Cópia de trabalho editado em CD-ROM que contém os resumos expandidos do 42º Congresso Brasileiro de Olericultura e 11º Congresso Latino Americano de Horticultura, Uberlândia, 2002

CIRILLO, M.

CORRÊA, R. M.

LAMEIRA, O. A.

LIMA, P. S. G.

PINTO, J. E. B. P.

REIS, E. S.

SANTOS, J. B. dos

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Estabelecimento da concentração de nitrogênio total no meio de cultura para micropropagação de ipeca, Psychotria ipecacuanha (brot.) Stokes.

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~, ,/LIMA, P.S.G.; REIS, E,S.; CORRÊA, R.M.; CIRILLO, M.; PINTO, JEB.P.; SANTOS, J.B.; LAMEIRA, OAEstabelecimento da concentração de nitrogênio total no meio de cultura para micropropagação de ipeca,Psychotria ipecacuanha (brot.) Stokes. Horticultura Brasileira, v.20,n.2, julho 2002. Suplemento2.Estabelecimento da concentração de nitrogênio total no meio de culturapara micropropagação de ipeca, Psychotria ipecacuanha (brot.) Stokes.Patricia Schober G. Lima1; Érika S. Reis1; Ricardo M.Corrêa1; Marcelo Cirillo 1; JoséEduardo B. P. Pinto1; João B. dos Santos1; Osmar A. Lameira21Universidade Federal de Lavras (UFLA) - Depto de Agricultura (DAG) - Setor de Plantas Medicinais, CP.37,Lavras - MG, CEP 37200-000,E-mail: patriciaschober@hotmail.com.jeduardo@ufla.com.br;2 Embrapa - PA;RESUMOA ipeca (Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes.) é reconhecida mundialmente como plantamedicinal. São produzidas em suas raízes a emetina e a cefalina, dois alcalóides de grandevalor farmacológico. Sendo nativa da Mata Atlântica e estando ameaçada por ter sofridointenso extrativismo e por ter suas áreas de ocorrência natural reduzidas no presente, a ipeca éuma espécie passível de se adequar a um sistema de cultivo economicamente viável. Atecnologia do cultivo in vitro constitui uma alternativa promissora para o suprimento constante ehomogêneo de material vegetal. Visando o estabelecimento de um meio de cultura adequadopara o cultivo in vitro de ipeca, foram testadas 6 variações (O; 7.5; 15; 30; 45 e 6ÕmM)daconcentração de nitrogênio total da solução original do meio MS suplementado ou não com 2mg/I de BAP. Verificou-se que a aplicação de 2mg/L de BAP possui um efeitosignificativamente positivo na produção de matéria seca, exceto na ausência de nitrogênio nomeio de cultura (dosagem de O mM de N total). Quanto as concentrações de nitrogênio, aaplicação de 30 mM apresentou maior efeito.Palavras-chave: Psychotria ipecacuanha (brot.) Stokes, regulador de crescimento,Benzilaminopurina (BAP), planta medicinal.ABSTRACTEstablishment of total nitrogen concentration on basic medium for micropropagation ofipecac, Psychotria ipecacuanha (brot.) stokes.The ipecac (Psychotria ípecacuanha (Brot.) Stokes.) is a worldwide recognized medicinal plant.In their roots are produced the emetin and cephaelin, two important alkaloids ofpharmacological value. This is a native specie of Mata Atlântica Forest threat for intenseextrativism and their reduced natural incident area at the present, the ipecac is a specie subjectto a viable economic cultivation system. The technology of in vitro cultivation is a promisingalternative to maintain a constant and uniform supply of vegetal material. Aimed theestablishment of an appropriate culture media for ipecac micropropagation, it was test 6variations (O;7.5; 15; 30; 45 e 6ÕmM).of nitrogen concentrations of original media MS solutionsupplemented or not, with 2 mg/L BAP. It was check that the 2mg/L of BAP application had apositive result, except in the absence of nitrogen in the culture media (OmM of N totalconcentration). As for nitrogen concentration, the 30 mM application presents the beUer results.Key