FIGUEIREDO, J. E. F.

KARAM, D.

LIMA, G. V. C.

LOPES, S. C.

MOURÃO, S. A.

SILVA, C. H. C.

SILVA, J. A. A.

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EFEITO IN VITRO DE HERBICIDAS SOBRE BACTE´RIAS DARIZOSFERA DE SEMPRE - VIVA (SYNGONANTHUS ELEGANSVAR. ELEGANS)Jose´ E. F. Figueiredo1Je´ssica A. A. Silva2; Guilherme V. C. Lima³; Clara H. C. Silva³; Sheila A. Moura˜o4; Ste´fano, C. Lopes4; De´cioKaram51, 5 Embrapa Milho Sorgo, rodovia MG - 424, km 65, Caixa Postal 151 - Cep 35701 - 970 - Sete Lagoas MG - Brasil,jeff@cnpms.embrapa.br; karam@cnpms.embrapa.br; 2UNIFEMM/FAPED, jessicaalial@gmail.com; ³guilherme611@yahoo.com.br;³clarahelena10@yahoo.com.br; 4sheilamouraoufv@hotmail.com; 5stefano.pf@hotmail.comINTRODUC¸A˜OOs herbicidas constituem o grupo de mole´culasagroqu´ımicas mais comercializados em todo o mundo,em func¸a˜o de sua praticidade, variedade e eficieˆncia nocontrole dos organismos - alvo. Somente no Brasil, 476formulac¸o˜es esta˜o registradas junto ao MAPA, as quaiscompo˜em cerca de 100 ingredientes ativos (MENTEN etal., 009). Estudos acerca do potencial de alterac¸a˜o dasrelac¸o˜es ecolo´gicas dessas substaˆncias e suas interac¸o˜esambientais, entretanto, sa˜o incipientes (KARAM et al.,2009). Portanto, a avaliac¸a˜o da toxicidade de herbici-das sobre microrganismos indicadores e´ de fundamentalimportaˆncia. Ademais, ha´ uma demanda pela gerac¸a˜ode novos dados de sensibilidade com diferentes orga-nismos - teste, que contemplem o potencial to´xico ea seletividade dos compostos (POLEZA et al., 008).ALTEMBURG et al., 2010); WARDLE (1995), afir-mam que herbicidas em geral teˆm um efeito inibidornas populac¸o˜es da fauna de solo, que, no entanto e´ me-nos dra´stico do que ingredientes fungicidas e insetici-das. Uma vasta gama de microrganismos dados comobioindicadores se desenvolve junto a` rizosfera de plan-tas superiores (BORBA e AMORIM, 2007), tais comoa sempre - viva (Syngonanthus Elegans var. elegans).Dentre esses, as bacte´rias alcanc¸am destaque, devido a`sua abundaˆncia, diversidade e capacidade de subsistirem regio˜es sob as mais variadas condic¸o˜es ambientais.Os grupos Firmicutes e Proteobacte´rias apresentam re-levaˆncia por estarem envolvidos em processos diversoscomo biodegradac¸a˜o de contaminantes, biodisponibi-lizac¸a˜o de nutrientes, fixac¸a˜o biolo´gica e em va´rias bi-otecnologias (ZULU & VARISANGA, 2011). Isso per-mite sua obtenc¸a˜o para uso em estudos de diagno´sticoda qualidade e recuperac¸a˜o de a´reas sob impacto am-biental adverso.OBJETIVOSAvaliar o crescimento de microrganismos pertencentesa`s classes Firmicutes e Proteobacte´ria obtidos da rizos-fera de Syngonanthus Elegans var. elegans e cultivadossob doses dos herbicidas atrazine, glyphosate, glufosi-nate - ammonium, nicosulfuron e tembotrione.MATERIAL E ME´TODOSConduziu - se o experimento no Laborato´rio de Bi-oqu´ımica Molecular da Embrapa Milho e Sorgo, SeteLagoas - MG, entre os meses abril e maio de 2009. Fo-ram utilizados 298 isolados bacterianos obtidos da ri-zosfera de sempre - viva (Syngonanthus Elegans var.elegans) pertencentes a classes de Firmicutes e Prote-obacte´rias ( - ; - e - Proteobacte´ria). Todos os iso-lados foram cultivados em 1,5 mL de meio do tipo LBl´ıquido (BERTANI, 1951), incubados a 28 °C e agitadosa 180 RPM. Acompanhou - se o crescimento microbianoatrave´s de leitura espectrofotome´trica e ate´ atingirem ovalor OD600= 0,3. As culturas multiplicadas foram usa-X Congresso de Ecologia do Brasil, 16 a 22 de Setembro de 2011, Sa˜o Lourenc¸o - MG 1das em 11 tratamentos em triplicata, contendo os her-bicidas atrazine (8 e 16 ppm), glyphosate (4 e 8 ppm),nicosulfuron (2 e 4 ppm), glufosinate - ammonium (4 e 8ppm) e tembotrione (0,5 e 1 ppm) e testemunha (a´gua).Os herbicidas foram filtrados diretamente nos meios decultura LB (BERTANI, 1951) e D2 (KADO, 1970) semi- so´lidos, durante seu preparo. Al´ıquotas de 10, 50 e100 mL dos ino´culos bacterianos foram plaqueados nosmeios acrescidos dos herbicidas, espalhadas com alc¸ade Drigalsky e incubadas a 28 °C em estufa, no escuro.O crescimento bacteriano foi monitorado durante 5 diasapo´s a inoculac¸a˜o para medidas de aumento e contagemunidades formadoras de