ALVES, M. P.

CONCEICAO, R. R. P. da

MIGUEL, R. de A.

PEREIRA, G. da M. E

QUEIROZ, V. A. V.

ROCHA, M. C.

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Determinação de fumonisinas em milho armazenado em paióis de produtores rurais da região central de Minas Gerais.

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  XXX CONGRESSO NACIONAL DE MILHO E SORGO “Eficiência nas cadeias produtivas e o abastecimento global”    Determinação de fumonisinas em milho armazenado em paióis de produtores rurais da região central de Minas Gerais  Renata Regina Pereira da Conceição (1); Valéria Aparecida Vieira Queiroz (2); Rafael de Araújo Miguel (3); Gabriel da Mata e Pereira (4); Marina Pieroni Alves (5); Maria Clara Rocha (6).    (1) Estudante de Pós-graduação/Bolsista FAPERJ; Universidade Estadual no Norte Fluminense Darcy Ribeiro; Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro; renataponts@yahoo.com.br; (2) Pesquisador; EMBRAPA Milho e Sorgo; valeria.vieira@embrapa.br; (3) Técnico de laboratório; Embrapa Milho e Sorgo; (4); Estudante de Engenharia de Alimentos/Bolsista FAPEMIG; Universidade Federal de São João del-Rei; gabrieldamata13@hotmail.com; (5) Estudante de Engenharia de Alimentos/Bolsista CNPq-PIBIC; UFSJ; marina_pieroni2@hotmail.com; (6) Estudante de Engenharia de Alimentos; UFSJ; mcrufsj@outlook.com  RESUMO: O milho é um cereal de grande importância tanto para a alimentação humana quanto para a animal. Porém, está sujeito ao ataque de fungos produtores de micotoxinas; dentre elas, a fumonisina oferece riscos à saúde, podendo ser letal. O trabalho teve como objetivo avaliar a incidência de fumonisinas totais em grãos de milho armazenados em propriedades familiares da região central de Minas Gerais. Foram coletados dois sacos de amostras (150 espigas) no centro e nos quatros cantos do paiol das seis propriedades, em quatro épocas de coleta, que foram secadas em estufa a 65 °C e moídas. Para detecção de fumonisinas seguiu-se o método por purificação em colunas de imunoafinidades FumoniTest®, e os teores foram determinados em fluorímetro. Foram detectadas fumonisinas em todas as amostras analisadas, com níveis variando de 30 a 4.650 µg kg -1, com contaminação média de 1.547 µg kg -1. Apesar de os teores se apresentarem abaixo do recomendado para milho não processado na legislação brasileira vigente, 65,2% das amostras estavam acima do limite estabelecido pela União Europeia para consumo humano, podendo causar riscos à saúde.  Termos de indexação: Micotoxinas; Zea mays L.; FumoniTest. INTRODUÇÃO  O milho (Zea mays L.) possui grande importância econômica e para a alimentação humana e animal. O cereal ocupa o terceiro lugar na produção mundial de grãos, sendo superado apenas pelo trigo e arroz (Silva et al., 2012; Stefanello et al., 2012). Porém, assim como outros grãos, o milho é vulnerável ao ataque por fungos toxigênicos, o qual pode se iniciar ainda no campo. A contaminação fúngica da espiga pode ser favorecida pelo clima, mau empalhamento e/ou danos causados por insetos (Hermanns et al., 2006; Duarte et al., 2009). Além de alterar a qualidade dos grãos de milho, alguns gêneros de fungos podem produzir micotoxinas, entre os quais se destacam Fusarium, Penicillium e Aspergillus (Nascimento et al., 2012). As micotoxinas são metabólitos secundários causadores de problemas à saúde humana e animal, pois exercem atividades tóxicas sobre o organismo (Marques et al., 2009). O Fusarium é comumente um fungo de campo e o principal gênero produtor de fumonisinas, que são as principais micotoxinas encontradas em milho (Hermanns et al., 2006; Maziero & Bersot, 2010). A ingestão de produtos contaminados com fumonisina pode causar sérios danos à saúde humana e animal, como leucoencefalomalácia em equinos, edemas pulmonares em suínos e câncer de esôfago em humanos (Jay, 2005). O presente trabalho tem como objetivo analisar a incidência de fumonisinas totais em amostras de milho armazenadas em paióis de produtores familiares da região central de Minas Gerais.    MATERIAL E MÉTODOS  As amostras de milho em espiga foram coletadas em seis propriedades familiares da região central de Minas Gerais, com o apoio de técnicos da EMATER – MG. As coletas foram feitas em quatro períodos ao longo do armazenamento (conforme Tabela 1). Para detecção e quantificação das fumonisinas totais foram retiradas duas amostras de cada paiol, seguindo-se o procedimento: 1- Foram retirados ao acaso, dos quatro cantos e do centro do paiol dois sacos de espigas (aproximadamente 150 espigas em cada). 2- As espigas foram debulhadas e os grãos, homogeneizados manualmente. 3- Duas amostras de 1kg foram coletadas, as quais  corresponderam às repetições.  Para homogeneização do teor de água as amostras foram colocadas em estufa a 65 °C, até peso constante, e após o resfriamento foram moídas em moinho marca Trapp – modelo TRF 90. As fumonisinas totais foram extraídas em solução metanol : água (80/20) e purificadas em colunas de imunoafinidades FumoniTest®, de acordo com a metodologia recomendada pela VICAM. A quantificação dos teores dessa micotoxina foi feita em Fluorímetro (VICAM) série 4.   Delineamento e análise estatística Os resultados foram avaliados por análise de variância e as médias, comparadas pelo Teste de Tukey em nível de 5% de probabilidade.  RESULTADOS E DISCUSSÃO  Houve interação significativa entre o local e a época de coleta (Tabelas 2 e 3). Verificou-se que todas as amostras analisadas encontravam-se contaminadas por fumonisinas, com níveis variando de 30 a 4.650 µg kg -1. Apesar de terem sido encontradas amostras com altos níveis de contaminação, nenhuma delas se apresentou acima do limite de 5.000 µg kg -1 estabelecido pela ANVISA (2011). Porém, de acordo com a União Europeia, o limite dessa micotoxina para consumo humano é de 1.000 µg kg-1 (Comission..., 2007). Dessa forma, a ingestão de grãos contaminados com níveis acima desse pode causar riscos à saúde. Queiroz et al. (2012) analisaram amostras de milho de paióis de 10 propriedades rurais em quatro épocas de coleta, na região central de Minas Gerais, e constataram altos teores de fumonisinas, com média total de 2.339 µg kg -1, resultado superior ao analisado nesse trabalho cuja média dos teores foi de 1.547 µg kg-1. Tais diferenças podem ser devidas aos tipos de paióis, época de colheita, condições climáticas e cultivar de milho diferentes em ambos estudos. Rodríguez-Amaya & Sabino (2002) fizeram uma revisão bibliográfica sobre a presença de micotoxinas em milho e produtos à base de milho, e encontraram alta incidência e elevados níveis de fumonisinas, corroborando com os resultados deste trabalho quanto à incidência, mas diferindo quanto aos níveis encontrados. Segundo LAMIC (2011), das 26.291 amostras de milho analisadas no período de 1991 a 2011, 76,3% apresentaram presença de fumonisinas com contaminação média de 1.910 µg kg -1 valor que se aproxima do apresentado neste trabalho.   CONCLUSÕES  Embora os resultados desse trabalho apontem para teores de fumonisinas totais abaixo do estabelecido pela legislação brasileira atual, é de grande importância a continuidade de estudos nessa área, visto ser essa micotoxina altamente tóxica e o milho, um cereal muito utilizado na alimentação humana e animal.  AGRADECIMENTOS  Embrapa Milho e Sorgo; UENF; FAPERJ.    REFERÊNCIAS  ANVISA. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução n° 7, de 2011. Dispõe sobre limites máximos tolerados (LMT) para micotoxinas em alimentos. Diário Oficial [da] República Federativa do Brasil, Brasília, DF, 18 fev. 2011. Seção1, p. 66.  COMMISSION  REGULATION  (EC)  No.  1126/2007  of  28  September  2007  amending  Regulation 209 (EC) No. 1881/2006 setting maximum levels for certain contaminants in foodstuffs as regards 210 Fusarium  toxins  in maize and maize products. Official Journal of the European Union, p. 211, 2007. L255/14-L255/17.  