DONINI, L. P.

DUTRA, L. F.

MAYER, K. C. de A.

SILVA, N. D. G. da

SILVA, S. D. dos A. e

VITÓRIA, J. M.

ZACARIAS, F. M.

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa

ENRAIZAMENTO IN VITRO DE CANA-DE-AÇÚCAR EM FUNÇÃO DE SACAROSE, SUBSTRATO E VEDAÇÃO DOS FRASCOSFernanda Medeiros Zacarias1, Lorena Pastorini Donini 2, Kerlley Cristina de Assis Mayer 3; Natália Dias Gomes da Silva4; Josiane Mendonça Vitória 5; Leonardo Ferreira Dutra 6; Sérgio Delmar dos Anjos e Silva7INTRODUÇÃOA  técnica  de  propagação  da  cana-de-açúcar  (Saccharum  officinarum L.)  por  meio  de meristema apical é uma alternativa vantajosa para a multiplicação de diversas variedades, devido à economia  de tempo em relação às técnicas  convencionais,  além da obtenção de mudas de alta qualidade fitossanitária e geneticamente idênticas ao material de origem (VIEIRA et al., 2009). A fase de enraizamento é realizada em um meio propício à indução de raízes, preparando as mudas para o transplante das condições de laboratório para o ambiente em casa de vegetação e campo (HARTMANN et al., 1997). O tipo de vedação utilizado no frasco de cultura é um fator que irá determinar a qualidade do microambiente dentro dos frascos através das trocas gasosas com o ambiente externo, sendo outro fator de estudo no cultivo in vitro. As tampas plásticas são as mais utilizadas, mas papel alumínio e algodão são alternativas  a serem utilizadas  proporcionando maiores  trocas gasosas com o meio ambiente. Além disso, a sacarose, utilizada em diferentes concentrações no meio, é fonte de energia indispensável para a rizogênese, sendo que a redução da concentração pode ser favorável na fase de indução (GRATTAPLAGLIA; MACHADO, 1998).O solidificante do meio de cultura também é um dos fatores que podem afetar na etapa de enraizamento. Substratos inertes como vermiculita e perlita, embebidos com meio líquido, podem ser alternativas mais baratas do que o ágar (GRATTAPLAGLIA; MACHADO, 1998).Este  trabalho  teve  como  objetivo  avaliar  o  enraizamento  de  cana-de-açúcar  variedade RB855156 em meio de cultura com diferentes concentrações de sacarose, substrato e vedação dos frascos.1 Acadêmica do Curso de Gestão Ambiental/ UFPel. E-mail: fernanda_zacarias@hotmail.com2 Drª. Bolsista de Desenvolvimento Tecnológico Industrial do CNPq - Nível 1. E-mail: lorenadonini@yahoo.com.br3 Msc. Bolsista de Desenvolvimento Tecnológico Industrial do CNPq - Nível 3. E-mail: kerlleyca@hotmail.com 4 Mestranda do Programa de Pós-Graduação em Fisiologia Vegetal, UFPel. E-mail: nataliadiasgomes@hotmail.com5 Mestranda do Programa de Pós-Graduação em Fisiologia Vegetal, UFPel. E-mail: josiane_mendonça@hotmail.com6 Eng. Agr. Dr. Pesquisador Embrapa Clima Temperado. E-mail: leonardo.dutra@cpact.embrapa.br 7 Eng. Agr. Dr. Pesquisador Embrapa Clima Temperado. E-mail: sergio.anjos@cpact.embrapa.brMATERIAL E MÉTODOSForam utilizadas  brotações  de  cana-de-açúcar  variedade  RB855156,  oriundas  de  plantas estabelecidas in vitro, para a realização de dois experimentos de enraizamento in vitro.Experimento 1Os tratamentos  consistiram em diferentes  tipos  de  vedação  dos  frascos  (algodão,  papel alumínio e filme plástico)  e substratos de sustentação durante o enraizamento in vitro (ágar ou vermiculita), totalizando seis tratamentos.Os explantes foram inoculados, de acordo com os tratamentos, em erlenmeyer de 250 mL contendo meio de cultura  MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962). O pH foi ajustado para 6,2 e os frascos foram autoclavados a 121ºC e 1,5 atm por 20 minutos. A quantidade de ágar utilizada foi de 7,5 g L-1 e 15 gramas de vermiculita por frasco, a quantidade de meio de cultura utilizado foi de 50 mL por  erlenmeyer.  Os frascos  contendo os explantes  foram mantidos  em sala  de crescimento (25±2°C) fotoperíodo de 16 horas e densidade de fluxo de fótons de 27 µmol m-2 s-1.  Aos 30 dias, o material foi avaliado quanto ao comprimento médio da maior raiz e quanto ao desenvolvimento das raízes (Figura 1), onde foram atribuídas notas de 0 a 4 (0= sem raiz, 1= 1 a 2 raízes, 2= poucas, 3=  médias e 4= muitas raízes).Figura  1.  