research

Создание трансгенных растений салата, содержащих ген сшитого белка антигенов ESAT6:Ag85B из Mycobacterium tuberculosis

Abstract

Трансгенні рослини є багатообіцяючим і безпечним інструментом для створення їстівних вакцин. Імунізація, що відбувається внаслідок вживання в їжу рослин, у яких проходить експресія туберкульозних антигенів, є перспективним підходом у боротьбі з туберкульозом. У цій роботі ми повідомляємо про створення трансгенних рослин салату (Lactuca sativa), що містять ген зшитого білка антигенів Mycobacterium tuberculosis ESAT6:Ag85B. Трансгенні рослини були отримані методом трансформації за допомогою Agrobacterium tumefaciens. У роботі були використані вектори, що містять ген esxA, зшитий з геном fbpB. Також вектори містили селективні гени: ген неоміцинфосфотрансферази (nptII) або фосфінотрицин ацетилтрансферази (bar). На селективному середовищі були відібрані трансгенні рослини салату. Наявність селективного та цільового генів у геномі цих рослин була підтверджена за допомогою ПЛР. Трансгенні рослини салату були висаджені в ґрунт в умовах теплиці для проведення наступних досліджень.Transgenic plants are promising and potentially safe tools to produce edible vaccines. Passive immunization by oral delivery of Mycobacterium tuberculosis antigens expressed in transgenic plants seems to be the perspective strategy to combat tuberculosis. In this paper, we discuss the generation of lettuce (Lactuca sativa) transgenic plants carrying the fused gene of Mycobacterium tuberculosis antigens ESAT6:Ag85B. By employing Agrobacterium mediated transformation method, transgenic plants are obtained. Vectors containing gene esxA fused with fbpB gene are used. Plasmid vectors also contain selective genes of neomycin phosphotransferase II (nptII) or phosphinothricin acetyl transferase (bar). Stable transgenic plants are selected. By using PCR analysis, we confirm the presence of target and selective genes in plants genome. Rooted plats are transferred to soil in the greenhouse for further experiments.Трансгенные растения являются многообещающим и безопасным инструментом для создания съедобных вакцин. Иммунизация, что происходит в результате употребления в пищу растений, в которых проходит экспрессия туберкулезных антигенов, является перспективным подходом в борьбе с туберкулезом. В этой работе мы сообщаем о создании трансгенных растений салата (Lactuca sativa), содержащих ген сшитого белка антигенов Mycobacterium tuberculosis ESAT6:Ag85B. Трансгенные растения были получены методом трансформации с помощью Agrobacterium tumefaciens. В работе были использованы векторы, содержащие ген esxA, сшитый с геном fbpB. Также векторы содержали селективные гены: ген неомицинфосфотрансферазы (nptII) или фосфинотрицин ацетилтрансферазы (bar). На селективной среде были отобраны трансгенные растения салата. Наличие селективного и целевого генов в геноме этих растений было подтверждено с помощью ПЦР. Трансгенные растения салата были высажены в грунт в условиях теплицы для проведения последующих исследований

    Similar works