Bellanger, Anne-Pauline

Borg, Christophe

Dalphin, Jean-Charles

Millon, Laurence

Pallandre, Jean-René

Reboux, Gabriel

Sophie, Loeffert

HAL - Université de Franche-Comté

Human monocyte-derived dendritic cells exposed tomicroorganisms involved in hypersensitivity pneumonitisinduce a Th1-polarized immune response.Anne-Pauline Bellanger, Jean-Rene´ Pallandre, Christophe Borg, LoeffertSophie, Gabriel Reboux, Jean-Charles Dalphin, Laurence MillonTo cite this version:Anne-Pauline Bellanger, Jean-Rene´ Pallandre, Christophe Borg, Loeffert Sophie, Gabriel Re-boux, et al.. Human monocyte-derived dendritic cells exposed to microorganisms involved inhypersensitivity pneumonitis induce a Th1-polarized immune response.. Clin Vaccine Immunol,2013, 20 (8), pp.1133-42. <10.1128/CVI.00043-13>. <hal-00634840>HAL Id: hal-00634840https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00634840Submitted on 24 Oct 2011HAL is a multi-disciplinary open accessarchive for the deposit and dissemination of sci-entific research documents, whether they are pub-lished or not. The documents may come fromteaching and research institutions in France orabroad, or from public or private research centers.L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, estdestine´e au de´poˆt et a` la diffusion de documentsscientifiques de niveau recherche, publie´s ou non,e´manant des e´tablissements d’enseignement et derecherche franc¸ais ou e´trangers, des laboratoirespublics ou prive´s.Interactions initiales entre cellules dendritiques et micro-organismes impliqués dans les pneumopathies d’hypersensibilité   A.P. Bellanger1,2, J.R. Pallandre3, C. Borg3, S. Loeffert1,  G. Reboux1,2, J.C. Dalphin4, L. Millon1.  1. Girard et al, 2009, Allergy. 2. Buentke et al, 2003, APMIS. 3.Chamilos et al, 2010, Plos One. Références Exposition:  Des DCs humaines, dérivées de monocytes, ont été exposées pendant 24h à des extraits totaux de 2 moisissures-Eurotium amstelodami (EA) et Wallemia sebi (WS)-, 1 actinomycète -Saccharopolysopora rectivirgula (SR)-  et 1 mycobactérie -Mycobacterium immunogenum (MI)- à la dose de 10 µg/ml par puits cellulaire. Matériel et Méthodes Les pneumopathies d’hypersensibilité (PHS) sont des pathologies pulmonaires inflammatoires chroniques, carac-térisées par une alvéolite lymphocytaire, et liées à l’inhalation répétée de micro-organismes environnementaux (moisissures, actinomycètes, mycobactéries) (1). Les mécanismes physiopathologiques mis en jeu dans le développement des PHS sont complexes et restent mal connus.  Les cellules dendritiques (DCs) sont des cellules présentatrices d’antigènes et jouent un rôle prépondérant dans l’activation et la différenciation de lymphocytes lors de l’inhalation d’allergènes (2).  Objectif : étudier les interactions initiales entre DCs et 4 micro-organismes de nature différentes et impliqués dans les PHS industrielles et agricoles. Discussion et conclusion Activation phénotypique des DCs après exposition Cytométrie de flux (BD Canto II): CD11c (PE),  CD86 (PecyTM7), CD80 (APC), CD83 (FITC). ELISA: IL-12, IL-10, IL-23, IL-8. Activation fonctionnelle des DCs  Mesure de la prolifération de lymphocytes T totaux marqués au CFSE, après 5 jours de contact avec les DCs activées (MLR=mixed lymphocytic reaction). Après exposition aux moisissures, E. amstelodami et W.sebi,  les DCs produisent des taux élevés d’IL-23 et d’IL-10 alors qu’après exposition à l’actinomycète S. rectivirgula et à la mycobactérie M. immunogenum, seule l’IL-8 a été retrouvée à taux élevés.   La production d’IL-23 par les DCs pourrait être due à la reconnaissance des beta-glucanes, présents au niveau de la paroi des moisissures, par la voie de signalisation syk-CARD9 (3). Par ailleurs, M. immunogenum induit une nette prolifération des LT CD4+ (54%) alors que l’expression des CD80, CD86 et CD83 mesurée (<20%) n’était pas différente de celle des DC immatures (Dci). L’activation des DCs par cette mycobactérie ne semble donc pas passer par le CD28/B7, à la différence des 3 autres micro-organismes testés (30 à 60% de surexpression des CD80, CD86 et CD83).  En conclusion, ces premiers essais suggèrent que chaque micro-organisme testé est capable d’activer les cellules dendritiques mais en utilisant des voies de signalisation différentes.  Résultats 0 1000 2000 3000 4000 Dci LPS-DCs SR-DCs MI-DCs EA-DCs WS-DCs Pg/ml IL-8 IL-12 IL-10 IL-23 % moyen d’expression des CD80,CD86 et CD83 Taux de cytokines/chemokines dans les surnageants 0 20 40 60 80 100 Dci LPS-DCs SR-DCs MI-DCs EA-DCs WS-DCs % expression CD 0 20 40 60 80 LPS-DCs SR-DCs MI-DCs EA-DCs WS-DCs % prolifération des LT CD4+ CD8+ % de prolifération des LT après MLR Introduction 1. Laboratoire Parasito-Mycologie du CHRU J. Minjoz, 2. UMR/CNRS 6249 Chrono Environnement, 3. Inserm UMR 645, EFS Bourgogne Franche-Comte, IFR 133, 4. Service de Pneumologie CHRU J.Minjoz  F- 25000 BESANÇON 

Interactions initiales entre cellules dendritiques et micro-organismes impliqués dans les pneumopathies d’hypersensibilité

Hal-Diderot

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