)

Ramilo-Rivero, M.I. (María Isabel)

Reguera, B. (Beatriz)

Velo-Suárez, L. (Lourdes)

English

Repositorio Institucional Digital del IEO

MATERIAL Y MÉTODOS• Muestreo realizado durante la campaña HABIT 2005 (30 mayo – 14 junio de 2005) en Ría de Pontevedra. Para la presentación de resultados se escogió la estación Boca Norte (P5) (Figura 1).• Se seleccionó la fracción de de 20-77 µm en muestras tomadas con bomba peristáltica, que se fijaron con lugol o formolsegún objetivos. Se estimó el porcentaje de células con almidón y con vacuolas contando un mínimo de 100 células pormuestra.• Las medidas morfométricas se realizaron utilizando el programa informático Image Pro Plus  4.0 (Media Cybernetics).• La tinción del DNA se realizó con el fluorocromo SyBrGreen (Molecular Probes, Oregon). Las muestras se observaron bajoun microscopio invertido Nikon Eclipse 2000 con filtro azul (Ex 450/490 nm, Em 520 nm LP). Todas las fotos se hicieron con una cámara Nikon D70 a 10x y 40x.• Las tasas de division in situ se hicieron según el método del índice mitótico de acuerdo con Reguera et al. (2003)Figure 9- Cell cycle and division patterns of D. acuminataon 13-14 June 2005, Horizontal bar at the top of graphindicates the period between sunset and sunrise.μavg = 0.56RESULTADOS Y DISCUSIÓNLos mayores porcentajes de D. acuminata con depósitos de almidón se detectaron en la estación más externa de la Ría de Pontevedra (Boca Norte) (Fig 2), el 6 de Junio, cuando los pulsos de afloramiento eran intensos (Fig 1). El mayor porcentaje de células con almidón se observó en la capa superficial (0-5m) de agua (Fig 4). La comunidad fitoplanctónica el 6 de junio en la Boca Norte estaba compuesta principalmente por diatomeas del género Chaetoceros y Leptocylindrus. La concentración de D. acuminata era de unas 5100 cels/ml distribuídas verticalmente en los primeros cinco metros de la colum a de agua (Fig 5).La distribución celular de los dépósitos de almidón en D. acuminata presentó dos patrones de agrupación: en forma de cadena y en racimos (Fig 3). El tamaño medio de los gránulos de almidón fue L= 7.55±1.59, W = 7.37±1.47 µm. Se observó la presencia de un parásito en D. acuminata durante el ciclo de 24 hr (Fig.11) al final de la campaña .La mayor concentración de células vacuoladas se encontró el 8 junio (Fig 6), durante la relajación (ver Fig 1). Las vacuolas de D. acuminata eran menores que las de D. rotundata (L = 5.66±1.62, W = 5.51±1.38 μm y L = 7.60±1.89, W = 7.48±1.82 μm respectivamente) (Fig. 8). Algunas vacuolas digestivas de D. acuminata se tiñeron positivamente con el fluorocromo SyBrGreen, indicando la presencia de ácidos nucleicos en su interior (Fig 9A). Algunas vacuolas encontradas en el heterótrofo D. rotundata mostraron restos de DNA (Fig. 9B) y en otros casos, una intensaautofluorescencia naranja (ficoeritrinas) (Fig 9C, D). Esta última observación indica que NO SIEMPRE la detección de estos pigmentos en Dinophysis spp. constituye un hipotético paso previo a la cleptoplastidia. La tasa de división intrínseca (µmin y µ) reveló un crecimiento moderado durante los días 3 (afloramiento) y 9 (relajación) (µmin hasta 0.16 d-1), y un crecimiento máximo durante el ciclo de 24 horas (13-14 junio) durante el hundimiento (µmin= 0.25 d-1; µ= 0.56 d-1) (Fig 10).Se observó una evolución de células de pequeño tamaño no vacuoladas (inicio del afloramiento) a células de mayor tamaño y vacuoladas (relajación) y finalmente células con cuerposrefringentes (hundimiento) a lo largo de la campaña. Estas células de mayor tamaño se concentraban generalmente en superficie. La vacuolación puede representar una estrategia paraincrementar el tamaño de una población que se encuentre depauperada.Estos resultados muestran un acoplamiento entre la variabilidad del comportamiento nutricional de D. acuminata y las distintas fases de los pulsos de afloramiento/hundimiento que indican el uso de distintos modos de nutrición.AGRADECIMIENTOS: A la tripulación del B/O  “Mytilus”. Trabajo realizado con fondos del Proyecto HABIT (EU FP6 003932). Contribución al CRP HABs in Stratified Systems del Programa GEOHABEl mayor porcentaje de células con acúmulos de almidón se detectó en la capa superficial (0-2m) (54.81% a 1.1 m)Fig 4- Perfil vertical del porcentaje de células con acúmulos de almidón en la Boca Norte, el 6 de Junio de 2005.0 20 40 60 80 1001.14.59.514.327.9profundidad (m)% célulasen cadena agrupados sin almidónFig 8 - Distribución y tamaño de las vacuolas en D. acuminata y D. rotundata. (A) célula de D. acuminata con vacuolas digestivas, (B) sin vacuolas, (C) célula de D. rotundata llena de vacuolas digestivas. Barra = 20 μm. El tamaño medio de las vacuolas es (LxW) = 5.66 x 5.51 mm, n= 67 y 7.60x7.48 mm, n= 73 