CARRILHO, E.

HUACCA, M. F.

REGITANO, L. C. de A.

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Detecção de bactérias viáveis e não viáveis por técnicas de PCR e RT-PCR usando tecnologia LAB-ON-chip.

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QA-076 DETECÇÃO DE BACTÉRIAS VIÁVEIS E NÃO VIÁVEIS POR TÉCNICAS DE PCR E Rl=-PCR USANDO TECNOLOGIA LAB-ON-A·C Maribcl Funes Huacca* (PG)', Luciana C. A. Regitano (PO)2 e Emanuel Carrilho (PO) 1 1. Instituto de Quimlca de São Carlos/USP - Av. Trabalhador Sãocarlense, 400 - CP780/CEP 13560-970 - São Carlos/SP - 2. Embrapa Pecu Sudeste - CPPSE - Fazenda Canchim - São Carlos, SP Palavras Chave: Alicyclobacillus acidoterrestris, RT-PCR,.Lab-on-a-chip Resumo: A substituição dos métodos microbiológicos pela reação em cadeia da poli meras e (PCR) na detecção de microorganismos te vantagem de ser sensível, rápido e específico. No entanto, a técnica de PCR antecedida por transcrição reversa (RT -PCR) somente as bactérias viáveis usando mRNA como alvo e utilizando primers específicos para a amplificação dos genes. Reações de RT-PCR foram realizadas com DNA e RNA respectivamente, extraídas das bactérias A. acidoterreslris presentes em sucos de laranja. quantificações dos amp/icons foram realizadas no Lab-on-a-chip, Bioanalyzer 2100, mostrando que a concentração do amplicon produ foi maior na PCR, demonstrando-se que a RT-PCR serviu para detectar somente as células viáveis. O amplicon detectado teve tamanho de 292 bp e concentrações variando de 500 até 0,3 IJg mL·l . O tempo total da análise foi de 24 horas, enquanto que os mél clássicos microbiológicos levam até 7 dias para obtenção dos resultados. 

Detecção de bactérias viáveis e não viáveis por técnicas de PCR e RT-PCR usando tecnologia LAB-ON-chip.

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