Introduzione e scopo. Il Rabdomiosarcoma (RMS), tumore
a piccole cellule rotonde blu, \ue8 il pi\uf9 comune sarcoma dei
tessuti molli pediatrici. In circa 20% dei casi si presenta con
malattia diffusa alla diagnosi e le sedi pi\uf9 frequentemente
coinvolte sono polmoni, linfonodi e midollo osseo (BM).
Attualmente, l\u2019infiltrazione midollare di cellule di RMS \ue8
rilevata dall\u2019 analisi morfologica dell\u2019 aspirato midollare e/o
delle biopsie osteo-midollari. Questi metodi tuttavia non
riescono a rilevare un\u2019infiltrazione neoplastica inferiore al
5%. Sulla base delle caratteristiche cliniche e biologiche del
RMS, abbiamo standardizzato un metodo quantitativo di
RT-PCR basato sul marcatore RMS-specifico MyoD1, al
fine di studiare la malattia minima disseminata(MMD) in
bambini con RMS. Materiali e metodi. Abbiamo condotto
studi di RT-PCR quantitativa relativa per il gene MyoD1
mediante tecnologia TaqMan. I primers specifici per
MyoD1 e la sonda sono stati individuati usando il software
specifico Primer Express (Applied Biosystems). GUS \ue8
stato utilizzato come gene housekeeping ossia come controllo
endogeno per ogni campione. Risultati. Abbiamo studiato
il BM alla diagnosi di 39 pazienti affetti da RMS. La
metodica \ue8 di facile applicazione ed unisce l\u2019alta sensibilit\ue0
alla specificit\ue0. MMD era positiva in 17/39 pazienti. I livelli
di espressione di MyoD1 in 7/17 campioni, positivi anche
mediante RT-PCR qualitativa, hanno mostrato valori di Ct
che variavano in un range da 21 a 27, mentre in 10 casi,
negativi in RT-PCR, il valore di Ct era superiore a 35. In 14
pazienti abbiamo potuto studiare la malattia minima anche
nel sangue periferico. 10/14 sono risultati positivi con valori
di Ct in un range da 35 a 38, indipendentemente dalla
positivit\ue0 midollare. Conclusioni. Questi risultati preliminari
suggeriscono che il coinvolgimento midollare alla diagnosi
\ue8 discretamente frequente in pazienti con RMS e che
la MMR pu\uf2 essere rilevata, anche se a livelli molto bassi,
nel sangue periferico indipendentemente dall\u2019infiltrazione
midollare
