A propagação da mandioca é feita vegetativamente por meio de estacas, o que ocasiona baixa produção devido ao envelhecimento fisiológico provocado pela constante multiplicação e à infestação por doenças que são transmitidas por sucessivas gerações (SILVA et al., 2002). A produção de material de plantio básico sadio e em números elevados é uma das grandes limitações para a expansão e um cultivo produtivo de mandioca (SOUZA et al., 2008).Propagação. Resumo n. 241

SOUZA, A. da S.

SOUZA, F. V. D.

VIDAL, Á. M.

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Efeito da concentração do meio ms na micropropagação da mandioca (Manihot esculenta Crantz).

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EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DO MEIO MS NA MICROPROPAGAÇÃO DAMANDIOCA (Manihot esculenta Crantz)Ádila Melo Vidal1; Antônio da Silva Souza2 e Fernanda Vidigal Duarte Souza31Doutoranda em Ciências Agrárias - Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas,BA, CEP: 44380-000. amelovidal@yahoo.com.br.2Pesquisador da Embrapa Mandioca e Fruticultura, Rua Embrapa, s/nº, Caixa Postal 007, Cruz dasAlmas, BA. assouza@cnpmf.embrapa.br.3Pesquisadora da Embrapa Mandioca e Fruticultura, Rua Embrapa, s/nº, Caixa Postal 007, Cruz dasAlmas, BA. fernanda@cnpmf.embrapa.br.IntroduçãoA propagação da mandioca é feita vegetativamente por meio de estacas, o que ocasiona baixaprodução devido ao envelhecimento fisiológico provocado pela constante multiplicação e à infestaçãopor doenças que são transmitidas por sucessivas gerações (SILVA et al., 2002). A produção dematerial de plantio básico sadio e em números elevados é uma das grandes limitações para a expansãoe um cultivo produtivo de mandioca (SOUZA et al., 2008).A micropropagação pode ser uma alternativa interessante para contornar esse problema, umavez que possibilita a multiplicação rápida de plantas em períodos de tempo e espaço físico reduzidos,e com qualidade fitossanitária (GRATTAPAGLIA & MACHADO, 1998). Embora esta técnica sejautilizada para a multiplicação da mandioca, estudos que viabilizem e incrementem essas taxastornam-se necessários. Dentre os fatores que podem influenciar a micropropagação in vitro, podemoscitar os fatores externos como temperatura, umidade relativa, fotoperíodo, intensidade luminosa efatores intrínsecos ao crescimento e desenvolvimento vegetativo dependentes das condiçõesnutricionais do meio de cultivo e a aplicação de fitorreguladores.Nas & Read (2004) relatam que a composição química do meio de cultura tem um papelimportante no sucesso da propagação de plantas in vitro. Quando a composição do meio de culturanão está adequada podem ocorrer desordens fisiológicas e até a morte do tecido vegetal.Ao utilizar 75% dos sais do MS na multiplicação de uma variedade de gérbera, SOUSA et al.(2006) obtiveram plântulas com excelente qualidade, enquanto aquelas produzidas na concentração de50% apresentaram alto potencial para aclimatização. Dzazio et al. (2002), trabalhando com oporta-enxerto de videira '420 - A', testaram diferentes meios de cultura para o alongamento emultiplicação in vitro e observaram que o meio MS com a concentração normal de sais apresentouresultados inferiores para comprimento de brotação principal, número de folhas do explante eporcentagem de gemas axilares brotados; o MS na metade da concentração foi o meio que propiciouos melhores resultados.Diante deste contexto, este trabalho teve por objetivo estudar o efeito da concentração dossais minerais e vitaminas do MS na micropropagação de genótipos de mandioca.Material e MétodosO trabalho foi conduzido no Laboratório de Cultura de Tecidos da Embrapa Mandioca eFruticultura, em Cruz das Almas, BA. Como material vegetal, foram utilizadas microestacas contendopelo menos uma gema apical ou lateral, extraídas de plantas estabelecidas in vitro de três acessos demandioca oriundos do Banco Ativo de Germoplasma de Mandioca da Embrapa Mandioca eFruticultura (Veada, Vassourinha I e Curimenzinha). Os explantes foram inoculados em tubos deensaio (25 x 150 mm) contendo 10 mL do meio de cultura MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) nasseguintes concentrações: 1/1 (concentração normal), 1/2 (metade da concentração normal) e 1/3 (terçaparte da concentração normal). Como fonte alternativa dos reguladores vegetais, necessários paradeterminar o crescimento e o padrão de desenvolvimento dos sistemas de cultura in vitro de tecidos,foi utilizado o fitoestimulante o Stimulate®, cujos componentes ácido índolbutírico, cinetina e ácidogiberélico, foram adicionados aos meios a 0,005 mg L-1, 0,001 mg L-1 e 0,005 mg L-1,respectivamente. Os meios de cultura foram ainda suplementados com 20 g L-1 de sacarose,solidificados com 7 g L-1 de ágar e pH ajustado em 5,7-5,8. O delineamento experimental foiinteiramente ao acaso, em esquema fatorial 3 (concentrações do meio de cultura MS) x 3 (genótipos),com 25 repetições por tratamento, onde cada repetição é constituída de uma planta por tubo.As culturas foram mantidas em sala de crescimento sob temperatura de 27±1°C, intensidadeluminosa de 30 µmol m-2 s-1 e fotoperíodo de 16 horas. Após 60 dias de cultivo foram consideradasas seguintes variáveis: número de folhas vivas (NFV), número de folhas mortas (NFM), número dehastes (NH), comprimento de hastes (CH; em cm) e número de microestacas (NM; comaproximadamente 1,2 cm).Resultados e DiscussãoDe acordo com os resultados obtidos, houve interação significativa entre os fatores estudados(concentração do meio MS x genótipo), para todas as variáveis analisadas, evidenciando que o efeitoda concentração dos sais minerais e vitaminas do MS foi dependente do genótipo.Dentre os genótipos avaliados, verificou-se que as maiores médias para NFV foram obtidas nogenótipo Veada, quando os sais e vitaminas do MS estavam presentes no meio de cultura em suaconcentração total (M1), indicando que quanto mais alta essa concentração maior o número de folhas(Figura 1a). Esses resultados estão de acordo aos obtidos por Villa et al. (2005) e Ribeiro et al.