FREIRE, F. L.

LEITE, M. I. S.

VALICENTE, F. H.

VIEIRA, C. M.

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XXI Congresso Brasueiro de LntomoiogiaVALICENTE,F.H.2006/'XXI Congresso Brasileiro de EntomologiaEspecialidade Controle BiológicoCARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE 27 CEPAS EFICIENTES DE BACILLUS THURIGIENSIS CONTRA ALAGACARTUCHO, SPODOPTERA FRUGIPERDA.Maria Isabelia Santos Leite 1, Fernanda Lyon Freire 1, Corina Macedo Vieira 1, Fernando Hercos Valicente 11 1Núcleo de Biologia Aplicada, EMBRAPA ,milho e sorgo (EMBRAPAlCNPMS)ResumoA bactéria Bacillus thuringiensis (Bt) é um patógeno com grande potencial inseticida contra a lagarta do c:uma das principais pragas da cultura do milho. Este trabalho visa caracterizar molecularmente 27 cepas diBanco de Microorganismos da EMBRAPA Milho e Sorgo, para detectar os genes cry1 (Ab, B, C, D, E, F). A·foram isoladas no Laboratório de Controle Biológico provenientes de lagartas mortas e de amostras dediversas regiões do Brasil, e armazenadas a -80DC. A caracterização foi feita através da Reação da PolimelCadeia (PCR) utilizando-se primers específicos e através da análise de proteínas. As cepas de Bt foram CIpor 15 horas em placas de petri contendo ágar nutriente. Das colônias crescidas retirou-se a amostra de DIjuntamente com o mix para PCR formaram a reação que foi amplificada. As temperaturas de hibridação espvariaram de 50DC a 5JDC dependendo do primer usado. Para correr o gel, 25 ? I de cada mistura da PCR foi (em gel de agarose a 3% que correu a 110V por 120 min e foram coradas com brometo de etldio. Os rermostraram que a maioria das cepas apresentou o gen cry1 E. Parte das cepas apresentaram o gen cry1 Aapenas uma apresentou o gen cry1 F,C e D. Os géis de proteína revelaram que a maioria das cepas apresiuma pró toxina de 116KDa e após o tratamento com tripsina apresentaram um toxina ativa de 66KDa.Palavras-chave: controle biológico, análise proteica, patologia de insetos, milho, PCRfilellE\resumos\resumos\R1090-1htmJ 23/08/06

Caracterização molecular de 27 cepas eficientes de Bacillus thurigiensis contra a lagarta do cartucho, Spodoptera frugiperda.

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