Relacionar os marcadores genético com a resistência ao carrapato, os animais foram classificados como sendo de alta ou baixa resistência

ALENCAR, M. M. de

OLIVEIRA, G. P. de

PANEPUCCI, L.

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172 REV. soe. BRAS. ZOOT.ESTUDO PRELIMINAR DA RELAÇÃO ENTRE MARCADORESGEN~TICO-BIOQUfMICOS E RESIST~NCIA AOCARRAPATO EM GADO DE CORTELucia LUÚla L. Panepucctt, Maurício M. de Alencar1 e Gtlson P. de Oliveira1RESUMO - Foram analisados osmarcadores genétíco-bíoquimícos de120 animais das raças canchim e ne-lore, que sofreram infestações artifi-cial e natural de carrapatos (Boophi-lus microplu«), Para relacionar osmarcadores genéticos com a resístên-cia ao carrapato, Os animais foramclassificados como sendo de alta oubaixa resistência, quando possuíamresistência acima ou abaixo da médiado seu grupo de raça. sexo e tipo deinfestação, respectivamente. A análí-se dos marca dores foi realizada pormeio de eletroforese em gel de amidopara seis sistemas protéícos sangül-neos: albumina, amílase, transrerrí.nas, hemoglobína, anidrase carbôní-ca e nucleosídeo fosforilase. Houveevidências de associação (P < 0,05)entre baixa resistência ao carrapatoe transferrina E no gado nelore, eentre alta resistência e amUase C nogado canchím,Termos para índexaçâo: Marcadoresgenétíco-bíoquímícos, pohmorfísmosprotéícos, carrapato, gado de corte.Relationship between geneticmarkers and resistance to tickinfestation in beef cattle,ABSTRACT - Gene markers wereanalysed in 120 animals from theCanchlm and Nelore breeds. Tick ín-festation was studied in natural andartificially infested anímals, that we-re classified as having high or lowresístance to tick burden when re-sistance was over or below averageof each sex, breed and type of íntes-tatíon (natural or artificial) group.Gene markers were studied by starchgel electrophoresis for six proteínsystem.s: albumín, amylase, transter.rín, hemoglobín, carbonic anhydraseand nucleoside phosphorylase, It wasdetected assocíatíon (P < 0.05) bet-ween low resistance to tick Infesta-tíon and transferrin E 10 the Nelorebreed, and between high resistanceand amylase C in the Canch1m breed,Key words: Genetic markers, proteín.pclymorphísm, tick infestation,beet catUe.INTRODUÇAOA variabilidade genética e suaexpressão nas proteínas dp sanguevem sendo largamente estudada emtodas as espécies animais (LEWON-TIN, 1974; BURNS, 1975; MCDERMIDet alli, 1975; BAKER & MANWELL.1980; OONZALEZ et alll, 1987). Essascaracterísticas genético bioquímicassão controladas por pares de genes,geralmente. codominantes, cuíos te-nótipos permanecem 1nalterados du-rante toda a vida, apresentando umasegregação mendeliana simples.Vários estudos relacionam carac-terísticas morroruncíonaís e adapta-tivas de diferentes raças de bovinoscom as freqüências relativas de dife-rentes marca dores genéticos (OSTER-HOFF & NEETHLING. 1969; BRAEND,1972; KIDDY. 1979). Assim. o fato de1 - Pesquisador da Empresa Brasileira de Pesquisa AçopecuArla (EMBRAPA)- Unidade d8ExecuçAode Pesquisa de Amblto Estadual (UEPAE)de São Carlos - SP_VOL. 18 N9 Z 1989 17Jo gado zebu ter uma freqüência com-parativamente maíor do que o gadoeuropeu para o alelo B da hernoglo-bína e para o alelo E da transterrína,entre outros, poderia estar associadoà rusticidade e adaptação aos trópi-cos <BAKER& MANWELL,1980; PA-NEPUCCI, 1988). Da mesma maneira,a amilase C tem uma freqüênciamaior em gado europeu, junto comoutros alelos, que assim confeririam aeste gado a adaptabilidade- de quedispõe nos ambientes que se desen-volve.Muitos estudos têm sido realiza.dos, desde a década de sessenta. rela-cionando caracteristicas de produçãoanimal com grupos sanguíneos e po-l1morfismos protéícos do sangue (NEI-MAMMSORENSEN & ROBERTSON1961; FRANCIS & ASHTON, 1967;BRUM et alíí, 1970; CARR et aUi,1974; KIDDY et alíí, 1975; KIDDY,1979; MEGOIOLARO, 