Dübap proje destekliAnti-HOST uygulaması sonucu sperm membran fonksiyonel bütünlüğünün
ışık ve elektron mikroskop düzeyde incelenmesi
Bu çalışmada, fertil ve infertil hastalardan elde edilen semen örneklerine
HOST ve Anti HOST uygulanarak sperm membran bütünlüğünde meydana gelen
değişikliklerin ışık ve elektron mikroskopik düzeyde incelenmesi amaçlanmıştır.
İnfertilite, korunmasız düzenli cinsel ilişkiye rağmen en az bir yıl süre ile
çocuk sahibi olunamaması olarak tanımlanmaktadır. Günümüzde her on çiftten biri
infertilite problemi ile karşılaşmaktadır. Erkek infertilitesinin yaygın nedenleri;
düşük spermiyum sayısı, spermiyum hareket bozukluğu, morfolojik bozukluklar,
spermiyum üretiminde azalma ya da hiç olmaması ve erkek genital boşaltım
yollarının tıkanıklığı olarak sayılabilir. Günümüzde erkek infertilitesinin
değerlendirilmesinde birçok yeni yöntemler geliştirilmiştir. ICSI’ da daha iyi
spermiyum seçmek amacıyla sperm fonksiyon testlerinden, in vivo fertilite düzeyi ile
daha yakın bir korelasyona sahip olan "hipoozmotik şişme testi" (HOST) yaygın
olarak kullanılmaktadır.
Bu çalışmada, 10 fertil ve 29 infertil erkekten alınan semen örneklerine,
standart semen analizi uygulandı. İnfertil grup kendi içerisinde konsantrasyon,
motilite ve morfolojik bütünlüğe göre üç alt gruba ayrıldı. İki adet hazırlanan, 1ml
HOST solüsyonu içerisine, 100 µL semen örneği eklendi. İnkübatörde 37 °C’de , 30
dk süre ile bekletildi. Birinci örnek HOST grubu olarak değerlendirildi. İkinci örnek
ise HOST sonrası santrijüj edilerek izotonik ortama alındı. İzotonik ortamda 37
°C’de ve 30 dk süre ile inkübe edilip, Anti-HOST grubu olarak değerlendirildi. Her
iki gruba ait spermiyum örnekleri Transmisyon Elektron Mikroskobu (TEM) ile
incelendi. İstatistiksel analiz için ise fertil ve infertil grubuna ait bulgular, Student’s t
testi ve ANOVA kullanılarak değerlendirildi.
Sonuç olarak, HOST uygulamasının sperm ultrastrüktüründe dejeneratif
sayılabilecek değişikliklere neden olmadığı bilakis Anti-HOST uygulamasının ise
sadece astenospermik vakalarda dejeneratif değişikliklere neden olduğunu gözledik.
Anahtar Sözcükler: İnfertilite, Sperm membran fonksiyonel bütünlüğü,
HOST, Anti-HOST, Semen analizi.
ABSTRACT
A Light and Electron Microscopic Investigation on Functional Sperm Membrane
Integrity After Consequence of Anti-HOST Technic.
In this study, it was aimed to investigate the changes on the sperm membrane
integrity by light and electron microscop via practicing HOST and Anti-HOST
Technic on the semen samples which obtained from the fertil and infertil patients.
The descriptive of the infertility is couldn’t be able to become pregnant after
at least 1 year of regularly unprotected sex. At the present time, each one person of
ten experiences the infertility problem. The general causes of the male infertiliy
consider as; low sperm count, failure of the sperm motility, morphological defects,either reduction of the sperm production or none and the obstruction of the male
genital excretion ducts. Plenty of the new techniques have been improved in the
assessment of the male infertility nowadays. In Intracytoplasmic Sperm Injection
(ICSI) the aim of to select the better sperm in all of the functional sperm tests, the
"Hypoosmotic Swelling Test" (HOST) is used widely in close correlations with in
vivo fertility level.
In this study, standart semen analysis was performed on the semen samples
which were obtained from 10 fertil and 29 infertil men. The infertil group were
divided into three subgroups due to their concentration, motility and morphological integrity.
100 µL semen sample was added into 1ml HOST solution of which was two
number prepared. These were waited in incubator for about 30 minutes in 37
C. The first sample was evaluated as HOST group. The second sample was centrifuged and
taked into isotonic medium after HOST technic. It was evaluated as Anti-HOST
group when incubated in the isotonic medium in 37 °C for about 30 minutes. The
sperm samples of each group were examined under Transmission
Electronmicroscope (TEM). The findings of fertil and infertil groups were estimated
by using Student’s t test and ANOVA for the statistical analysis.
In conclusion we observed that the HOST technic didn’t cause any
degenerative changes on the sperm ultrastructure contrariwise Anti-HOST technic
caused degenerative changes only in the astenospermic cases.
Keywords: İnfertility, Functional Sperm Membrane İntegrity, HOST, AntiHOST,
Semen Analysis.
oDicle Üniversites