COSTA, M. R.

MARQUES, J. R. F.

SILVA, C. S.

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II - SIMPÓSIO BRASILEIRO DE RECURSOS GENÉTICOSANÁLISE DE PRIMERS PARA ACARACTERIZAÇÃO GENÉTICA DO MUÇUÃ(Kinosfernon scorpioides scorpioides)Maria Rosa Costa': José Ribarnar Felipe Marques': Caio Santos Silva'1Pesquisadores Embrapa Amazônia Oriental-Travessa Enéas Pinheiro s/n- mrco@cpatu.embrapa.br,marques@cpatu.embrapa.br2BoIsista PIBIC/CNPq Embrapa Amazônia Oriental- Travessa Enéas Pinheiro s/n-scaio@hotmail.comPalavras Chaves: RAPO, Marcadores, Variabilidade, Seleção() muçuã é uma tartaruga serni-aquática com distribuição geográfica do Panamá, na América Central,ao norte da América do Sul, sendo que no Brasil é encontrado nas caatingas do nordeste, nos lençóismaranhenses e na região Amazônica. O seu habitat natural é o lodo do fundo de rios e lagos. Sua carneé muito apreciada e por isso tem sofrido ameaças pela caça desenfreada que tem ocorrido nos últimosanos. Neste sentido a Embrapa Amazônia Oriental, iniciou as pesquisas com esta espécie e visando apreservação da mesma implantou uma coleção ex situ no Banco de Germoplasma Animal da AmazôniaOriental-BAGAM, na ilha de J\Iarajó, no estado do Pará. Inicialmente foram colerados dados referentesà produção e reprodução e mais recentemente foram iniciados os trabalhos de caracterização genética nolaboratório de genética molecular-LABGEN. O objetivo é analisar a diversidade genética da espécie. Fo-ram coletadas aleatoriamente amostras de sangue de 92 animais. O DNA foi extraído a partir de sanguetotal utilizando um protocolo inorgânico pré-estabelecido. Foram testados oitenta primers e selecionadosos mais polimórficos com bandas mais robustas e definidas. As reações foram desenvolvidas, de acordocom o protocolo de Williams et al. (1990) modificado num volume final de 13: I, contendo água desti-lada autoclavada, 20 mi\J Tris-HCl (PH 8,0), 50 mM KCl, 2,0 mM MgC12, 200: .M de cada dNTP, BSApurificada (2,5 mg/ ml), 1,3 uM primer arbitrário, 1U.l Taq DN A polimerase e 15 ng de DN A genôrnico,cobertas com duas gotas de óleo mineral. As amplificações foram realizadas em termociclador de DNAThermolyne Amplitron lI, modelo DB.80225, sendo realizados 40 ciclos de l' a 940C, l' a 370C e 2'a n 0c, seguidos de mais 7' a nO c, para a completa extensão dos produtos amplificados. O métodoutilizado para a separação dos produtos amplificados foi a eletroforese horizontal, em gel de agarose1,0(10.Os primers mais polimórficos foram o OPU 20 (9 polimorfismos) e OPU 19, OPJ 13,OP] 10 EOPA 09 (8 polimorfismos). Foram selecionados 38 primers que apresentaram acima de 4 polimorfismosLJueserão utilizados na caracterização genética do muçuã utilizando marcadores RAPD (Polimorfismosde DNA amplificados ao acaso) que será a etapa complementar deste trabalho.-477-

Análise de primers para a caracterização genética do muçuã (Kinosternon scorpioides scorpioides).

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