Estudio de la capacidad adyuvante del CpG-ODN formulado en una nanoestructura en fase coagel para la inducción de inmunidad humoral y celular mediada por linfocitos T CD8
Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2017Durante las últimas décadas se han comenzado a desarrollar las denominadas “vacunas de la nueva generación”. Su diseño difiere de las vacunas tradicionales y está basado en el uso de antígenos altamente purificados o recombinantes débilmente inmunogénicos combinados con poderosas estrategias adyuvantes capaces de compensar esta pérdida de inmunogenicidad. Adicionalmente el mayor problema de los adyuvantes licenciados para uso humano recae en su incapacidad de generar una respuesta del tipo celular Th1 y T CD8+ citotóxica adecuada para proteger contra patógenos intracelulares que perdure en el tiempo. El oligodeoxinucleótido con motivos citocina fosfato guanina no metilados (CpG-ODN), ligando sintético agonista del receptor de la respuesta inmune innata tipo toll 9 (TLR9), ha sido ampliamente considerado por sus efectos inmunoestimulantes como un candidato ideal como adyuvante. El CpG-ODN tiene la capacidad de generar una respuesta humoral y adicionalmente polarizar la respuesta inmune celular hacia un perfil Th1, induciendo también, bajo ciertas modalidades, células T CD8+ citotóxicas. Sin embargo, padece de una biodisponibilidad reducida, lo cual afecta su desempeño. Con el objetivo de optimizar su actividad adyuvante, proponemos una nueva estrategia de formulación para el CpG-ODN basado en un sistema nanoestructurado derivado de palmitato de ascorbilo (Coa-ASC16). En este trabajo, demostramos el potencial de una formulación constituida por ovoalbúmina (OVA), CpG-ODN y el Coa-ASC16 (OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16) para generar una respuesta humoral superior en magnitud y calidad que la solución OVA/CpG-ODN. La magnitud de dicha respuesta humoral resultó ser independiente de la vía de señalización mediada por IL-6. Además, la inmunización con OVA/CpG-ODN fue capaz de inducir una robusta respuesta de células T CD8+ citotóxicas efectoras, dependiente de interferones tipo I e independiente de IL-6 y de la asistencia mediada por células T CD4+. Consistentemente con esos resultados, la estrategia adyuvante demostró promover la internalización simultánea de OVA y CpG-ODN por células dendríticas. En adición, también fue capaz de inducir una buena respuesta de células T CD8+ de memoria. Ambas respuestas celulares T CD8+, efectora y de memoria, probaron su eficiencia protegiendo contra un modelo de infección intracelular con Listeria monocytogenes. Por otra parte, esta plataforma permite la reducción del número de inmunizaciones y la dosis antigénica sin afectar significativamente la inmunidad humoral o celular generada. Estos resultados demuestran el potencial de esta innovadora estrategia adyuvante para el desarrollo de futuras vacunas.Chiodetti, Ana Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Maletto, Belkys Angelica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Maccioni, Mariana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Irazoqui, Fernando José. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Allemandi, Daniel Alberto. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Ciencias Farmacéuticas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentina.Rumbo, Martín. Universidad Nacional de La Plata. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina
