ANCIUTI, M. A.

BECK, T. B.

BONGALHARDO, D. C.

CONTREIRAS, C. L.

FARINA, G.

OLIVEIRA, C. O.

SCHAFHAUSER JUNIOR, J.

TAVARES, A. T.

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Influência de dietas com diferentes níveis de arroz integral sem casca sobre o teste de penetração espermática *TB Beck2, CO de Oliveira3, AT Tavares3,GFarina3 , CL Contreiras4, MA Anciuti5, J Shafhaüser6, DCBongalhardo7  1Parte da dissertação de mestrado do primeiro autor. 2Mestranda Programa de Pós-Graduação em Zootecnia–UFPel, Rio Grande do Sul, Brasil, Bolsista CAPES. E-mail: tamiris_beck@hotmail.com 3Graduandos em Zootecnia da UFPel, Rio Grande do Sul, Brasil. 4Mestranda Programa de Pós-Graduação em Zootecnia –UFPel, Rio Grande do Sul, Brasil 5Professor Adjunto – IFSul, Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil. 6Pesquisador da Embrapa Clima Temperado, Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil. 7Prof. Associada – UFPel, Rio Grande do Sul, Brasil  Abstract: The objective of this work was to evaluate the effects of replacing corn with brown rice (hulled rice) in the sperm penetration test. Twenty four broiler breeders housed in Campus Pelotas – Visconde da Graça – CAVG/IFSul experimental aviary were used. A completely random design was used, with four treatments and five repetitions; each rooster was an experimental unity (six by treatment). Diets had the same brute protein (17.5%) and energy (2850 kcal/kg) content, differing only in corn and brown rice amounts: T1 – 100% corn and 0% rice (control); T2 – 67% corn and 33% rice; T3 – 33% corn and 67% rice, and T4 – 0% corn and 100% rice. Five collections were made (from 77 to 81 weeks of age), one by week, using dorso-abdominal massage. Inner perivitelline layers from fresh eggs were isolated, incubated with semen in water-bath, stained with eosin-nigrosin, and photographed under microscope. Holes were counted later, and penetration capacity was expressed as number of sperm holes by mm3. Statistical analyses and media comparisons were made by Kruskal-Wallis One-Way ANOVA, for non-parametric data, using the Analytical Software Statistix9. Treatments were not significantly different (p>0.05) in sperm penetration capacity. Broiler breeders can be fed with diets containing brown rice in replacement of corn, at 33%, 67%, or 100% levels, without altering penetration capacity, and probably without affecting fertility.   Introdução A disponibilidade do milho, que é um dos principais componentes energéticos utilizados na alimentação de aves, é diminuída pela sua utilização crescente na produção de biocombustíveis e pelo consumo do mesmo na alimentação humana.Além disso, com a grande estiagem que ocorreu nos EUA em 2012, houve um aumento nos preços dos principais insumos, sendo o milho um deles, causando reflexos graves nos custos da produção avícola, gerando uma crise na avicultura brasileira. No entanto, é importante a busca alimentos alternativos a serem incorporados à ração, que sejam economicamente viáveis e atendam às necessidades das aves. O arroz é uma opção de ingrediente alternativo quando sua produção estiver em alta, já que os grãos são descartados pelo mercado quando não apresentam características de cozimento, integridade e translucidez. Estes grãos não apresentam alterações no seu valor nutritivo e podem ser utilizados na alimentação animal. A modificação ou substituição de ingredientes da dieta podem alterar características do sêmen, como por exemplo, a proporção de ácidos graxos na fertilidade (Kelso et al., 2006) membrana espermática podendo alterar a . O arroz integral é rico em ácidos graxos. O