Determination of the effects of oleuropein on various cellular pathways in the sh-sy5y neuroblastoma cell line

Abstract

Nöroblastom beyin dokusu içerisinde hızlı bir Ģekilde yayılabilen ve çocukluk çağının en sık rastlanılan tümör çeĢitlerinden birisidir. Kanser hastalığı her geçen gün geliĢen teĢhis ve tedavi yöntemlerine rağmen hala ölüm nedeni olarak dünyada ilk sıralardadır. Günümüzde kanser tedavisinde cerrahi müdahale, kemoterapi, immünoterapi, gen terapisi, radyoterapi ve bunlara destek amaçlı çeĢitli alternatif tedaviler kullanılmaktadır. Son yıllarda çeĢitli kanser türlerinin tedavisinde kullanılabilecek doğal ve biyolojik etkili bileĢiklerin keĢfedilmesi en popüler araĢtırma konuları arasında yer almaktadır. Bu bileĢiklerden biri olan polifenoller grubuna ait, zeytin yaprağının etken maddesi oleuropeinin antioksidan, anti-mikrobiyal, anti-inflamatuar, anti-hipertansif, anti-kanserojen etkileri olduğu bilinmektedir. Bu çalıĢmanın amacı oleuropeinin SH-SY5Y nöroblastom hücre hattında hücre proliferasyonuna, invazyonuna ve koloni oluĢumu, hücre döngüsü ve apoptoz mekanizmaları üzerine etkisi ve terapötik etkinliğinin in vitro olarak belirlenmesidir. Oleuropeinin hücre canlılığı üzerine etkisi XTT yöntemi ile belirlenmiĢ ve IC50 dozu 48. saate 350 μM olarak bulunmuĢtur. Gerçek Zamanlı PZR sonuçlarına göre oleuropein hücre döngüsü ile iliĢkili genlerden SiklinD1, SiklinD2, SiklinD3, CDK4 ve CDK6 down regülasyonuna ve p53 ve p21'in up regülasyonuna sebep olarak hücre döngüsünü durdurduğu ve ayrıca Bcl-2'nin inhibisyonu, Bax, kaspaz-9 ve kaspaz 3'ün aktive edilmesiyle apoptotik yolağı indüklediği tespit edilmiĢtir. Western blot yöntemi ile Bcl-2 ve SiklinD1'in protein düzeyinde değiĢimleri gösterilmiĢtir. TUNEL testi ile doz grubu hücrelerde apoptotik hücre oranının %36.4±3.27'ye çıktığı bulunmuĢtur. Ayrıca Matrigel-Ġnvazyon testi ile oleuropeinin SH-SY5Y hücrelerinde invazyonu azalttığı belirlenmiĢtir. Koloni formasyon testi ile de koloni oluĢumunu %53.6±4.71 oranında baskıladığı tespit edilmiĢtir. ÇalıĢma sonuçları ile oleuropeinin, nöroblastom tedavisinde potansiyel bir anti-kanserojen ajan olabileceği gösterilmiĢ ve daha detaylı çalıĢmalar için ilk veriler ortaya koyulmuĢtur

    Similar works