DUTRA, L. F.

PASQUAL, M.

PIO, L. A. S.

TEODORO, G. S.

VILLA, F.

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ccMicropropagação de Amoreira-preta'Cherokee I111.Efeito de Cinetina e Meios de CulturaLei/a Aparecida Seües PioFabioia Vil/aLeonardo Perreire DutraGrazíelle Sales TeodoroMoacir Pesque!IntroduçãoA multipiicação in vítro permite a obtenção de milhares de plantasisentas de vírus, geneticamente uniformes e em curto espaço detempo (Pasqual et al., 1991). Embora alguns métodos tradicionaissejam comum ente usados, a técnica de cultura de tecidos juntamentecom o uso de reguladores de crescimento e meios adequados podemeventualmente tomar-se um método preferido de propagação(Caidwe!l, í 984).Dentre os diversos reguladores de crescimento as citocininasdesempenham papel importante, sendo o tipo e sua concentração osprincipais fatores que influenciam o sucesso da multiplicação in vítro.O BAP é a citocinina mais utilizada, entretanto, a cinetina temapresentado resultados satisfatórios.Os meios nutritivos utilizados na micropropagação fornecem assubstâncias essenciais para o crescimento dos tecidos e controlam,em grande parte, o padrão de desenvolvimento in vitro . Embora o meioMS í19621 tenha favorecido o crescimento e desenvolvimento devárias espécies, a utilização de composições mais diluídas têmfornecido melhores respostas (Grattapaglia e Machado, 1998).Resumos do /I Simposio Nacional do Morango e do ia Encontro de Pequenas248 Frutas e Frutas Nativas do Mercosulo presente trabalho teve corno objetivo determinar a melhorconcentração de cinetina e tipo de meio para a multiplicação in vitro deplâruulas de amoreira-preta.Material e MétodosSegmentos nodais de amoreira-preta, cultivar Cherokee, com cerca de2 cm, foram excisados de plântulas preestabelecidas ín vitro, em meioMS, sem reguladores de crescimento. Os explantes foram inoculadosem tubo de ensaio contendo 15 ml dosmeíos Knudson i19461. Y2Knudson, B5 (Gamborg et al., 1968j e VII'hite (1963j combinados comcinco concentrações de cinetina (O; 0.5; 1,0; 2,0 e 4,0 mg L '). Osmeios tiveram o pH ajustado em 5,8 antes da autoclavagem e foramsolidificados com 6 9 L·1 de ágar. Posteriormente os explantes foramtransferidos para saia de crescimento a 27 ± 1 cC, irradiância de 35mmol m 2 s 1 e fotoperíodo de 16 horas, permanecendo nestascondições por 60 dias.O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualísadocom quatro repetições constituídas de quatro tubos contendo umexplante cada. As variáveis analisadas foram número de folhas,número de brotos, comprimento e peso da parte aérea, presença deraizes e peso fresco de calos. Os resultados foram submetidos àanálise de variância com o software SiSVAR iFerreira. 20001, sendoutilizado reqress.âo polinornial para concentrações de cinetina e testede Tukey para tipos de meio.Resultados e DiscussõesMaior média de brotos foi verificada em meio B5, enquanto que, paracomprimento dos brotos, os meios B5, }2 Knudson e Knudson nãodiferiram estatisticamente (Tabela 1). Com o aumento dasconcentrações de cinetina, o número de folhas aumentou, sendo omaior número de folhas (9,45) observado com 4,31 mg L-I doregulador de crescimento (Figura 1).A multiplicação de brotos ocorreu apenas nos tratamentoS quecontinham cinetina associada aos meios 85 e Knudson (Figura 2).Resumos de Pequenas Frutas e Frutas Nativas 249Houve pouca ou nenhuma formação do sistema radicuiar dos explantesinoculados no meio White. Maior número de brotos (1,75 e 1,44) foiobservado com 4 mg L' de cinetina nos meios 85 e % Knudson,respectivamente.Tabela 1. Número de folhas, comprimento e peso fresco do parte aéreade plântulas de amoreira-preta Cherokee em diferentes tipos de meio.UFLA, Lavras, MG. 2004 .••tv1er{) •••••·.•••••·•·•·••••••••.NuJ;l1e1"C!de· ••.••.•.•p~~o.f(~~t;od~••·•••••.•Cofílp~m~~1:b~â ..... ..·..···..•••• ••••·f.oJhas ·<pal1e~a~ii9F •·•••carieaêréaji:m).85 8171 a 0,7'6 a 2,02 aY2 Knudson 7,66 b 0,75 b 1,99 aKnudson 7,19 b 0,74 b 2,04 aWhfte 4,42 c 0,73 c 1,61 bMaior peso fresco da parte aérea (0,752 g) foi obtido com 4 mg L-1 decinetina. Porém, com o aumento das concentrações desse reguladorhouve decréscimo no peso fresco da parte aérea. É possfvel que essaredução no tamanho dos brotos seja devido ao efeito tóxico causadopelo excesso de citocinina.10trl 8CD..r:o'+- 6Q)"Oo 4•..Q)E,;:)2zOOY = 0,0639,1 + 0,551x + 5,89 Ff = 0,981 2 3 4Onetina (rTYJ L-')Figura 1. Número de tolhas em ptanturas de arnorerra-oreta. CUltivarCherokee. com diferentes concentrações de cinetina. UFLA, Lavras,MG,2004.Resumos do 11Simpôsio Nacional do Morango e do 1.0 Encontro de Pequenas250 Frutas e Frutas Netives do Mercosu!~:~jlcn 1,6oo 1,4•...~ 1,2 '=====t=:::::::"------.:l 1,0 lioQi 0'81,§ 0,6Z 0,40'2j0,0 1---------,,----,----,-----,OY = O,0481x2 - O,0356x + 1,11 R" = 0,83Y = 0,02972 - 0,0254x + 1,08 lf = 0,912 3 4Figura 2. Número de brotos em plântulas de amoreira-preta, cultivarCherokee, com diferentes concentrações de cinetina e tipos de meio.UFLA, Lavras, MG, 2004.A formação de calos ocorreu apenas em meio 85 nas diferentesconcentrações de cinetina. Possivelmente, a concentração denutrientes presente nesse meio associada à cinetina é suficiente paraque o calo se desenvolva.ConclusõesMaior média de brotos foi verifica da em meio de cultura 85.A multiplicação de brotos ocorreu apenas nos tratamentos quecontinham cinetina associada aos meios de cultura 85 e Knudson.Houve pouca ou nenhuma formação do sistema radicular nostratamentos que continham o meio White.Resumos de Pequenas Frutas e Frutas Nativas 251Referências BibliográficasCALDWELL, J.D. Blackberry propagation. HortScience, Aiexandria,19(2), p. 13-15, 1984.FERREiRA. D.F. Análises estatísticas por meio do Sisvar para Windowsversão 4.0. In: REUNIÃO ANUAL DA REGIÃO BRASILEIRA DASOCIEDADE INTERNACIONAL DE BIOMETRiA, 45, 2000, São Carlos.Anais ... São Carlos: UFSCar. 2000. p. 225-258.GAMBORG, O.L.; MILLER, R.A.; OJIMA, K. Nutritíon requirernents ofsuspension cultures of soybean root cells. 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Micropropagação de amoreira-preta Cherokee. III. Efeito de cinetina e meios de cultura.

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