O objetivo desse estudo foi identificar e validar genes de referência para análise de RTqPCR em arroz.Pôster - pós-graduação

ABREU, F. R. M.

BRONDANI, C.

VIANELLO, R. P.

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94 7º Seminário Jovens Talentos –Coletânea de Resumos...Identificação e validação de genes de referência para análise de RT-qPCR em arrozFernanda Raquel Martins Abreu1, Rosana Pereira Vianello2, Claudio Brondani3Genes responsáveis pela codificação de produtos diretamente relacionados às rotas metabólicas de mecanismos adaptativos em plantas de arroz (Oryza sativa L.) podem ser monitorados por PCR quantitativa ou PCR em tempo real precedida por transcrição reversa, RT-qPCR (Reverse Transcriptase-quantitative Polymerase Chain Reaction). A RT-qPCR é uma técnica que permite a detecção de determinado alvo de ácido nucléico de forma rápida, específica e altamente sensível, como a requerida para a quantificação da expressão gênica. O objetivo desse estudo foi identificar e validar genes de referência para análise de RT-qPCR em arroz. A normalização de dados para ensaios de RT-qPCR por meio de genes de referência é indispensável para a comparação das medições da expressão gênica em amostras de diferentes tecidos.  Ao todo foram avaliados 20 pares de primers de seis genes de referência, em amostras de tecidos de folha e raiz de arroz de oito genótipos de arroz. Por meio do programa System Sequence Detection foi possível identificar que os resultados mais consistentes quanto à estabilidade da quantificação da expressão gênica foram dos genes do Fator de Elongação de Eucariotos (eEF-1A) e da Actina. Doravante esses dois genes de referência serão utilizados para normalizar todos os estudos de expressão gênica em arroz, como por exemplo, para a quantificação dos genes utilizados para a geração de arroz geneticamente modificado para a tolerância à seca, projeto em andamento na Embrapa Arroz e Feijão. 1 Estudante de Pós-Graduação (Mestrado) em Genética e Melhoramento de Plantas, bolsista CAPES-EMBRAPA na Embrapa Arroz e Feijão, Santo Antônio de Goiás, GO, fernandaabreu@cnpaf.embrapa.br.2 Bióloga, Postdoc em Genética Molecular, pesquisadora da Embrapa Arroz e Feijão, Santo Antônio de Goiás, GO, rosana.vianello@embrapa.br.3 Engenheiro Agrônomo, Postdoc em Biologia Molecular,pesquisador da Embrapa Arroz e Feijão, Santo Antônio de Goiás, GO, claudio.brondani@embrapa.br. 

Identificação e validação de genes de referência para análise de RT-qPCR em arroz.

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