(2007), que alcançaram respostas semelhante em estudos com amoreira-preta e manjericão roxo,rspectivamente. Para os demais genótipos não houve diferença significativa no NFV quando seutilizou um dos meios de cultura. Neste caso, fica claro o efeito do genótipo de mandioca nodesenvolvimento das plantas, tornando-se necessária a adequação especifica de condições de cultivopara cada genótipo. Neste sentido, Broomes & Lacon (1994) recomendam que sejam testadasmodificações nas concentrações de sacarose, nitrogênio e reguladores de crescimento do meio decultura, de forma a adequá-lo para o genótipo de mandioca.Quanto ao NFM, as maiores perdas foram registradas nas plantas de ‘Curimenzinha’cultivadas no M1. Já nas variedades Veada e Vassourinha I, independente do meio de cultura, nãohouve diferença significativa quanto à perdas de folhas (Figura 1b).Figura1. (a) - Número de folhas vivas, (b) - Número de folhas mortas em três genótipos de mandioca(Manihot esculenta Crantz) cultivados sob diferentes concentrações do meio MS. Médias seguidas damesma letra minúscula dentro de cada genótipo e maiúscula entre cada concentração do meio MS nãodiferem entre sí pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.Para a variável número de hastes, não houve diferença entre os meios M1, M2 e M3 nosgenótipos Veada e Vassourinha I. Em contrapartida, ‘Curimenzinha’ apresentou maior número dehastes quando cultivado em meio contendo a metade ou um terço das concentrações do MS,respectivamente, M2 e M3 (Figura 2a). A redução das concentrações do MS mostrou diferentesrespostas em relação aos três genótipos estudados. No que diz respeito ao comprimento de hastes, omeio de M1 proporcionou melhores resultados no genótipo Curimenzinha com uma média de 16,57cm. Dentre os genótipos, Veada apresentou menores valores de comprimento de hastes quandocultivados nos meios M2 e M3, com respectivamente, 7,59 cm e 6,28 cm. Para ‘Vassourinha I’, que(a) (b)aA abA bA aB aB aA aB aB aA aB aA aA aB aA aA aA bA bAapresentou um crescimento intermediário em relação às outras variedades, não houve diferença nosresultados, ao se utilizar o meio M1 e M2 (Figura 2b).Figura2. (a) - Número de hastes, (b) – Comprimento de hastes em três genótipos de mandioca(Manihot esculenta Crantz) cultivados sob diferentes concentrações do meio MS. Médias seguidas damesma letra maiúscula para o fator genótipo e minúscula para concentração do meio MS não diferementre sí pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.Em relação ao NM, observa-se que os três genótipos selecionados apresentaram o mesmocomportamento da variável comprimento de hastes, ou seja, em ‘Veada’ e ‘Curimenzinha’ a reduçãodos sais e vitaminas do MS proporcionou uma diminuição no número de microestacas, enquanto o MScompleto favoreceu ao maior número com 6,44 e 5,12, respectivamente. Já para ‘Vassourinha I’ nãohouve diferença significativa entre os meios utilizados (Figura 3).(a) (b)aA aA aB aA aA aAB aAbA ab bBaAB bB ab aA bA aA bB bAaA bA cB aB bA abAaB aA aABFigura 3. Número de microestacas em três genótipos de mandioca (Manihot esculenta Crantz)cultivados sob diferentes concentrações do MS. Médias seguidas da mesma letra maiúscula para ofator genótipo e minúscula para concentração do meio MS não diferem entre sí pelo teste de Tukey a5% de probabilidade.No geral o desenvolvimento in vitro das plantas apresentou comportamento bastante variado,demonstrando o efeito do genótipo. Diversos autores têm relatado esse efeito para muitas culturas,provando que o potencial de regeneração não depende somente da composição do meio de cultura edos diferentes reguladores de crescimento, mas também das diferenças no componente genético, quecontrola o potencial morfogenético dos genótipos (NOGUEIRA et al., 2001).ConclusõesOs genótipos de mandioca estudados apresentam diferentes respostas quando submetidos aosdiferentes meios de cultivo.Independentemente do genótipo, a redução do MS à metade proporciona o maior número de hastes.O meio de cultura MS completo proporciona maiores comprimento de hastes e número demicroestacas nos genótipos Curimenzinha e Veada, respectivamente.ReferênciasBROOMES, V. F.; LACON, R. Influence of medium components on hardening of cassava aftermicropropagation in liquid nutrient medium. In: INTERNATIONAL SCIENTIFIC MEETING ONCASSAVA BIOTECHNOLOGY NETWORK, 2., Bogor, 1994. Proceedings... Bogor: CassavaBiotechnology Network, 1994. p.210-219.DZAZIO, P. 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Circular Técnica, 88).VILLA, F.; ARAÚJO, A. J.; PIO, L. A. S.; PASQUAL, M. Multiplicação  in vitro da amoreira-preta‘Ébano’ em diferentes concentrações de meio MS e BAP. Ciência e Agrotecnologia, v. 29, p.582-589,2005.

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