ARAÚJO, S. A. de

FARINAS, C. S.

FORATO, L. A.

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i, ,Anais da I Jornada Científica - Embrapa São Carlos - 28 e 29 d~outubio de 2009 •Embrapa Pecuária Sudeste e Embrapa Instrumentação Agropecuária - São Carlos - SP - Brasil12iIProdução e caracterização de feruloil esterases (FAEs~a partir de resíduosagroindustriais !Sandra Amaral de Araújo!; Cristiane Sanchez Farinas': Lucimara Aparecida Forato2, .'Aluna de doutorado em Biotecnologia, Universidade Federal de São Carlos, São Carlos, SP,samaujo@terra.com.br; ;2pesquisadora, Embrapa Instrumentação Agropecuária, São Carlos, ~P., I!A atividade enzimática sobre a biomassa é o resultado de uma ação-combinada e sinérgica devárias enzimas. A hidrólise completa da fração hemicelulósica requer dois grupos de enzimas:(1) endoxilanase ~ ~-xi1osidase, as quais quebram a cadeia principal da xilana; (2) enzimasacessórias, que possuem ~ função de remover as cadeias laterais e quebrar as ligações entre axilana e outros polímeros. Entre as enzimas acessórias, as feruloil esterases (FAEs) possuemum "papel chave" em melhorar a acessibilidade das enzimas aos seus substratos, com asubsequente hidrólise elas, fibras hemicelulósicas pela remoção 'do ácido ferúlico (FA),aumentando potencialmente a taxa de liberação de hexoses e pentoses. Atualmente há umgrande interesse na produção de FAEs devido ao seu diversificado potencial em processosbiotecnológicos, em várias, indústrias, e também pela grande aplicação do principal produtoobtido, o ácido ferúlico, um potente antioxidante e precursor da vanilina. O objetivo destetrabalho é desenvolver novas metodologias de estudo para a produção e purificação de FAEsa partir da fermentação semi-sólida (FSS) de resíduos agroindustriais, bem como avaliar o seuuso no melhoramento da produção de etanol e do ácido ferúlico. O agente das fermentaçõesutilizado foi o Aspergillus niger, um ótimo produtor' de FAEs, ma~tido em meio de pectinacítrica e ativado em sabugo de milho por 5 dias à 32°C. As FSS foram realizadas emerlenrneyers, com constante controle da temperatura, umidade (70%) e aeração, por 7 dias. Osresíduos agroindustriais utilizados como substrato até o presente momento foram o farelo detrigo e o de aveia; lavados, e enriquecidos com uma fonte de ~itroaênio (tartarato de amônio12,3%), sais minerais e maltose a 16,7% como indutor de FAEs. 4- extração foi realizada acada dia, durante os 7' dias de incubação, com 30 ml de -~MOPS '(3-N-morpholinopropanosulfonic acid) 100,mM pH 6. O extrato foi armazenado, após centrifugação, à -20°Cpara análises. A dosagem das proteínas foi feita com o reagente de Bradford ~ comparada comuma curva padrão de BsA. As atividades enzimáticas para FAEs serão avaliadas utilizando oácido metil ferúlico (MFA) 33mM como substrato, e comparadas éom uma curva padrão deácido ferúlico (análise em andamento). O extrato enzimático isento de sólidos será submetidoà eletroforese em gel de poliacrilamida 12,5% para determinação' da massa molecular dasproteínas presentes. A presença de ácidos hidroxicinâmicos, (ac. .ferúlico, ac. p-cumárico,ac.sinápico, e ac. cafeico) será analisada e quantificada por HPLÇ em coluna C18. Até omomento não possuo dados significativos para uma discussão. : '. ',I,I\I!Apoio financeiro: Embrapa. iÁrea: Agroenergia / Bioquímica / Fermentação / Biotecnologia

Produção e caracterização de feruloil esterases (FAEs) a partir de resíduos agroindustriais.

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