FERRERIA, C. R.

GARCIA, J. M.

MELO, D. S.

MONTEIRO, F. M.

NICIURA, S. C. M.

OLIVEIRA, C. MELO, D. S.

PERECIN, F.

SARAIVA, N. Z.

TETZNER, T. A. D.

VANTINI, R.

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Acta Scientiae Veterinariae 36(Supl. 2): 2008. AVALIAÇÃO DA QUALIDADF: EM EMBRIÔES PIV COM A SUBSTITUIÇÃO DO SORO FETAL BOVINO E nA ALBUMINA StRIC A ROVINA PELA OVALBlJMINA Tetzner, L/\.D.'; Sarai\·a . N.I.,': Perecin, r, ' ; Ferreira. C.R,~; Méo, S,C J ; Oliveira, C.S': Melo, I),S,I: Monteiro. 1',['-.1, ': V'llltini. R. ' : Garcia. J.M.' 'DI'v1VPR/\-FCAV-lINESP. Jnboticabal-SP. Brasil. .'1./\H-F/Ei\-I IS P. PiraSSIIIlIIIl!!'I-SP. Hrasil. '(, PPSE-I':J\1nR,,\PI\. S:10 ('arlos-SI'. Brasil. laliane t.:t/lltra yalll1l),c(\nl hr I 'ma das I'onnfls milis el'icientes para Sl' avaliar a lj\l,tlidatlc ernhrion:'u'iil dns bLtst()clstns produ/idos in \itro (1'1\') <' rela t':cnica til: Cl)loraçào diti.:renci:d da massa celular inll'rIta (l\l('I) e (\(1 Ind'"hl:lslo (I F) , :\ s c':lulas da MCI ,.1.1" "rige'fll ao Ic'ln e' a,; do TI". ás memhranas extra-l'mbri()núrias Sq!undo Nl'uhcr 1'1 u/ tThe'l io!!cnology. \ 57. p. 21 '1~-22()2. 2()02). elllhr ii'lcs bovillos de qualidade superi(\r d" elll arrCSelllar " IIÚIllCJ'(I lolal dc c':luL,s " mais pró:\illlo ao nltll1crn de ciclns. () prcsenle e:<ludo a\'a liou o cfeill) qualitati\'o da snhstiluiçãn do soro fetal h<l\'illll i SI-'I\) e: da albumina s':rica bO\ inil (BS/\) pela o\alhumina (OVA), Os oócitos foram I11lllul'ados in vitro vlll l11<.:ill reM 1')9. suplcJllentndo com: SI-'B (I{)% SFB: Cr:vpion'), ou BSA (Inlab'; 4mg/mL), ou OVA (Inlnh': 4mg!mU, c i.Opg/mL FSlf (Plusel'. ('alier), 50pg/ mL hCG (I'rorasi'. Serono). 1.0~lgJmL .:slrmliol (S igma 1-:-2758). O.lmM piruvato de sódio e 83,4~lglmL amicacina .. O procedimenlo dc l\:cundaç,io in vilro foi realizado em meio TALP-FIV, com O.2mM pínlvato. 83.4pgl1llL amicacina e 61llg/mL ,k BSA ou OVA. Procedcu-se n cultivo in vitro em meio SOl'. eom srB. aSA ou OVA c atmosfera COIll baixa conecntrnção de O,. cm cúmara modular a 3S,5°e. :\ determinaçào da \>lel c tio Tf roi baseada na léenica de eolomç[io diferencial por l1uorDcrnmo. <kscl'iln por I \\':tsak i ('1 (lI. (Journal (lI' Rcproductioll and F<!rti lit y. 1', t)O, p. 279-8.'í. 1990), Os blaSlocistos foram lralados com prollase .: snlllç;)o úcida de Tymdcs. PnstcriOrl11enlc. I""" dos cm meio T(,1vl- I 99 I lepe:s c incuhad(1s l'll1 ;'tt:iúo pinico ( I () m\1: Reage'n') c I'VI' (Jmgiml.: Sigm;J'), 1:111 seg uida C,'\j1oslns 11 soro d-: co<!lho allli-h'1\ 111<> e' a cIlIllpkllh:rllt1 ,k cobaia acrescido I () !I !;/m I imklo de: prnpidin (Si)!ma' 1'-,11701 c I U~l)l. :IllL IIt1cchst 33342, ()s hl,,~ttlci,t(\, 1;)1',\[11 la\ "tI"s e:1Il I'I\S ç ri:\ados l'lIlrc IiIn,in,rs e larnillulas. c n\ altados <.:r1J l11icn)~cúpl(l de e'pinuorc5cência Ljuantn an nÚlllcro de células tOlal. MCI (nú,kos c('fados pelo 111l~'chSl ~3~H2J c TI, (núckns corados pelo illtle\o de pr(lpídio e I!()eellst :133,12) Cad" tralaI11e:llIo roi ,Ibn:\'iado CPIIl " prillle:ira letra rcCt:re:nte ao suplclllcnlll utili/ado nu 111,lluraçüo, ii segunda na I'ccundaç:in. c a kn:eira no cltlti\'tl. Para <1\ a!iaç:l,) ljualitali\a. foram utilizados 390 blaSlocistos dislribuídos em sete grupos: CONT. SBS. SOS. BBB. BOB, ()(}() ou O!\O. cm três re'petiçôl:s, ,,\ anúlise estatística l('i realizada ulilizando-se () son\\'are SAS 9.1. os rcsultados l'llralll ,uhllldidn, ,i /\N( )V/\ l' as Im'di,):;. comparadas pelo tesl,' de Tukc) ao ni\el uc :< igllill c':lIIcia de 5°0, :\ média de: c<'lulas tia MCI ntl" hlaSll>clslo, ,II> )!rllpo ()O() ( 1(1.7')) l'ni inkrior (p<().1l5) allS demais t!ruplls, Ll1Irctall ln. a I11<'dia de' n'lulas clt1 TI' III> grupo ()()() (,,8.25) fpi sellll'lhantl' (I' 0.0) ,1\" grll po~ HBB t·15.7,1) C; 1l\1Il (,15 ,60l. c:: IIIü:rinr (p·(I.O:') aos grupos Ct)N'1 1)".:'i9) SIIS (5·1.·111. SOS (5(,.71) l' 0 110 1,17.35l. i \ Ill<'dia IOlal de: c01ulas dns blastuci,lOS d,' grupo ()()() !.'í(1.(),1) (li Illkri,>r (r' 0 .0)) ao, gnlp"'o ('(lN I (X, 1.86). SHS 178.9(,). SOS (81.32). HHll (68.11). HOn (69 . .'í5) e OHO (69.X2), () IlltmcJ'() tntal de c':lula, IIOS Iratalllentos. com din:rsas I'nntl's liL ,;upkmcllIaçiio pr(ltéica. mostrou-se \'ari<ivcl entre 56.04 '1 84.86 células, Consi(krand" o illtel'\'ulo de: avaliação. eSla m~dia roi discrelalllente inferior ao espcrado pela idade cronológica cios blastOl:istlls, Concluímos ljuc ..; pllssível produzir in vitru cmbriClcs ho\'in\l~ !li! aw;cncia de SFB dou BSA. com a ((lIlte prot':i<.:a OVA. embora ii <.jualida(k dos blaslocistos seja infi.:rinr. Apoio línallcciIT' : FAI'LSI' 1l5/úO:W)-2 c CNI'Lj, 

Avaliação da qualidade em embriões PIV com a substituição do soro fetal bovino e da albumina sérica bovina pela ovalbumina.

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