Determinación de compuestos fenólicos en frutillas (Fragaria x ananassa Duch.) por HPLC con detección por arreglos de diodo (DAD)

Abstract

simultánea de compuestos fenólicos en muestras de frutillas y estudiar su correlación con el método de Folin-Ciocalteu (F-C). Los análisis se realizaron antes y después de una hidrólisis ácida sobre las muestras, utilizando metanol como extractante, con el objetivo de determinar los compuestos fenólicos libres y conjugados. Las condiciones de hidrólisis ácida (4 mol L-1 HCl, 50 min a 90 °C) demostraron ser aptas tanto para los compuestos fenólicos estándares como para los extractos de frutilla. La fase móvil consistió en un gradiente preparado a partir de ácido fórmico en agua (2%, pH 3) y ácido fórmico en metanol (2%, pH 3), y una velocidad de flujo de 0,7 ml min-1 a 25 °C. La separación se realizó en una columna Supelcosil LCABZ de 150 x 4,6 mm, 5 μm. Los compuestos fenólicos estándares utilizados fueron a) Flavonoides: quercetina, rutina y kaempferol (flavonoles); catequina y epicatequina (flavanoles) y cianidina y pelargonidina (antocianidinas), y b) Ácidos fenólicos: ácidos gálico y elágico (derivados del ácido hidroxibenzoico) y ácidos ferúlico, cumárico y cinámico (derivados del ácido hidroxicinámico). La validación del método, utilizando soluciones estándares de compuestos fenólicos incluyó estudios de linealidad, límites de detección y cuantificación y determinación de la sensibilidad analítica y de calibración. La precisión y exactitud del método se realizó sobre extractos de fruta. Los resultados indicaron que el método desarrollado fue lineal, sensible, preciso y exacto, y que el metanol puede sustituir al acetonitrilo (más comúnmente usado). El método fue empleado para identificar y cuantificar el perfil de compuestos fenólicos en cinco cultivares de frutillas de Italia (Favetta, Camarosa, Chandler, Darselect y Maya) y dos de Argentina (Camarosa y Selva). Las medianas de los compuestos fenólicos (mg 100 g-1 fruta fresca) antes y después de la hidrólisis ácida fueron: ácido gálico (2,79; 10,22), catequina (2,41; 0,95), epicatequina (-; 10,84), ácido ferúlico (-; 1,03), ácido cumárico (-; 1,55); cianidina (-; 4,46), pelargonidina (-; 18,67), rutina (1,00; 0,11), ácido cinámico (0,14; 0,96), ácido elágico (0,75; 11,70), quercetina (-; 0,32) y kaempferol (-; 0,09). Se analizó, además, el contenido fenólico total antes y después de la hidrólisis ácida por el método de F-C. El contenido de compuestos fenólicos obtenidos para los siete cultivares de frutillas estuvieron dentro de los rangos reportados por otros investigadores. Por otra parte, el contenido fenólico total obtenido como la suma de cada compuesto fenólico analizado por HPLC-DAD, presentó buena correlación con el contenido fenólico total analizado por el método de F-C, antes (0,73) y después de la hidrólisis ácida (0,86)

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