respectivamente.A B CFig 2- Porcentage de células con depósitos de almidón en la estación Boca Norte a lo largo de Junio de 2005.020406080100% células1 2 3 6 8 9díasen cadena agrupados sin almidónEl mayor porcentaje de células con acúmulos de almidón se detectó el 6 de Junio, coincidiendo con una entrada de agua fría (12ºC) en la ría.Fig 10- Ciclo celular y patrón de división de D. acuminatadurante un ciclo de 24 hr el 13-14 de junio. La barra negra horizontal indica el periodo entre el amanecer y el ocaso.17:00 19:00 21:30 00:00 02:30 05:00 07:30 10:00 12:300.000.050.100.150.200.250.30 Paired cells Recently divided cells Polynomial fit of paired cells distribution Polynomial fit of recenly divided cells distributionFrequencyGMT Time (hr)μmedia = 0.560 200000 400000 600000 800000 1000000 120000027.914.39.54.51.1profundidad (m)células ml-1Chaetoceros spp.Leptocylindrus spp. Pseudonitzschia spp.Other diatoms0 20000 40000 60000 80000 100000 12000027.914.39.54.51.1profundidad (m)células ml-1Naked Dinoflagellates Armoured Dinoflagellates Prorocentrum micansCryptophytes Dinophysis acuminataFig 5- Distribución vertical de especies presentes en la Boca Norte el día 6 de Junio de 2005. • La mayor concentración de D. acuminata se da en los primeros metros de la columna, con valores aproximados de 5100 células ml-1. • Las especies acompañantes son principalmente diatomeas del géneroChaetoceros y Leptocylindrus.Fig 9- Vacuolas digestivas en Dinophysisspp. (A, B). Vacuolas de D. acuminata (A) y D. rotundata (B) mostrando restos de DNA, teñidos con SybrGreen, en su interior.  (C, D) Vacuolas de D. rotundatacon una intensa autofluorescencia naranja similar a la de la ficoeritrina.RESUMEN- Durante la campaña multidisciplinar HABIT 2005 (Ría de Pontevedra, Galicia), se realizaron observaciones morfológicas en poblaciones de Dinophysis spp, para analizar in situ el estado fisiológico de sus poblaciones (presencia o ausencia de depósitos de almidón, formación de vacuolas, estimaciones de tasa de división, mediciones morfométricas y autofluorescencia). Se encontraron evidencias demixotrofía tanto en D. rotundata (heterótrofo) como en D. acuminata. En esta última,se detectó un mayor acúmulo de depósitos de almidón al principio del pulso de afloramioento, de vacuolas digestivas durante la relajación y de gránulos refringentes y células parasitadas durante el hundimiento. Se ilustran los distintos estados fisiológicos en relación con el pulso de afloramiento/hundimiento.-9 -8.9 -8.8 -8.742.342.4ADepth( m)-30-20-1012.51313.51414.51515.51616.517031   01   02   03   04   05   06   07   08   09   10   11   12 13 días de junio 2005BFig 1. (A) Localización de la estación de muestreo Boca Norte(B) Distribución vertical de la temperatura (ºC). Fig 3- Distribución y tamaño de los gránulos de almidón enD. acuminata. (A) en forma de cadena, (B) de forma agrupada. Su tamaño medio es (LxW) = 7.55 x 7.37 μm, n= 38A BFig 11- (A) D. acuminata albergando un parásito en su interior. (B) epifluorescencia de la misma célula. (C) célula fijada con glutaraldehído y teñida con SybrGreen, mostrando el característico núcleo punteado de los parásitos (Salomon et al. 2003). Barra = 20 μmA B CBIBLIOGRAFÍASalomon et al. (2003). Environ. Microb. 5: 1046-1052Reguera et al. (2003). MEPS 249: 117-13105101520% células vacuoladas1 2 3 6 8 9díasFig 6- Porcentaje de células de D. acuminata con vacuolas digestivas en la estación Boca Norte a lo largo de Junio de 2005.El mayor porcentaje de células con vacuolas digestivas se detectó el día 8 de Junio, coincidiendo con una relajación del afloramiento.CA BDEstudio fisiológico de Dinophysis spp. durante un ciclo de afloramiento/hundimiento en la Ría de PontevedraSonsoles González-Gil, Lourdes Velo, Isabel Ramilo y Beatriz RegueraInstituto Español de Oceanografía. Centro Oceanográfico de Vigo. Aptdo 1552. 36280 Vigo, SpainFig 7- Perfil vertical del porcentaje de células vacuoladas de D. acuminata en la Boca Norte, el día 8 de Junio de 2005.El mayor porcentaje de célulasvacuoladas de D. acuminata se encuentra a 1 m (56.85%).0 10 20 30 40 50 60 70% células12.23.25.48.611.714.616.730profundidad (m)

Estudio fisiológico de Dinophysis spp. durante un ciclo de afloramiento/hundimiento en la Ría de Pontevedra

González-Gil, Sonsoles

Velo-Suárez, Lourdes

Ramilo-Rivero, María Isabel

Reguera Ramírez, Beatriz

Digital.CSIC

http://www.repositorio.ieo.es/e-ieo/bitstream/10508/12510/1/2007-%20Glez-Gil%20et%20al%202007.%20IX%20Reunion%20Iberica%20Cartagena%20%28poster%29.pdf

Estudio fisiológico de Dinophysis spp. durante un ciclo de afloramiento/hundimiento en la Ría de Pontevedra

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Repositorio Institucional Digital del IEO

Digital.CSIC