BENBADIS, A. K.

LAMEIRA, O. A.

LEDO, A. da S.

MOURA, E. F.

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8-005Efeito da adição de água de coco em culturas de calos de cupuaçuzeiro (Theobromagrandiflorum (Willd. ex Spreng.) Schum.)Ana da Silva LEDOl; Osmar Alves LAMElRA2; Abdellatif K. BENBADIS3; Elisa FerreiraMOURA2lEmbrapa Acre, caixa postal 392, CEP 69901-180, Rio Branco-ÀC, E-mail: analedo!lluoLcombr;2Embrapa Amazônia Oriental, caixa postal 48, CEP 66017-970, Belém-PA; 3Universidade Federaldo Ceará, Campus do PICI, Departamento de Fitotecnia, CEP 60020-181, Fortaleza-CE.IntroduçãoO aumento do potencial de exploração sócio econômica de espécies frutíferas nativas daregrao Amazônica tem sido crescente nos últimos anos. Dentre diversas espécies destaca-se ocupuaçuzeiro (Theobroma grandiflorum (Willd. ex Spreng.) Schum.), tendo em vista as diferentespossibilidades de uso e o grande potencial de comercialização de produtos e subprodutos nomercado nacional e internacional. Entretanto, a utilização de técnicas de propagação inadequadas ea ausência de material genético melhorado, têm contribuído negativamente para a exploraçãoracional e econômica desta espécie.Informações sobre a propagação in vitro de cupuaçuzeiro são bastante escassas. Os estudostem sido, quase que exclusivamente, direcionados para o cacau (Theobroma cacao L.), queapresenta grande impacto econômico no mercado internacional. O cacau tem apresentado uma certarecalcitrância para a multiplicação por embriogênese somática.Alguns trabalhos tem demonstrado a capacidade de indução de embriogênese somáticaindireta, a partir de diversos explantes, com a adição de água de coco no meio de cultura. Janick eWhipkey (1988) obtiveram a produção de calos embriogênicos a partir de embriões zigóticosimaturos de cupuaçuzeiro cultivados em meio MS suplementado com 10 % de água de coco e 1rng.L" de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-0). Li et aI. (1998) e Marbach e Teixeira (1999)obtiveram a regeneração de plântulas de cacau, a partir de calos embriogênicos induzidos deestaminóides cultivados em meio OKW com 5% de água de coco, suplementado com 2,4-0 napresença ou ausência de tidiazuron (TOZ), respectivamente.O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da adição de á~o no meio decultura secundário sobre calos friáveis iniciados a partir de vários explantes de cupuaçuzeiro.MetodologiaAs culturas de calos friáveis iniciadas a partir de eixos embrionários e segmentos [aliares ecaulinaresem meioprimário ou indutor, foram repicadaspara meio secundário com o objetivode induzirainiciaçãode estruturaspró-embriogenéticase de embriõessomáticos.As culturas foram inoculadas em erlenmeyers com capacidade de 100 ml, contendo 40 mlde meio de cultura MS (Murashige e Skoog, 1962) com 0,7 % de ágar e 2 % de glicose. Foramtestados os seguintes tratamentos: meio MS; meio MS + água de coco (AC); meio MS + AC + 2,69~M de ácido naftalenoacético-ANA + 12,30 -.M de isopenteniladenina-2iP; meio MS +AC + 5,37~.lMde ANA + 12,30 -.M de 2iP; meio MS+ AC + 8,06 J.1Mde ANA + 12,30.M de 2iP e meioAS + AC + 10,74 J.1Mde ANA + 12,30 -.M de 2iP. A água de coco foi adicionada aos meios na.oncentração de 100mI.L-1•....As culturas foram mantidas em sala de crescimento com temperatura variando de 26· ± z'c,umidade relativa do ar média em tomo de 70%, sob fotoperiodo de 16 horas de luz branca friaindireta(6 umol.mi.s" de irradiância) / oito horas de escuro.O delineamento estatistico utilizado foi o inteiramente casualizado, com seis tratamentos equatro repetições, sendo cada unidade experimental constituída de cinco frascos contendo umexplante cada.Resultados e DiscussãoNão foram observadas até os 120 dias de inoculação, a indução de calos embriogênicos nosdiferentes tratamentos testados. Entretanto, aos 10 dias de cultura, verificou-se o rápido crescimentodos calos com aspecto friável e de coloração verde clara.'Nas culturas iniciadas a partir de eixos embrionários houve maior percentagem deprogressão dos calos, nos diferentes tratamentos testados, quando comparados com segmentoscaulinares e segmentos de folhas jovens (Tabela 1).Não foi verificado o crescimento dos calos friáveis em meio MS na ausência de água decoco e de reguladores de crescimento, ocorrendo um rápido escurecimento das culturas. Emcontrapartida, nos eixos embrionários, na presença de água de coco, houve a progressão dos calos,sendo potencializada em meio suplementado com ANA e 2iP (Tabela 1). Resultados semelhantesforam obtidos por Pence et aI. (1979), que observaram o aumento do crescimento de calos deTheobroma cacao L. em meio MS suplementado com 10 % de água de coco. O efeito estimulatórioda água de coco pode ser explicado pelo fato deste aditivo ser rico em glicose e frutose, saisminerais, mio-inositol, citocininas, bem como nucleotideos e outros compostos orgânicos.TABELA 1. Respostas morfogenéticas de calos friáveis iniciados em meio primário a partir deeixos embrionários, segmentos de folhas jovens e segmentos caulinares de Theobromagrandiflorum, cultivados em meio secundário MS suplementado com água de coco(AC); 2iP e diferentes concentrações de ANA, aos 30 dias de cultura. EmbrapaAmazônia Oriental, Belém-P A, 2001Eixos Segmentos de Segmentos caulinaresembrionários folha jovemTratamentos% de explantes com calo friávelMS O O OMS+AC 26,5 O OMS + AC + 2,69 -.M ANA + 12,30 -.M 50,0 37,5 O2iP\ltS + AC + 5,37 -.M ANA + 12,30 -.M 62,0 33,3 O~iP,1S+ AC + 8,06 -.M ANA + 12,30 -.M 44,4 12.5 OjpIS + AC + 10,74 -.M ANA + 12.30 ~ 43,0 O 37,5:P..Para os eixos embrionários, apesar de não terem sido detectadas diferenças significativasentre os níveis de ANA, uma maior percentagem de progressão de calos friáveis foi observada com5,37 -.M de ANA (62 %), havendo uma tendência a redução na frequência de calos com o aumentoda concentração de ANA (Tabela 1).ConclusõesA adição de água de coco, 2iP t: ANA no meio secundário promove o rápido crescimento eprogressão de calos friáveis em culturas de eixo embrionário de segmento cauIinar e de segmentosde folhas jovens, mas não induz culturas embriogenéticas.Referências bibliográficasJANICK, J.~WHIPKEY, A. Somatic embryogenesis in Theobroma grandiflorum. HortScience,AIexandria, Virginia, v.23, p.807, 1988.LI, Z.1.~TRAORE, A.~MAXIMOVA, S. et aI. Somatic embryogenesis and pIant regeneration fromfloral explants of cacao (Theobroma cacao L.) using thidiazuron, ln Vltro CeUular andDevelopmental Biology Plant, Oxon, United Kingdom , v.34, nA, p.293-299, Oct.-Dec. 1998.MARBACH, P.A.S.~TElXElRA, 1.B. Regeneração de plantas de cacau (Theobroma cacao L.) viaembriogênese somática. Revista Brasileira de Fisiologia Vegetal, Brasília, v.II (supl.), p.I68-169, jun.I999.MURASHIGE, T.~ SKOOG, F. A. revised medium for rapid growth and bioassays with tobaccotissue cultures. Physiologia Plantarum, Copenhagen, v.I5, n.3, pA73-497, Mar. 1962.PENCE, v.c., HASEGAWA, P.M.~ JANICK, J. Asexual embryogenesis in Theobroma cacao L.Journal of the American Society for Horticultural Seienee, Geneva, New York, v.I04, n.2,p.I45-148,1979.

Efeito da adição de água de coco em culturas de calos de cupuaçuzeiro (Theobroma grandiflorum (Willd. ex Spreng.) Schum.).

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