Evaluaci?n de la actividad bactericida de fracciones enriquecidas en flavonoides a partir de: psidium guajava l. (guayaba), calendula officinalis l. (cal?ndula), l. (romero) y matricaria chamomilla l. (manzanilla) sobre: erwinia carotovora (dye).

Abstract

88 P?ginasLas plantas alimenticias son infectadas por bacterias originando graves problemas fitosanitarios que generan p?rdidas econ?micas a los agricultores. Estos microorganismos desarrollan resistencia hacia los antibi?ticos debido a su uso inadecuado. Una alternativa en el control de bacterias fitopat?genas es el empleo de extractos bot?nicos, con lo cual se busca reducir el impacto econ?mico y ambiental en el sector agr?cola. Empleando diversos ?rganos de Psidium guajava L. (guayaba), Calendula officinalis L. (cal?ndula), Rosmarinus officinalis L. (romero) y Matricaria chamomilla L. (manzanilla) se elaboraron extractos etan?licos, de los cuales se obtuvieron cuatro (4) fracciones mediante una serie eluotr?pica de solventes (?ter de petr?leo, acetato de etilo, n-butanol y agua). Los extractos y sus fracciones fueron caracterizados fitoqu?micamente con cromatograf?as en capa delgada para detectar flavonoides (fracci?n et?rea descartada) y su actividad in vitro se evalu? frente a la cepa E. carotovora mediante el m?todo de inhibici?n zonal (m?todo de difusi?n en agar), utilizando concentraciones de 5.000, 7.000 y 10.000 (?g/mL), con mediciones de halos de inhibici?n a las 24 y 48 horas. Los resultados obtenidos mediante estas pruebas determinaron un control positivo de las plantas P. guajava con su extracto etan?lico y sus 3 fracciones y C. officinalis en su fracci?n acetato de etilo. Los resultados obtenidos a partir del estudio de actividad biol?gica in vitro sugieren que las fracciones n-butanol y acuosa en la especia P. guajava y la fracci?n acetato de etilo en la especia C. officinalis son promisorias para futuros ensayos de actividad bactericida y otros estudios qu?micos.ABSTRACT Food plants are infected by causing serious phytosanitary problems caused economic losses to farmers bacteria. These microorganisms develop resistance to antibiotics due to improper use. An alternative in the control of plant pathogenic bacteria is the use of botanical extracts, which seeks to reduce the economic and environmental impact on the agricultural sector. Using various organs of Psidium guajava L. ( guava), Calendula officinalis L. (marigold), Rosmarinus officinalis L. (rosemary ) and Matricaria chamomilla L. (chamomile ) ethanol extracts were prepared , of which four (4) fractions were obtained by eluotropic series of solvents (petroleum ether, ethyl acetate, n-butanol and water). The extracts and fractions were characterized phytochemically with thin layer chromatography for any flavonoids (ethereal fraction discarded) and its in vitro activity was evaluated against strain E. carotovora by the method of zonal inhibition (diffusion method on agar) using concentrations of 5.000, 7.000 and 10.000 (?g/mL), with measurements of zones of inhibition at 24 and 48 hours. The results obtained by these tests determined a positive control of plants with P. guajava ethanol extract and its fractions and its 3 in the C. officinalis ethyl acetate fraction. The results obtained from the study of biological activity in vitro suggest that n - butanol fraction and water at P. guajava spice and ethyl acetate fraction in the spice C. officinalis are promising for future trials and other studies bactericidal activity chemicals.INTRODUCCI?N 16 1. MARCO TE?RICO 18 1.1 IMPORTANCIA DE LAS ENFERMEDADES FITOPAT?GENAS 18 1.2 FITOENFERMEDADES POR BACTERIAS 19 1.3 CONTROL DE BACTERIAS FITOPAT?GENAS 22 1.3.1 Uso de Antibi?ticos 22 1.4 EXTRACTOS VEGETALES Y SU PAPEL EN LA AGRICULTURA 23 1.4.1 Uso Mundial, Regional y Local. 23 1.4.2 Uso en el campo. 23 1.5 DESCRIPCI?N DE E. carotovora. 27 1.5.1 Generalidades. 27 1.5.2 Situaci?n actual 28 1.5.3 Identificaci?n taxon?mica seg?n la N.C.B.I. 28 1.5.4 Tratamiento 29 1.5.5 Incidencia. 29 1.6 DESCRIPCI?N BOT?NICA DE LAS ESPECIES VEGETALES 30 1.6.1 Descripci?n bot?nica P. guajava 30 1.6.1.1 Flavonoides reportados y actividad biol?gica 31 1.6.2 Descripci?n bot?nica R. officinalis 32 5 1.6.2.1 Flavonoides reportados y actividad biol?gica 32 1.6.3 Descripci?n bot?nica C. officinalis 33 1.6.3.1 Flavonoides reportados y actividad biol?gica 34 1.6.4 Descripci?n bot?nica M. Chamomilla 35 1.6.4.1 Flavonoides reportados y actividad biol?gica 36 1.7 FLAVONOIDES 36 2. PARTE EXPERIMENTAL 39 2.1 EQUIPOS REACTIVOS Y MATERIALES 39 2.1.1 Equipos 39 2.1.2 Reactivos 39 2.1.3 Materiales 40 2.2 MATERIAL VEGETAL 41 2.2.1 Material microbiol?gico 41 2.3 METODOLOGIA - ENSAYOS FITOQUIMICOS 41 2.3.1 Elaboraci?n de los extractos etan?licos de P. guajava, C. officinalis, R. officinalis y M. chamomilla 41 2.3.2 Fraccionamiento del extracto etan?lico 43 2.3.3 Detecci?n de flavonoides en extractos etan?licos y fracciones primarias de P. guajava, C. officinalis, R. officinalis y M. chamomilla 44 2.4 METODOLOG?A BIOL?GICA 45 2.4.1 Bioensayo de la actividad bactericida de los extractos y fracciones sobre E. carotovora 45 6 2.4.2 Determinaci?n de la concentraci?n inhibitoria para el control positivo (Cefalexina) 46 2.4.3 Disoluci?n de los extractos etan?licos y fracciones primarias 47 2.5 AN?LISIS ESTAD?STICO 48 2.5.1 M?todo estad?stico 48 3. RESULTADOS Y DISCUSI?N 49 3.1 EXTRACCI?N Y FRACCIONAMIENTO DE LOS EXTRACTOS ETAN?LICOS 49 3.2 ESTUDIO FITOQU?MICO POR CCD DE LOS EXTRACTOS Y FRACCIONES 52 3.2.1 An?lisis de los extractos 52 3.2.2 An?lisis de las fracciones 54 3.3 PRUEBAS DE ACTIVIDAD BIOL?GICA IN VITRO DE LOS EXTRACTOS ETAN?LICOS Y FRACCIONES OBTENIDAS DE P. GUAJAVA, R. OFFICINALIS, C. OFFICINALIS Y M.CHAMOMILLA SOBRE E. CAROTOVORA 59 3.4 RESULTADOS AN?LISIS ESTAD?STICO 66 4. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 78 4.1 CONCLUSIONES 78 4.2 RECOMENDACIONES 79 5. REFERENCIAS 8