Evaluaci?n de la actividad antioxidante y antimicobiana del extracto proteico crudo y su hidrolizado obtenidos a partir de hoja de mani forrajero, Arachis pintoi

Abstract

67 P?ginasRecurso Electr?nicoEn este trabajo se evalu? la actividad antioxidante y antimicrobiana de los hidrolizados del extracto crudo proteico de Arachis pintoi. Se encontr? que estos presentan un potencial antioxidante y antimicrobiano. Al obtener el extracto crudo proteico de A. pintoi se encontr? una eficiencia de 47,5 mg/g de hoja. Los resultados indican que a una temperatura de 37 ?C durante una hora se obtiene una hidrolisis total del extracto. Estos hidrolizados presentan una mejor actividad antioxidante que el Trolox y no se encontr? para este potencial diferencias significativas entre los tiempos de hidrolizados. Tambi?n se identific? una actividad fungicida del extracto crudo proteico frente a Cladosporium ssp. a una concentraci?n de 2000 ?g/ml, para un 11 % del efecto inhibitorio en el crecimiento del control negativo. El extracto crudo proteico present? potencial bactericida frente a bacterias gram negativas, Escherichia coli. Para los hidrolizados de este extracto se observ? actividad bacteriost?tica para Staphylococcus aureus, bacteria gram positiva. No se evidencio diferencia significativa entre los tiempos de hidrolizados. Este trabajo permiti? conocer el potencial antioxidante y antimicrobiano que posee el extracto crudo proteico e hidrolizados de hojas de Arachis pintoi. Estos resultados sugieren que A. pintoi, presenta un importante potencial antioxidante y antimicrobiano.ABSTRACT. In this work, the antioxidant and antimicrobial activity of pure crude extract protean hydrolyzate by Arachis pintoi was evaluated. It was found that these present an antioxidant and antimicrobial potential. By obtaining the crude protein extract A. pintoi efficiency 47.5 mg/g of leaves was found. The results show that at a temperature of 37 ?C for one hour the total hidrolisys of the pure extract protean was reached. These hydrolysates show more antioxidant activity than Trolox and wasn't found significant differences for this potential between times. Extract pure protean fungicidal activity against Cladosporium sp. was also identified at a concentration of 2000 mg/ml, for a 11% growth inhibitory effect versus negative control. The protean crude extract exhibited bactericidal potential against, Escherichia coli a gram-negative bacteria. This hydrolysates extracts showed bacteriostatic activity to Staphylococcus aureus, gram positive bacteria. No evidences significant differences between the times of hydrolysates. This work makes evident the antioxidant and antimicrobial potential of the crude extract and hydrolyzed protean in leaves Arachis pintoi. These results suggest that A. pintoi, presents an important antioxidant and antimicrobial potential.INTRODUCCI?N 15 1. OBJETIVOS 18 1.1. OBJETIVO GENERAL 18 1.2. OBJETIVO ESPEC?FICO 18 2. MARCO REFERENCIAL 19 2.1. ANTECEDENTES 19 2.2. MARCO TE?RICO 20 2.2.1. Mecanismo de defensa de las plantas 20 2.2.2. P?ptidos bioactivos 22 2.2.3. Hidrolisis enzim?tica 22 2.2.4. P?ptidos antimicrobianos (AMPs) 24 2.2.5. P?ptidos con actividad antioxidante 24 2.2.6. Man? forrajero (Arachis pintoi) 25 3. METODOLOG?A 27 3.1. SIEMBRA DE PL?NTULAS Arachis pintoi 27 3.1.1 Material vegetal 27 3.1.2 Plantas infectadas 27 3.2. AISLAMIENTO E IDENTIFICACI?N DEL HONGO PRESENTE EN LAS HOJAS DE Arachis pintoi. 28 3.3. OBTENCI?N DE EXTRACTO CRUDO PROTEICO A PARTIR DE HOJAS DE Arachis pintoi 3.3.1. Cuantificaci?n de proteina 31 3.3.2. Electroforesis sds-page del extracto crudo proteico. 31 3.3.3. Di?lisis del extracto crudo proteico 31 3.4. HIDROLISIS ENZIM?TICA DEL EXTRACTO CRUDO PROTEICO DE Arachis pintoi 31 3.4.1. Cin?tica de hidrolisis del extracto crudo proteico de Arachis pintoi 31 3.4.2. Electroforesis sds-page de la cin?tica de hidrolisis del extracto crudo 32 3.5. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE in vitro DE LOS HIDROLIZADOS DE Arachis pintoi 32 3.6. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA in vitro DEL EXTRACTO CRUDO PROTEICO Y SU HIDROLIZADO. 33 3.6.1 Actividad fungicida del extracto crudo proteico 33 3.6.2. Actividad bactericida del extracto crudo proteico y su hidrolizado de Arachis pintoi. 34 3.7. AN?LISIS ESTAD?STICO 34 4. RESULTADOS Y DISCUSI?N 35 4.1. OBTENCI?N DEL EXTRACTO CRUDO PROTEICO A PARTIR DE HOJAS DE Arachis pintoi 35 4.2. ELECTROFORESIS SDS-PAGE DEL EXTRACTO PROTEICO DE Arachis pintoi 35 4.3. CIN?TICA DE HIDROLIZADOS DEL EXTRACTO PROTEICO DE Arachis pintoi 36 4.3.1. Electroforesis en gel sds-page de los hidrolizados de Arachis pintoi 36 4.4. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE in vitro DE LOS HIDROLIZADOS DE Arachis pintoi 39 4.5. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA in vitro DEL EXTRACTO CRUDO PROTEICO Y SU HIDROLIZADO DE Arachis pintoi. 41 4.5.1 Actividad fungicida del extracto crudo proteico de Arachis pintoi. 41 4.5.2. Actividad bactericida del extracto crudo proteico y su hidrolizado de Arachis pintoi. 42 4.5.2.1. Actividad bactericida del extracto crudo. 42 4.5.2.2. Actividad bactericida del hidrolizado. 42 5. CONCLUSIONES 48 RECOMENDACIONES 49 REFERENCIA 5