seu perfil de ácido linolênico (0,6mg/g) e ácido linoléico (0,1mg/g) (Gomes, 2008), é muito inferior ao encontrado no milho, 330mg/g de ácido linoléico e 4mg/g de linolênico (Rostagno, 2011). A fertilização depende da capacidade dos espermatozoides de penetrar na membrana perivitelina interna do ovo, é medida pelo número de furospresentes na membrana(Robertson et al., 1997). O teste de penetração espermática é o mais completo e que melhor representa o que acontece in vivo na reprodução animal, pois engloba a maioria dos parâmetros utilizados nas análises seminais. Para que ocorra a perfuração da camada perivitelina interna, o sêmen deve apresentar bons resultados nos parâmetros mencionados anteriormente, para manter sua capacidade fecundante. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da substituição do milho por arroz integral sem casca na capacidade de penetração espermática de galos pesados.  Material e Métodos Foram utilizados 24 machos pesados, com idade inicial de 77 semanas, alojados em boxes individuais localizadas no aviário experimental do Campus Pelotas - Visconde da Graça – CAVG/IFSul. Os animais foram tratados diariamente, com fornecimento de ração e água individual e ad libitum. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos (seis galos por tratamento) e cinco repetições (77, 78, 79, 80, 81 semanas). Cada galo foi considerado uma unidade experimental. Os 24 galos foram distribuídos aleatoriamente nos quatro tratamentos e receberam a dieta experimental por 7 semanas, o sêmen começou a ser analisando após duas semanas recebendo as dietas, totalizando 5 semanas de análises. O nível de proteína bruta da dieta foi de 17,5% e o de energia, de 2850 kcal/kg. Os tratamentos tinham a mesma composição, exceto pelo milho, que foi substituído por arroz integral sem casca em níveis crescentes: T0%: 100% milho e 0% arroz (controle); T33%: 67% milho e 33% arroz, T67%: 33% milho e 67% arroz e T100%: 0% milho e 100% arroz. O período das coletas foi de 5 semanas. O sêmen foi coletado através de massagem dorso-abdominal. O teste de penetração espermática foi realizado de acordo com Robertson &Wishart (1997). A membrana perivitelina interna (IPVL) foi separada da membrana perivitelina externa por hidrólise ácida. Após separação, a IPVL foi cortada em quadrados de aproximadamente 0,5 x 0,5 cm e cada quadrado foi incubado, em banho-maria com agitação a 40ºC, por 5 minutos com sêmenna concentração final 1,25 x 107. As membranas foram lavadas, com solução salina, para remoção dos espermatozoides. Logo após, foram esticadas em lâminas identificadas, coradas com eosina-nigrosina e fotografadas ao microscópio. A contagem de furos foi feita posteriormente e a capacidade de penetração expressa como número de buracos por mm2.A análise estatística foi realizada pelo programa estatístico Analytical Software Statistix9. Os dados não apresentarem distribuição normal após a transformação (raiz quadrada), por isso a comparação de médias foi realizada pelo método Kruskal-Wallis One-Way, para dados não paramétricos.  Resultados e Discussão A capacidade de penetração espermática, medida pelo teste de penetração da membrana perivitelina, não foi influenciada significativamente (p>0,05) pelos quatros diferentes níveis de substituição do milho pelo arroz integral sem casca, 0%, 33%, 67%, 100%, nas cinco semanas estudadas, conforme apresentaa Tabela 1.   