coloˆnias (UFC). As placas con-tendo coloˆnias de bacte´rias, confluentes ou na˜o, foramfotografadas. Os crite´rios de observac¸a˜o foram: conta-gem de coloˆnias para ino´culos de crescimento lento eformac¸a˜o de halos confluentes para bacte´rias de cresci-mento ra´pido.RESULTADOSNa˜o se observaram diferenc¸as significativas entre oscrescimentos de bacte´rias controle e bacte´rias subme-tidas a`s doses 8,0 e 16,0 ppm de atrazine; 4,0 e 8,0 ppmde glyphosate; 2,0 e 4,0 ppm de nicosulfuron; 4,0 e 8,0ppm de glufosinate - ammonium e 0,5 e 1,0 ppm detembotrione, indicando na˜o haver efeitos to´xicos dosherbicidas sobre os diferentes grupos de microrganis-mos testados. Resultados diferentes foram obtidos porTIRONI et al., 2009) com os ingredientes ametryn e tri-floxysulfuron - sodium (isolados e em conjunto), dadoscomo responsa´veis pela alterac¸a˜o da atividade microbi-ana do solo e ROSA et al., 2010) sobre os efeitos dosherbicidas glyphosate, halosulfuron e setoxydim sobrefitopato´genos, tambe´m in vitro. Isso pode ter se dadopelo me´todo de acre´scimo dos ativos ao meio de cul-tura. Tambe´m o nu´mero unidades formadoras de placas(UFP) e a velocidade de conflueˆncia de crescimento decoloˆnias foram similares entre os tratamentos com e semherbicidas em ambas as doses, confirmando na˜o haveralterac¸o˜es do crescimento in vitro de microrganismospertencentes aos grupos de microrganismos motivadaspelos ingredientes testados.CONCLUSA˜ONenhum dos herbicidas comerciais empregados nesseestudo inibiu ou estimulou o crescimento de dasbacte´rias, pertencentes aos grupos taxonoˆmicos estu-dados. Outros me´todos in vitro devem ser executados,a fim de confirmar ou na˜o a conclusa˜o.REFEREˆNCIASALTEMBURG, S. N.; LUZZARDI, R.; LOVATTO,P. B. 2010. The important role of biodiversity in or-ganic soil quality in agricultural production systems:an approach for microbiology edaphic as bioindicators.Caderno de Pesquisa se´rie Biologia, 22 (2): 18 - 36.BERTANI, G. (1951). Studies on lysogenesis. I. Themode of phage liberation by lysogenic Escherichia coli.Journal. Bacteriology. 62:293 - 300. KARAM, D.;SILVA, J. A. A.; FOLONI, L. L. 2009. Potencial decontaminac¸a˜o ambiental de herbicidas utilizados nacultura do milho. R. Bras. Milho e Sorgo, 8 (3): 247 -262. KADO, C.I.; HESKETT, M.G. (1970). Selectivemedia for isolation of Agrobacterium, Corynebacterium,Erwinia, Pseudomonas, and Xanthomonas. Phytopa-tology, 60(6), 969 - 976. MENTEN, J.O.M.; SAM-PAIO, I. A.; MOREIRA, H.; FLORES, D.; MENTEN,M. O SETOR DE DEFENSIVOS AGRI´COLAS NOBRASIL. Sindag: dados de mercado. Dispon´ıvel em:http://www.sindag.com.br/upload/OSetordeDefensivosagricolasnoBrasil.doc.Acesso em: 12 mar. 2011. POLEZA, F.; SOUZA, R.C.; STRAMOSK, C. A.; RORIG, L. R.; RESGALLAJR., C. 2008. Avaliac¸a˜o da toxicidade aguda para oorganismo - teste vibrio fischeri dos principais herbici-das e inseticidas aplicados na lavoura de arroz irrigadodos estados de Santa Catarina e Rio Grande do Sul.Ecotoxicol. e Meio Ambiente, 18: 107 - 114. ROSA, D.D.; BASSETO, M. A.; CAVARIANI, C.; FURTADO,E. L. 2010. Efeito de herbicidas sobre agentes fitopa-togeˆnicos. Acta Scientiarum Agronomy, 32 (3): 379 -383. TIRONI, S.P.; BELO, A.F.; FIALHO, C.M.T.;GALON, L.; FERREIRA, E.A.; SILVA, A.A.; COSTA,M.D.; ARBOSA, M.H.P. (2009). Effect of Herbicideson Soil Microbial Activity. Planta Daninha, 27: 995- 1004. WARDLE, D.A. 1995. Impacts of distur-bance on detritus food webs in agro - ecosystems ofcontrasting tillage and weed management practices.Advances Ecological Research, 26:105 - 182. ZULU,J. N.; VARISANGA, M. D. Microbiology and Myco-logy. African Virtual University. Dispon´ıvel em: ¡http://www.out.ac.tz/avu/images/Biology/Microbiology20and/20Mycology/.pdf¿ Acesso em 12 mar. 2011.BORBA, M. F.; AMORIM, S. M. (2007). Fungosmicorr´ızicos arbusculares em sempre - vivas: subs´ıdiopara cultivo e replantio em a´reas degradadas. Revistade Biologia e Cieˆncias da Terra. 7(2): 20 - 27.X Congresso de Ecologia do Brasil, 16 a 22 de Setembro de 2011, Sa˜o Lourenc¸o - MG 2

Efeito in vitro de herbicidas sobre bactérias da rizosfera de sempre viva (Syngonanthus Elegans var. elegans).

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