Notas  atribuídas  ao desenvolvimento  in  vitro  das  raízes  de cana-de-açúcar em meio com diferentes tipos de vedação, substratos e sacarose. Foto: Lorena Pastorini DoniniO  delineamento  experimental  foi  inteiramente  casualizado  em  arranjo  fatorial,  com  5 repetições contendo 5 explantes cada. Os dados foram submetidos à análise de variância, analisados no programa Sisvar  (FERREIRA,  2003) e  as  médias  foram comparadas  pelo  teste  de Tukey e regressão quando necessário.Experimento 2Os tratamentos consistiram em diferentes concentrações de sacarose (0, 15, 30 ou 45 g L-1) e substratos de sustentação durante o enraizamento in vitro (ágar ou vermiculita),  totalizando oito tratamentos.  Os explantes foram inoculados, de acordo com os tratamentos, em erlenmeyer de 250 mL contendo meio de cultura MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962). O pH foi ajustado para 6,2 e os frascos foram autoclavados a 121ºC e 1,5 atm por 20 minutos. A quantidade de ágar utilizada foi de 7,5  g  L-1 e  15  gramas  de  vermiculita  por  frasco.  A  manutenção  dos  frascos,  avaliação  e delineamento experimental foram realizados de acordo com o experimento anterior. RESULTADOS E DISCUSSÃOExperimento 1Para comprimento médio da maior raiz e desenvolvimento das raízes, houve interação entre os fatores vedação e substrato. As maiores médias para comprimento de raiz foram obtidas quando se utilizou filme plástico e substrato vermiculita,  não diferindo de quando foi utilizado algodão como  vedação  nesse  mesmo  substrato.  Para  o  substrato  ágar,  não  houve  diferenças  quando combinado com algodão e papel alumínio como vedação (Tabela 1). Na variável desenvolvimento das raízes, não houve diferença para vedação quando se utilizou o ágar, já para vermiculita,  os melhores resultados foram com a utilização de filme plástico e papel alumínio (Tabela 1).Tabela 1. Comprimento médio da maior raiz e aspecto das raízes de cana-de-açúcar cultivadas em meio com diferentes substratos e vedação do frasco. Embrapa Clima Temperado, Pelotas, RS, 2011.Variável Vedação SubstratoÁgar VermiculitaComprimento médio da maior raiz (cm)Algodão 4,37 a A 4,40 ab A Papel alumínio 4,09 a A 4,15 b AFilme plástico 2,98 b B 5,25 a ADesenvolvimento das raízesAlgodão 3,50 a A 2,25 b BPapel alumínio 3,18 a A 2,68 ab BFilme plástico 3,31 a A 3,06 a AMédias seguidas pela mesma letra minúscula nas linhas, e maiúsculas nas colunas não diferem entre si pelo teste de Tukey (p<0,05).Experimento 2Observou-se interação entre concentrações de sacarose e substratos para as variáveis comprimento de maior raiz e desenvolvimento das raízes. Houve comportamento quadrático para as duas variáveis quando se utilizou ágar ou vermiculita. As concentrações crescentes de sacarose até aproximadamente 34 g L-1 para ágar e 40 g L-1  para vermiculita proporcionaram o aumento das médias para comprimento médio de raiz. Já para o desenvolvimento das raízes, as máximas ficaram em torno de 40 g L-1  para ágar e 35 g L-1 para vermiculita decrescendo em concentrações mais elevadas. Figura 2. Comprimento médio da maior raiz e desenvolvimento das raízes de  cana-de-açúcar  cultivadas  em  meio  com  diferentes  concentrações  de sacarose. Embrapa Clima Temperado,Pelotas, RS, 2012.CONCLUSÕESO uso da vermiculita é uma alternativa para substituição do ágar durante o enraizamento, e o tipo de vedação depende do substrato utilizado. O uso de concentrações de sacarose entre 35 e 40 g L-1 proporciona maior comprimento e desenvolvimento das raízes. AGRADECIMENTOSA FINEP e CNPq pelo financiamento da pesquisa.REFERÊNCIASFERREIRA, D. F. SISVAR - versão 4,3. DEX/UFLA - Lavras, MG, 2003GRATTAPAGLIA, D.; MACHADO, M. A. Micropropagação. In: TORRES, A. C.; CALDAS, L. S.; BUSO, J. A.  Cultura de tecidos e transformação genética de plantas. Brasília: Embrapa-SPI/Embrapa-CNPH, 1998, p. 183-260.HARTMANN, H.  T.;  KESTER,  D.  E.;  DAVIES,  F.  T.;  GENEVE,  R.  L.  Plant  propagation: principles and practices. 6. ed. New Jersey: Prentice Hall, 1997. p. 549-622.MURASHIGE, T.; SKOOG, F. A revised medium for rapid growth and biossay with tabacco tissue cultures. Physiologia Plantarum, v. 15, p. 473-497, 1962.VIEIRA, R.A.; SILVA, C.M.; SOUTO, E.R.; HATA, F.T.; MACHADO, M.F.P.S.; MARCUZ, F.S. Diferentes  concentrações  de  6-Benzilaminopurina  e  cinetina  na  micropropagação  in  vitro  de variedades RB867515 e RB855156 de cana-de-açúcar. Campo Digital, v.4, n.1, p.122-126, 2009.

Enraizamento in vitro de cana-de-açúcar em função de sacarose, substrato e vedação dos frascos.

SILVA, N. D. G. da.

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/946395/1/073.pdf

Enraizamento in vitro de cana-de-açúcar em função de sacarose, substrato e vedação dos frascos.

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal