O vírus da leucose bovina (BLV) é um Deltaretrovirus oncogênico amplamente difundido, associado a importantes perdas econômicas na pecuária leiteira em todo o mundo e é endêmico nos rebanhos bovinos brasileiros. Apresenta-se aqui um relato retrospectivo de 13 anos (2011-2023) de diagnóstico sorológico de BLV realizado no Setor de Virologia - Universidade Federal de Santa Maria. O estudo incluiu amostras de 11727 bovinos de 1086 rebanhos (principalmente leiteiros) localizados em 189 municípios de três estados que compõem a segunda bacia leiteira do Brasil, Rio Grande do Sul (RS), Santa Catarina (SC) e Paraná (PR). As amostras foram testadas por imunodifusão em ágar-gel (IDGA) ou ensaio imunoenzimático (ELISA). No geral, a soroprevalência animal foi de 38,1% (4467/11727) e a prevalência de rebanho 64,5% (700/1086). Os três estados (RS, SC e PR) apresentaram prevalências de animais semelhantes (39,1%, 37,6% e 35,9%, respectivamente). As prevalências do rebanho foram 63,5% (RS), 65,2% (SC) e 67,2% (PR). No conjunto, o rebanho e a soroprevalência dos animais apresentaram tendência crescente de 2011 (57,5% e 19,6%, respectivamente) a 2023 (73,8% e 60,4%). Esses resultados demonstram que o BLV continua circulando amplamente nos rebanhos bovinos dos três estados do Sul e indicam a necessidade de medidas oficiais e/ou voluntárias para controlar e reduzir a prevalência e as perdas associadas à infecção e doença pelo BLV