O objetivo desse estudo foi avaliar por citometria de fluxo o efeito da catalase sobre a integridade da membrana plasmática (IMP) dos espermatozoides durante resfriamento do sêmen de garanhões da raça pônei brasileiro. Foram realizadas coletas de sêmen, semanalmente, de cinco animais, clinicamente sadios e em bom estado nutricional, perfazendo um total de 10 amostras por animal. Após a colheita, o ejaculado foi dividido em duas alíquotas e diluído para uma concentração de 25 milhões de espermatozoides/mL, utilizando o diluidor comercial BotuSÊMEN® (leite desnatado, glicose, conservantes, excipientes e antibióticos segundo o fabricante) aditivado ou não com catalase (200 U/ml). A IMP foi avaliada utilizando-se os fluorocromos iodeto de propídio (IP) e diacetato de carboxifluoresceína (DIC). As subpopulações de espermatozoides foram estabelecidas pela coloração, onde as células coradas com DIC eram os espermatozoides vivos, as coradas com IP os espermatozoides mortos, e as com dupla coloração, os espermatozoides moribundos. A porcentagem de espermatozoides vivos foi significativamente maior quando diluidor foi aditivado com catalase (68,56 ± 10,23 x 80,23 ± 17,38; p < 0,05) Conclui-se que a catalase está correlacionada positivamente com a preservação da integridade da membrana plasmática de espermatozoides de garanhões da raça Pônei Brasileiro