DUARTE, R. P.; JULIATTI, F. C.; LUCAS, B. V.; FREITAS, P. T. Comportamento de diferentes genótipos de milho com aplicação foliar de fungicida quanto à incidência de fungos causadores de grãos ardidos. Bioscience Journal, Uberlândia, v. 25, n. 4, p. 112-122, 2009. HERMANNS, G.; PINTO, F. T.; KITAZAWA, S. E.; NOLL, I. B. Fungos e fumonisinas no período pré-colheita do milho. Ciência e Tecnologia de Alimento, Campinas, v. 26, n. 1, p. 7-10, 2006. JAY, J. M. Microbiologia de alimentos. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2005. 711 p. LAMIC. Laboratório de Análises Micotoxicológicas, Tabelas de resultados 2011. Santa Maria: Universidade Federal de Santa Maria, 2011. Disponível em: <http://www.lamic.ufsm.br>. Acesso em: 12 maio 2014. MARQUES, O. J.; VIDIGAL FILHO, P. S.; DALPASQUALE, V. A.; SCAPIM, C. A.; PRICINOTTO, L. F.; MACHINSKI JÚNIOR, M. Incidência fúngica e contaminações por micotoxinass em grãos de híbridos comerciais de milho em função da umidade de colheita. Acta Scientiarum. Agronomy, Maringá, v. 31, n. 4, p.667-675, 2009. MAZIERO, M. T.; BERSOT, L. S. Micotoxinas em alimentos produzidos no Brasil. Revista Brasileira de Produtos Agroindustriais, Campina Grande, v. 12, n. 1, p. 89-99, 2010. NASCIMENTO, V. R. G.; QUEIROZ, M. R.; MARCHI, V. C.; AGUIAR, R. H. Desempenho de estratégias de aeração de milho armazenado: Fungos e condutividade elétrica. Revista Brasileira de Engenharia Agrícola e Ambiental, Campina Grande, v. 16, n. 1, p. 113-121, 2012. QUEIROZ, V. A. V.; ALVES, G. L. O.; FERREIRA, P.; CONCEIÇÃO, R. R. P.; GUIMARÃES, L. J. M.; MENDES, S. M.; RIBEIRO, P. E. A; COSTA, R. V. Occurrence of fumonisins and zearalenone in maize stored in family farm in Minas Gerais, Brazil. Food Control, Guildford, v. 28, p. 83-86, 2012.  RODRÍGUEZ-AMAYA, D. B.; SABINO, M. Mycotoxin  research  in  Brazil:  the  last decade  in review. Brazil Journal Microbiology, v. 33, p. 1-11, 2002. SILVA, R. R.; THEODORO, G. F.; LIBÓRIO, C. B.; PESSOA, L. G. A. Influência da densidade de cultivo de dois genótipos de milho na severidade da mancha de cercospora e no rendimento de grãos na ‘safrinha’. Semina: Ciências Agrárias, Londrina, v.33, n.4, p. 1449-1454, 2012. STEFANELLO, J.; BACHI, L. M. A.; GAVASSONI, W. L.; HIRATA, L. M.; PONTIM, B. C. A. Incidência de fungos em grãos de milho em função de diferentes épocas de aplicação foliar de fungicida. Pesquisa Agropecuária Tropical, Goiânia, v.42, n.4, p. 476-481, 2012.         Tabela 1 – Produtor, local e data de realização das coletas. Produtor Local Data da coleta 1ª 2ª 3ª 4ª 1 Inhaúma 11/6/2013 17/9/2013 26/11/2013 * 2 Inhaúma 11/6/2013 17/9/2013 26/11/2013 28/1/2014 3 Fortuna de Minas 3/7/2013 19/9/2013 28/11/2013 28/1/2014 4 Funilândia 9/7/2013 20/9/2013 26/11/2013 30/1/2014 5 Funilândia 9/7/2013 20/9/2013 26/11/2013 30/1/2014 6 Sete Lagoas 19/7/2013 19/9/2013 28/11/2013 29/1/2014 * Amostra indisponível  Tabela 2 – ANOVA dos teores de fumonisinas totais em milho em função do produtor e da época de coleta. *Significativo em nível de 5% de probabilidade.  Tabela 3 – Determinação de fumonisinas totais (µg kg -1) em milho armazenado em paióis de produtores rurais. Propriedade Fumonisinas Totais (µg kg -1 ) Coleta 1 2 3 4 1 490 ABab 870 Bab 150 Aa *   2 2800 Bc 1600 Ac 2500 Bc 1150 Ab 3 1030 BCb 650 ABa 1350 Cb 30 Aa 4 2500 Cc 4650 De 1050 Ab 1750 Bb 5 120 Aa 1400 Bbc 220 Aa 170 Aa 6 2250 Ac 2500 Ad 3700 Bd 2650 Ac Valores seguidos de mesma letra maiúscula na linha ou minúscula na coluna não diferem entre si em nível de 5% de probabilidade pelo teste de Tukey. * Amostra indisponível.    Fontes de variação GL Soma de Quadrados Quadrado médio F Sig. Produtor 5 41,528664 8,305733 168,326 0,0000*Coleta 3 3,504999 1,168333 23,678 0,0000*Produtor X coleta 14 21,826246 1,559018 31,595 0,0000*Resíduo 23 1,134892 0,049343   Total 45 67,994801       

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