words: Psychotria ipecacuanha (brot.) Stokes, growth regulator, Benzilaminepurine,medicinal plant.A ipeca (Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes.) é reconhecida mundialmente comoplanta medicinal. São produzidas em suas raízes dois alcalóides de grande valorfarmacológico: A emetina e a cefalina, que apresentam efeito emético considerável eexpectorante em doses atenuadas, utilizados no tratamento da amebíase e disenteriacorrespondente (SOUZA et aI., 1991).O sucesso de um sistema de micropropagação depende do controle de um grandenúmero de variáveis. Todos os componentes de um meio de cultura podem afetar amorfogênese in vitro, todavia recentemente, as atenções têm se voltado para o nitrogênio e,em especial, ao nitrogênio reduzido (AMMIRATO,1985). A suplementação do meio quanto asfontes nitrogenadas na maioria das vezes é através de íons NH+4e NO·3. (SATO,1994). Alémdisto, para cultura de tecidos os reguladores de crescimento são essenciais, as citocininas têmsido mostradas por causar inicio de brotação em muitas plantas. Dentre esta classe dereguladores de crescimento, o BAP (benzilaminopurina) tem se mostrado dos mais eficazes naação indutora de brotos.Através deste trabalho procurou-se estabelecer uma concentração adequada dasconcentrações de nitrogênio em meio de cultura MS para micropropagação de ipeca,Psychotria ipecacuanha (brot.) Stokes.MATERIAL E MÉTODOSO material utilizado constituiu-se de segmentos internodais provenientes de plantasobtidas a partir de cultura de gemas de raiz estabelecidas in vitro, no Laboratório de Cultura deTecidos Vegetais da Universidade Federal de Lavras (UFLA) utilizando-se o meio básico deMS (MURASHIGE e SKOOG, 1962) acrescido de 2mg/L de BAP (6-benzilaminopurina),alternado com meio básico MS acrescido de 0,5mg.L-1 de GA3 (ácido giberélico).Para testar a concentração de nitrogênio total no meio de cultura suplementado ou nãocom 2 mg/L de BAP, variaram-se as concentrações de nitrato de amônio e nitrato de potássioda solução original do MS conforme a Tabela 1Tabela 1. Concentração (mM) de N total com ou sem 2 mg/L de BAP nos diferentes tratamentos testados para ocultivo in vitro de ipeca.1-' .. .-Dosagens de Nitrogênio Total (_M)0.00 I 7.50 15.00 30.00 45.00 i 60.00Com BAP I,Tratamento1 Tratamento2 Tratamento3 Tratamento4 Tratamento5 ! Tratamento6(2mg/L)!i~mBAP_.--- .--_._. . I .~Tratamento7 Tratamento8 Tratamento9 Tratamento10 Tralamento11 I Tratamento12o meio de cultura básico utilizado fOI o de Murashiqe e Skoog, 1962 (MS), acrescido 6,0gll de Agar, com o pH ajustado para 5.8±1 e autoclavado por 20 minutos à uma temperatura de121°e à pressão de 1 atmosfera. As plântulas foram inoculadas em tubos de ensaio contendo30 ml de meio de cultura sob condições estéreis, e transferidas para a sala de crescimento comum fotoperíodo de 16 horas, temperatura de 26 ± 1°e, e intensidade luminosa de 1500 lux.As características avaliadas após 90 dias foram as seguintes: peso das matérias frescae seca da parte aérea juntamente com o explante primário e taxa de multiplicação. Odelineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com os tratamentosdispostos em um esquema fatorial 2 x 6 onde os fatores foram BAP e dosagens de nitrogênio,com 10 repetições, sendo 3 tubos de ensaio por repetição.Os dados obtidos foram submetidosà análise de variância, utilizando os níveis de significância de 5% para o teste de F.RESULTADOS E DISCUSSÃOVerificada as suposições do teste F foi feita uma análise de variância que mostrou a umnível de 5% de significância, que houve interação entre os fatores dosagens de nitrogênio eausência ou presença de BAP. Devido à interação ser significativa foi feito um desdobramentodos graus