Os ácidos graxos poliinsaturados precisam ser fornecidos na ração, por serem considerados essenciais, já que o organismo das aves não é capaz de sintetizá-los. Estes tem importância fisiológica para os espermatozoides, pois podem elevar a aptidão à sobrevivência no aparelho reprodutivo da fêmea. Os ácidos graxossão constituintes dos fosfolipídios da membrana biológica dos espermatozoides. Quando a quantidade de ácidos graxos poliinsaturados presente nos espermatozoides é diminuída, a motilidade e capacidade fertilizante que consequentemente também será reduzida (Kelso et al., 1996).  Os principais ácidos graxos poliinsaturados que afetam na reprodução são os ácidos graxos docosahexanoico (C22:4w6), DHA, e eicosapentanoico (C22:5w3), EPA,que tem como precursor o ácido graxo linolênico (C18:3 w3). Apesar da composição do milho e do arroz serem distintas, quanto aos valores de ácido graxo linoleico, no milho 330mg e no arroz 0,1mg; e linolênico, no milho 4mg e arroz0,6. Esta diferença não surtou efeito sobre o teste de penetração espermática poiso ácido graxo precursor do DHA e EPA não chegou a ser convertidos o bastante. Diferente do que foi relatado por Kelso. (1997), que ao suplementar com o ácido linolênico, observou um aumento na fertilidade do sêmen de 83 para 97%, nas idades de 39 e 54 semanas.   Tabela 1 – Médias e erro padrão do teste de penetração espermática interna(esp/mm²) em cinco diferentes semanas avaliadas sobre os tratamentos de 0%, 33%, 67% e 100% de substituição do milho pelo arroz integral sem casca. Tratamentos   Idade (Semanas)    77 Semanas 78 Semanas 79 Semanas 80 Semanas 81 Semanas T0% 117,2 ± 83,0 35,0 ± 18,1 08,2 ± 08,2 881,0 ± 861,6 59,0 ± 19,1 T33% 93,1 ± 35,0 337,0 ± 253,0 86,0 ± 46,0 14,3 ± 01,4 61,7 ± 12,9 T67% 58,7 ± 18,8 138,0 ± 96,9 25,6 ± 16,0 22,0 ± 05,0 44,5 ± 05,3 T100% 17,2 ± 10,1 32,00 ± 09,0 16,6 ± 16,6 12,3 ± 06,2 59,3 ± 21,9  Conclusão Pode-se considerar que, dentro das condições em que foi realizado este experimento, a substituição do milho pelo arroz integral sem casca, em 33%, 67% e 100%, nas idades entre 70 e 74 semanas, não influenciou significativamente (p>0,05) a capacidade de penetração espermática. Sendo assim, as dietas dos machos podem conter estes níveis de substituição sem que altere a fertilidade do sêmen.  Referências bibliográficas GOMES, M. A. B. Ácidos Graxos Essenciais Ω-3 - (AAL) Ácido α Linolênico 18:3(n−3), (EPA) Ácido Eicosapentaenóico 20:5(n−3)  e (DHA) Ácido Docosahexaenóico 22:6(n−3). Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Universidade Estadual de Maringá.  Maringá/Paraná, Abril 2008. KELSO, K.A. et al. Lipid and antioxidant changes in semen of broiler fowl from 25 to 60 weeks of age. J. Reprod. Fert., v. 106, p. 201-206, 1996. KELSO, K.A. et al. Effects of dietary supplementation with a-linolenic acid on the phospholipid fatty acid composition and quality of spermatozoa in cockerel from 24 to 72 weeks of age. J. Reprod. Fert., v. 110, n. 1, p. 53-59, 1997. ROBERTSON, L; BROWN, H. L; STAINES, H. J; WISHART, G. J. Characterization and application of an avian in vitro spermatozoa-egg interaction assay using the inner perivitelline layer from laid chicken eggs. J. Reprod. Fertil, 110:205–211, 1997. ROSTAGNO, H. S.; ALBINO, L. F. T.; DONZELE, J. L.; GOMES, P. C.; OLIVEIRA, R.F.; LOPES, D. C.; FERREIRA, A. S.; BARRETO, S. L. T.; EUCLIDES, R. F. Composição de alimentos e exigências nutricionais de aves e suínos. Tabelas Brasileiras. 252 p. Viçosa: Universitárias, 2011 STATISTIX 9.0, Analytical Software, PO Box 12185, Tallahassee FL 32317.USA, 2008. 

Influência de dietas com diferentes níveis de arroz integral sem casca sobre o teste de penetração espermática.

Influência de dietas com diferentes níveis de arroz integral sem casca sobre o teste de penetração espermática.

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