1981; BAKER& MANWELL, 1983; RIBAS, 1985;GELDERMANNet alll, 1985; LOZO- O presente trabalho foI realizadoVAYA & GOLOVCHENKO, 1987). O com animais das raças canchim e ne,melhor -exemplo de relação entre va. lore, pertencentes AOs rebanhos da..riantes bioquímicas e resistência a Unidade de Execução de Pesquisa dedoenças foi detectado no homem, em -- Ambito Estadual de São-Carlos, Uepa.e-virtude de haver sido encontrados ín- de São Carlos, SP_ Foram utilizadosdivíduos com bemcgloblna S mais re- 120 animais que sofreram ínrestaçõessístentes à malária (ALLISON, 1955). artificial e natural de carrapatos:_ FRACIS & ASHTON (1967) e (Booptiilus microplu8, --CanestrinH.-ASHTON et alll (1968) relacionaram Para a tnfestação artificial ut1llza...·os genótipos da amilase com a carga rara-se 30 animais canchíns e 30 aní-de carrapatos em gado cruzado (brah- mais nelores, sendo metade de cada.man-bos tauros), CARR et alli (1974) sexo, nascidos em 1984, que aos 15,5-detectaram uma correlação positiva meses de idade receberam duas íntes-entre a hemoglobina C (HbC) com a tações de 20.000-1arvasde carrapato,-presença e a quantidade de carrapa- cada um. em intervalo de 14 dias.tos encontrados em gado zebu de Dezoito dias após cada infestação, ro,Zambia. raro feitas três contagens, em diasO carrapato do boi, BoophUtU mf- alternados, do número de fêmeas ín-croplU$, é um ectoparasíto responsá- gurgitadas do lado esquerdo do anl-vel por sérros problemas, afetando a mal.economia da bovinocultura de ínúme- Na infestação natural, utílízaram-ros países. Dependendo do nível de ín- se também 60 animais, metade de ca-festação, ele pode interferir na produ- da raça e sexo, nascidos em 1985,queção animal (GEE et alli, 1972), na com idade média de 19 meses foramtransmissão de doenças (STEWART colocadas em pastagens de Andropo-et alíí, 1981) e no aproveitamento de gon gayanus. Foram feitas contagenscouro (OLIVEIRA, 1983). de carrapatos do lado esquerdo doA caracterização biológica de uma animal, a cada 28 dias, totalízando 12.nova raça deve ser feita através da contagens ao longo do período expe-comparação com outras, em determí. rimental.nados tipos de ambiente e manejo. A Os anímaís da raça canchim, utí-Empresa Brasileira de Pesquisa Agro- lizados no presente estudo, são oríun.pecuária (Embrapa) , por intermédio dos do rebanho da própria Uepae deda Unidade de Execução de Pesquísa São Carlos, podendo ser considerados .de Ambito Estadual (Uepae) de SãoCarlos, vem há algum tempo desenvol-vendo projetos de pesquisa com a fi-nalidade de avaliar o desempenho daraça canchim em comparação à raçaneiore. Dentro deste contexto OLI·VEIRA& ALENCAR(1987)e OLIVU-RA et a11l(988) avaliaram a resistên-cia da raça canchim ao carrapato emcomparação à raça nelore, em infes-tação artificial e natural, respectiva-mente, verificando maior resistêncianos animais zebuínos, apesar da ele-vada resistência observada nos ani-mais da raça canchim.O presente trabalho tem comoobjetivo verificar a relação entre mar-cadores genétíco-bíoquímícos e resis-tência ao carrapato nas raças canochim e nelore, visando obter mais in-formações a respeito dessas duasraças.MATERIALE MtTODOS174como sendo amostra representativada raça, visto que grande parte dosrebanhos de gado canchim foram for-mados, a partir deste rebanho. Osanimais da raça nelore, apesar de te-rem nascido na Uepae de São Oarlos,são tuhos de vacas adquiridas na fa-zenda Santa Sofia, situada no muni-cípio de Presidente Venceslau, SP, ede touros adquiridos do Instituto deZootecnia do Estado de São Paulo,Estação Experimental de Sertãozinho,ambos controlados (fílhos de pais emães regtstradas) e que representa.vam um número razoável de ünna-gens da raça.Amostras de sangue foram extrai-das da veia [ugular de todos os ani-mais infestados, e centrifugadas por15 minutos a 3 000 rpm. O plasma foireservado e as hemácías foram lava-das por três vezes em solução salina,0,9% NaCI. Foram analisados seissistemas genéticos: albumina (Alb),transferrina (TI), amilase (Am), ne-REV. soe. BRAS. ZOOT,mogloblna (Hb) , nucleosideo fosfol1-lase (NP) e anidrase carbôníca <CALOs marcadores genéticos foram íden-tírícados por eletrororese em gel deamido horizontal, usando técnica es-pecial para cada um deles: albumina(KRISTJANSSON, 1963), transterrí-nas <GELDERMANN, 1970), amílase<GEBICKE-HAERTER & GELDER-MANN,1977), hemoglobína CBRAEND,1971), nucleosídeo fosforUase (ED-WARDS et alU, 1971), e anídrase car-bôníca pela técnica de precipitaçãoda hemoglobina (PANEPUCCI, 1988),Para relacionar os marcadores ge-néticos com a resistência ao carra-pato, os animais foram classificadoscomo sendo de baixa ou alta resistên-cia ao parasito, quando carregavamnúmero de carrapatos, respectivamen-te acima ou abaixo da média do seugrupo, média esta obtida para cada.raça, sexo e tipo de infestação (Qua-dro I>' Desta maneira, pode-se juntaros sexos e os dados dos dois tipos delnfestação.QUADRO1- Média- dos números de carrapatos por raça, sexo e tipo delnfestaçãoInfestaçãoRaça Sexo Artificial NaturalCanchim Machos 79,0 17,0Fêmeas 49,0 5,3Nelore Machos 10,0 7,5Fémeas 2,1 2,2=contagem do lado esquerdo do animal.A associação entre a resistência aocarrapato e os marcadores genéticosfoi avaliada pelo teste de qul.qua.eirado.RESULTADOSO Quadro 2 mostra a relação en-tre o número de animais, para cadagenótípo, nos seis sistemas protéí-C'lC; analisados e o nível de resistên-cia (alta e baixa) ao carrapato pa-ra as raças nelore e canchim. NestetlPo de análise não foram observa-das, pelo teste de quí-quadrado, dí-ferenças significativas entre as elas.ses (alta e baixa) dentro de cadagenótipo e sistema protéieo (P >0,05).Analisando.se o número de ani-mais, em função dos alelos nos d1fe-rentes sistemas protéícos, foram de-tectadas diferenças significativas(P < 0,05) para amilase (x = 4,260) etransferrlnas (x = 6,109) das raçascanch1m e nelore respectivamente(Quadro 3>' Assim. houve maior nú-mero de animais considerados de al-ta resistência que possuíam o aleloAmC do que animal') de baixa resis-tência, no gado canchím, e maior nú-mero de animais considerados de baí,xa resistência que possuíam o aleloTfE no sistema transferrinas no ga-do nelore.VOL. 18 NP Z 1989 17SQUADRO2 - Número de animais por genót1po nos sistemas protéíeos (SP)analisados por classe de resistência. ao carrapato (Alta e Baixa)e raça (Canchim e Nelore), e valor correspondente do qui-quadrado (X2)Canchim NeloreGen6t1poSP Alta Baixa x2 Alta Baixa x2Hb AA 27 22 0,336 12 16 1,416AB 5 6 17 12BB 3Aro BB 21 24 2,057 27 28 0,152BC 9 4 2 3CC 2Alb FF 8 10 1,247 2 3 0,181FS 15 13 10 11SS 9 5 17 17TI AA 3 1 4,657 4 1 6,901DD 22 18 4 1EE 1 1 4 8AD 3 5 10 8AE 2 6 11DE 3 1 1 2CA SS 29 24 0,388 13 13 0,445ZZ 2 3SZ 1 1 13 16FS 3 2NP (HH e BL) 21 18 0,012 29 1,936LL 11 10 2 29Hb = hemoglobina; Am = amilase; Alb = albumina; TI = transrerrína;CA = anidrase carbõníca e NP = nucleosídeo fosforilase.DISCUSSAOA hemogloblna C descrita porCROCKETI' et alíí (963) em gadozebu africano náo foi detectada nopresente trabalho nas raças canchime nelore. No entanto, CARR et alli,(1974) encontraram correlação posí-tiva, quando avaliaram a intensidadede infestação do carrapato com estahemoglobina. No mesmo trabalho, osautores enfatizam a ausência de re-lação entre a intensidade desse íxo-dideo e a amílase C. Entretanto,FRANCIS & ASHTON (967), em tra-balho semelhante, verificam que afreqüêncía de AmB é maior no grupomenos infestado com carrapatos emgado cruzado australiano e que a dis-tribuição da amllase nos 20 animaismenos infestados diferia significati.vamente da distribução nos 20 .aní-mais mais infestados. ASHTON etalll, (1968), por outro lado, analísan-do 25 populações, produto de