BILHASSI, T. B.

GIGLIOTI, R.

MACHADO, R. Z.

OLIVEIRA, H. N. de

OLIVEIRA, M. C. de S.

Portuguese

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa

935REPETIBILIDADE E ASSOCIAÇÃO ENTRE TÉCNICAS MOLECULARES E SOROLÓGICAS QUANTITATIVAS NA DETECÇÃO DE BABESIA BOVIS EM BOVINOS DE CORTE CRIADOS NO ESTADO DE SÃO PAULO, BRASILRodrigo Giglioti1, Talita Barban Bilhassi1, Rosangela Zacarias Machado2, Henrique Nunes de Oliveira1, Márcia Cristina de Sena Oliveira31 Departamento de Zootecnia, FCAV/Unesp, Jaboticabal-SP, Brasil, rodrigogiglioti@gmail.com2 Departamento de Patologia Animal, FCAV/Unesp, Jaboticabal-SP, Brasil3 Pesquisadora Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos-SP, BrasilEstudos genéticos sobre a resistência a babesiose bovina necessitam do uso de dados quantitativos confiáveis. Neste experimento foi estimada a correlação entre, a repetibilidade das características, o número de cópias do DNA de B. bovis quantificados por qPCR e os níveis de anticorpos determinados por Elisa quantitativo em animais jovens criados em área endêmica estável,  com a finalidade de verificar qual a melhor metodologia para avaliação dos fenótipos. Foram utilizados 51 bovinos da raça Angus (Bos taurus taurus), com idades entre 12 e 24 meses. As amostras de sangue foram colhidas com anticoagulante EDTA, para extração de DNA e sem anticoagulante para separação do soro, em duas oportunidades diferentes (maio e julho/2012, outono e inverno, respectivamente). O nível de anticorpos nas amostras de soro foi medido usando o ELISA indireto com os resultados agrupados em níveis de Elisa (NE). O DNA foi usado para a quantificação do número de cópias (NC) por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase Quantitativa em Tempo Real (qPCR). O reagente utilizado para as reações de qPCR foi o SsoFastTMEvaGreen®Supermix (BioRad). Os dados de NC e AP foram transformados em log10 (n+1) e analisados usando modelos mistos, que incluíram o efeito de colheita como fixo e animal como aleatório. Foram estimados os componentes de variância residual e de animal, sendo a repetibilidade de cada característica estimada. O procedimento MIXED do pacote estatístico SAS foi utilizado para realização das análises. As médias de AP e NC para a primeira e segunda colheita foram 0.77±0.03 e 0.69±0.04, 4.48±0.20 e 3.60±0.21, respectivamente. Foram encontradas diferenças significativas entre as duas colheitas (P<0.05) para os valores de NC e AP. Todos os animais foram positivos para a infecção por B. bovis pelas duas técnicas avaliadas. O estudo de associação mostrou não haver correlação entre as medidas de AP e NC. Os valores de repetibilidade para AP e NC nas duas colheitas foram 0,14 e 0,39, respectivamente. Não foi possível discriminar entre as duas técnicas, aquela que possa melhor ser utilizada como indicador de resistência à babesiose, mas ambas podem ser usadas para avaliar a prevalência e o nível de infecção por B. bovis, sendo que os  níveis de anticorpos mostraram-se menos variáveis para o mesmo animal nas duas colheitas efetuadas. Novos estudos estão sendo desenvolvidos com a finalidade de comprovar estas observações.Pavavras chave: associação, babesiose, Elisa, qPCR, repetibilidadeApoio financeiro: FAPESP

Repetibilidade e associação entre técnicas moleculares e sorológicas quantitativas na detecção de babesia bovis em bovinos de corte criados no estado de São Paulo, Brasil.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/1029922/1/marcia.pdf

Repetibilidade e associação entre técnicas moleculares e sorológicas quantitativas na detecção de babesia bovis em bovinos de corte criados no estado de São Paulo, Brasil.

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa