ｶｲｺ(Bombyx mori)の幼虫体液中にはｶｲｺ由来培養細胞の増殖を抑制する活性があることを見出した｡また､ｶｲｺ体液によって増殖を阻害された細胞中には脂肪滴の形成が認められた｡本研究ではこれらの細胞増殖抑制および脂肪蓄積促進活性の実体となるｶｲｺ体液因子の解明を行った｡ｶｲｺ体液を出発材料として､細胞増殖抑制活性を指標にﾀﾝﾊﾟｸ質の精製を行った｡6段階の精製過程の後､SDS-ﾎﾟﾘｱｸﾘﾙｱﾐﾄﾞｹﾞﾙ電気泳動において単一ﾊﾞﾝﾄﾞを示す画分を得た｡ｱﾐﾉ酸配列解析の結果､このﾀﾝﾊﾟｸ質はｶｲｺ Niemann-Pick disease type C2(BmNPC2)ﾀﾝﾊﾟｸ質であると同定された｡ﾘｺﾝﾋﾞﾅﾝﾄ BmNPC2 ﾀﾝﾊﾟｸ質は細胞増殖抑制活性を示したことから BmNPC2 ﾀﾝﾊﾟｸ質がｶｲｺ体液中の細胞増殖抑制活性の実体であることが示唆された｡さらに､ﾘｺﾝﾋﾞﾅﾝﾄ BmNPC2 ﾀﾝﾊﾟｸ質をｶｲｺ培養細胞に添加することによって､細胞内ﾄﾘｸﾞﾘｾﾘﾄﾞ量の増大が認められた｡以上の結果は､BmNPC2 ﾀﾝﾊﾟｸ質がｶｲｺにおいて細胞増殖と脂質代謝を制御する体液性因子であることを示唆している｡Silkworm hemolymph induced both the cessation of growth and an increase in neutral lipids storage in the silkworm-derived cell line, BmN4. In this study, we identified a responsible blood factor showing growth-inhibitory and lipid-accumulating activity. We subjected the silkworm hemolymph to successive column chromatographies and measured the growth-inhibitory activity of each fraction. The final purified fraction showed the highest specific activity and a single band of 15kDa protein on SDS-PAGE. The amino acid sequence revealed that the 15kDa protein was Bombyx mori Niemann-Pick disease type C2 (BmNPC2) protein. A recombinant BmNPC2 protein exhibited growth-inhibitory activity comparable with the final purified fraction, indicating that this protein is responsible for the activitiy of silkworm hemolymph. Moreover, the recombinant BmNPC2 protein induced an increase in triglyceride storage in BmN4 cells. These results indicate that BmNPC2 protein regulates both cell growth and lipid metabolism in silkworm