cruza-mentos de zebu australiano e Boataurus, totalizando 7741 animais, mos-traram que animais Com o genótipoAmC possuíam número sígnlfícatíva-mente maior de carrapatos que osoutros genótípos.Apesar de o trabalho de FRANCIS& ASHTON (967) relacionar amilaseB com alta resistência ao carrapatoe o trabalho de ASHTONet alll (968)relacionar amílase C com baixa resís-têncía, o presente trabalho mostra re-sultados inversos, alta resistência aocarrapato e amilase C no rebanhocanchím, Não obstante estes resulta.176 REV. soe. BRAS. ZOOT.QUADRO 3 - Número de alelos dos diferentes sistemas nrotéícos analisados(SP), por raça e classe de resistência (Alta e Baixa) e valorcorrespondente do qui-quadrado (x2)aCanchim NeIoreSP AleIo Alta Baixa X2 Alta Baixa. x2Hb A 59 50 0,302 41 44 0,001B 5 6 17 18Am. B 51 52 4,260· 56 59 0,145C 13 4 2 3Alb F 31 33 1,321 14 17 0,168 .S 33 23 44 45Tt A 9 9 0,163 24 21 6,109·D 50 42 19 12E 5 5 15 29CA S 59 49 0,733 42 44 0,585Z 5 7 13 16F O O 3 2• P<0,05a No calculo do qui..quadrado (X2) foram el1m1nadas classes com' frequênclasmuito baixas.dos serem preliminares, devido aopequeno número de animais analisa-dos, é possível que o cruzamento rea-lizado para obtenção da raça canchimtenha, de alguma maneira, por efeí-tos de pleíotropía ou ligação entre 10-cí, determinado esta maior resistên-cia em animais COm amílase C. Issoexplicaria, em parte. a ausência derelação entre resistência ao carrapa-to e amilase no gado nelore, que porsua vez mostrou relação entre baixaresistência e transferrina E. Foi suge-rido que Os alelos, encontrados cemmaior freqüência em determinadasraças, confeririam a estas caracteresadaplativoc; (BRAEND. 1971, 1972;MCDERMID et al.ii., 1975; KIDDY,1979). Assim. parece contraditório ofato de o alelo C da amilase estar re-lacionado no gado canchim com altaresistência ao carrapato, já que estealelo tem uma freqüência maior emgado europeu que é, notoriamente,mais sensível à infestação que o zebu.Da mesma maneira. o aleIo E datransferrina está associado aqui combaixa resistência ao carrapato e temmaior freqüência em gado zebu queé tradicionalmente mais resistente aocarrapato que o gado europeu. Ape-sar destas contradições, é importanteressalvar que a relação encontrada éum resultado preliminar e deverá sermelhor' explorada em futuras pesqui-sas. De todas maneiras, a resistênciaao carrapato é, sem dúvida, resulta-do de uma série de fatores genéticose ambientais que. em diferentes graus,contribuem para a infestação.O estudo pormenorizado de todosos fatores e a confirmação da rela-ção do polimorfismo e a infestaçãopelo carrapato seriam de grande va-lia para a seleção de animais comresistência ao carrapato. Para tal.seria necessário a continuidade deexperimentos nesta linha de pesqui-sa, e esta será a proposta para futu-ros trabalhos ne3SRárea de estudo.CONCLUSOESAs análises realizadas entre Os di-ferentes fenótipos para os diferentessistemas proteícos e a infestação na-tural e artificial ao carrapato de ani-mais nelores e canchins permitem su-gerir:1 - Associacão (P < 0.05) en-tre baixa resistência ao carrapato do~ado nelore e transterrína E;2 - associação (P < 0.05) entrealta resistência ao carrapato do gadocanchim e arnílase C.VOL. 18 N9 2 1989AGRADECIMENTOSOs autores agradecem ao técnicoagrícola, Sr. Francisco José de Ruzza,pela inestimável ajuda na coleta dosangue,LITERATURA CITADA1. ALLISON, A.C. Aspects of poly.morphísm ín mano Cold SpringHarbor SvmP. Quant. Btol. 20:239·255. 1955.2. ASHTON, G.C.; SEIFERT, G. W.& FRANCIS, J. An assoeíatíonbetween serum amylase phenoty.pe and tick Infestation ín cattle.AU8t. J. Btol. Sei.• 21: 303-308, 1968.3. 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Estudo preliminar da relação entre marcadores genético-bioquímicos e resistência ao carrapato em gado de corte.

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