de liberdade para cada fator, visando investigar a influência da na aplicação ou nãode BAP na concentração de nitrogênio.Para a concentração de nitrogênio de O mM constatou-se que não há diferença napresença ou ausência de BAP, tanto na formação de matéria seca como na formação de brotoscomo pode ser verificado na tabela2.T b 12M' d' . t d od I . . d f t - d 'ta ea e Ias aius a as ao m e o para os ruveis o a ar concen raçao e ru roqeruo.Presença de BAP Ausência de BAPConcentrações Matéria seca i Taxa Multiplicação Matéria seca Taxa MultiplicaçãoNitroaênio (mM} I,0,0 1,4718 0,2 1,4591 0,1 I7,5 1,3988 ! 1,2 1,4997 0,43I 15,0 1,3886 I 1,26 1,4557 0,13.. ___ .30L..... ~.,3401 ! 2,26 1,4200, .0,70 !" " '-'''145,0 1,3325 , 2,83 1,4293 0,03,60 1,2816 ! 3,23 1,5040 0,04CV(%) = 6,340 OP=0.0897Já para as demais concentrações, verificou-se que na presença de BAP a formação debrotos foi maior do que na ausência do hormônio. Para concentração de 60 mM ocorreu napresença de BAP, a maior formação de brotos. No entanto, estes se mostraram poucovigorosos e pequenos apresentando apenas um indício de formação de folhas. Para asconcentrações de 30 mM e 45 mM, também na presença de SAP, os brotos formadosapresentaram-se bastante vigorosos com 1 a 2 pares de folhas e com 1 a 2,5 cm decomprimento. Para a concentração de 15 mM, os brotos formados apresentaram o mesmovigor que os brotos formados na presença de das concentrações de 30 e 45 mM de nitrogêniono entanto, a taxa de multiplicação foi menor. A concentração de 7,5 mM apresentoupraticamente o mesmo número de brotos que a concentração de 15 mM, mas os brotosapresentaram de 0,2 a O,5cmde comprimento e apenas indícios de folhas.Quanto à formação de matéria seca na presença de SAP, verificou-se que não houvemuita diferença entre as concentrações de 7,5 mM, 15 mM, 30 mM e 45 mM. Já concentraçãode 60 mM diferiu das demais, apresentando uma menor formação de matéria seca. Além disto,na presença de SAP as concentrações de 45 mM e 60 mM apresentaram um maior número deexplantes necrosados, o que influenciou no peso da matéria seca. Desta forma, constatou-seque na presença de SAP, o efeito das concentrações de nitrogênio foi melhor quando seutilizou até 30 mM.Na ausência de SAP, verificou-se um maior peso de matéria seca para todas asconcentrações de nitrogênio, entretanto quase não ocorreu a formação de brotos. Para asconcentrações de 7,5 mM, 15 mM e 60 mM a maior parte dos explantes se mostrouintumescida mas não emitiram brotos. Dentre os brotos formados, os que se desenvolveram napresença de 30 mM e 45 mM mostraram-se bastante vigorosos. Já os brotos formados napresença das demais concentrações de nitrogênio chegaram a apresentar apenas indícios daformação de folhas, e tamanho reduzido.Desta forma, o acréscimo de 2 mg/ L SAP quando se considera conjuntamente as duasvariáveis analisadas, mostrou efeito positivo na presença de todas as dosagens de nitrogênio,exceto para concentração de OmM. O tratamento contendo de 30 mM de nitrogênio associadaa aplicação de 2 mg/L de SAP apresentou as melhores respostas considerando-se tambémde forma conjunta as duas variáveis analisadas.LITERATURA CITADAAMMIRATO, p.v. Embryogenesis. In: EVANS, D.A; SHARP, W.R.; AMMIRATO, =.v. YAMADA (c/eds.)Handbook of plant cell culture. New York: Mcmillan publishing, 1985. v.1, p.83-123.SATO, A. Y. Propagação de gérbera de vaso através da cultura de tecidos. Lavras: UFLA, 1994.95p.(Dissertação).SOUZA,M.P.; MATOS, M.E.O.; MATOS, F.JA Constituintes químicos ativos de plantas medicinaisbrasileiras. Fortaleza: EUFC, 1991. 416p.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/406322/1/5449.pdf

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