GARAGORRY, F. C.

GENRO, T. C. M.

MELLO, G. L.

MOSCAT, B.

QUADROS, F. L. F. de

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 QUANTIFICAÇÃO DE N-ALCANOS PRESENTES EM GRAMÍNEAS NATIVAS DO BIOMA PAMPA  GRAZIELE LISBOA MELLO1; FABIO GARAGORRY2; FERNANDO LUIZ FERREIRA DE QUADROS2; BRUNA MOSCAT2;TERESA CRISTINA MORAES GENRO3  1Universidade Federal do Pampa – grazidp@hotmail.com  2Embrapa Pecuária Sul – fabio.garagorry@embrapa.br  3Universidade Federal de Santa Maria – flfquadros@yahoo.com.br 4Universidade Federal do Rio Grande do Sul – bmzoorural@gmail.com 3Embrapa Pecuária Sul – cristina.genro@embrapa.br   1. INTRODUÇÃO  Os n-alcanos são hidrocarbonetos alifáticos saturados de longa cadeia e com mínima digestão, que podem ser definidos como a “impressão digital”das plantas, pois, supostamente, cada planta possui perfil único de n-alcanos (DOVE E MAYES, 1991). Pesquisas apontam que os n-alcanos presentes nas ceras cuticulares das plantas podem ser utilizados com êxito nas estimativas da ingestão e da composição botânica de dietas de herbívoros (FERREIRA et al., 2007). Em se tratando de ruminantes em pastejo, as variações qualiquantitativas das dietas consumidas são excepcionalmente amplas, pois, além das plantas forrageiras estarem em constantes variações botânicas e nutritivas em função do seu crescimento, existe o fator da seletividade de pastejo. Portanto, estimar acuradamente os recursos alimentares disponíveis e participantes das dietas de ruminantes, como espécies e frações de plantas, é tarefa bastante complexa, porém, fundamental em estudos de nutrição animal (DOVE, 1992). Os n-alcanos das plantas podem ser utilizados como marcadores naturais para estimativas da composição da dieta, consumo, e a digestibilidade in vivo nos herbívoros (DOVE e MAYES, 2006), mas existe uma importante variação no conteúdo e proporção destes nas espécies e seus respectivos componentes morfológicos que deve ser estudada a priori para melhor aplicação desta metodologia. O objetivo do presente trabalho foi quantificar o perfil de n-alcanos em lâminas de algumas espécies de gramíneas nativas do Bioma Pampa a fim de avaliar o potencial destes indicadores para futuras estimativas da composição da dieta de animais em pastejo.  2. METODOLOGIA  Estudou-se o perfil de n-alcanos das seguintes espécies forrageiras: Andropogon lateralis, Axonopus argentinus, Dichantelium sabulorum, Paspalum notatum, Paspalum pumilum e Stipa sp., coletadas em uma área experimental da Embrapa Pecuária Sul, utilizada para recria de bezerras de corte Brangus. Os tratamentos utilizados foram: pastagem natural, pastagem natural melhorada por fertilização e pastagem natural melhorada com fertilização e introdução de espécies hibernais (azevém e trevo vermelho). As espécies foram coletadas em junho de 2008 e outubro de 2009, em duas repetições de cada um dos tratamentos.  As amostras foram secas em estufa, à 65ºC durante 72 horas, sendo, após este período, moídas em moinho. A determinação dos n-alcanos presentes na forragem seguiu o protocolo proposto por DOVE E MAYES (2006). A identificação e quantificação dos n-alcanos foram determinadas por CG usando um cromatógrafo SHIMADZU GC-2010 equipado com detector de ionização de chama (FID), um carretel autosampler AOC-20S e um injetor autoinjector AOC-20i. Os n-alcanos extraídos foram injetados (1µl) para dentro de uma coluna Rtx®-5 RESTEK (30 m x 0,25 mm x 0,25 µm, absorbente composto por 5% difenil e 95% dimitilpolisiloxane). O gás de arraste foi o N2 a um fluxo constante de 30 ml/min. Gradientes de temperatura foram controlados para o injetor (270°C) e a coluna (170°C por 1 min; 30ºC/min até 215ºC espera de 1 min e 6°C/min para 300°C; 21min). A temperatura do FID foi mantido a 340°C. O comprimento de cadeia medido foi do C29 ao C35, calculados em mg/kg de matéria seca (MS) de forragem. O delineamento experimental foi de blocos ao acaso, com duas repetições (piquetes). Os dados foram submetidos à análise de variância e suas médias foram comparadas pelo teste de Tukey, quando ocorreram diferenças significativas, utilizando o programa estatístico JMP versão 9.0.0 (2010).  3. RESULTADOS E DISCUSSÃO  Na Tabela 1, são apresentados os teores de n-alcanos (mg/kg MS)  nas espécies estudadas. Não houve diferença no perfil de n-alcanos, nem entre tratamentos (P>0,05) e nem entre os meses avaliados (P>0,05). Esse fato é muito positivo para a metodologia porque a torna mais robusta, principalmente por não sofrer influências dos tratamentos usados. Por não existir diferenças significativas entre tratamentos e épocas de avaliação, os resultados são apresentados por espécie, que foi onde foram encontradas diferenças nas concentrações dos n-alcanos com comprimento de cadeia entre 29 e 35 carbonos.  Tabela 1. Conteúdo de n-alcanos (mg/kg de MS) na lâmina foliar de espécies forrageiras nativas do bioma Pampa  n-alcanos (mg/kg de MS) Espécie C29 C30 C31 C32 C33 C35 Total Axonopus argentinus 16,95d 8,69b 158,73d 12,22b 176,57c 30,61b 402,48d Andropogon lateralis 26,56c 26,74a 245,67c 19,54a 228,78b 34,23b 565,13c Dichantelium sabulorum 128,78a 27,84a 1076,27a 26,76a 395,64a 44,74b 1770,33a Paspalum notatum 14,48de 8,79b 118,32e 14,19b 242,56b 149,29a 539,90c Paspalum pumilum 10,59e 3,41b 90,68e 6,40c 78,43d 12,79b 175,07e Stipa sp. 73,22a 14,25b 572,92b 13,69bc 205,03bc 22,90b 961,82b Médias seguidas de letras distintas diferem entre si pelo teste Tukey (P<0,005)  As espécies Dichantelium sabulorum e Stipa sp. apresentaram quantidades elevadas de n-alcanos C29, C30, C31, C32 e C33, o que fez com que elas se destacassem com relação às demais espécies, resultando em uma  alta concentração de n-alcanos totais quando comparadas às demais. As espécies de Paspalum apresentaram diferenças entre si, Paspalum notatum teve altas  proporções de C33 e C35, este último bem superior às quantidades encontradas na bibliografia para plantas tropicais (LAREDO et. al, 1991). Resultados semelhantes foram encontrados para ALVARADO et al. (2009) para P. notatum. Na Figura 1 estão os resultados expressos em percentagem do total de alcanos para cada n-alcano.    Figura 1. Padrão de n-alcanos (% total de n-alcanos) de espécies forrageiras nativas do bioma Pampa.  Quando se expressa os teores de n-alcanos em percentagem do total de n-alcanos presentes na lâmina de cada espécie, verifica-se que C29, C30 e C32 apresentaram pouca contribuição para o perfil de n-alcanos. Já os n-alcanos C31 e C33 apresentaram altas concentrações para quase todas as espécies. De modo geral, para todas as espécies, os n-alcanos que mais se destacaram foram o C29, C31 e C33. para P. notatum, no entanto, os n-alcanos que mais contribuíram foram o C33 e C35, sendo que essa espécie foi a única que apresentou alta contribuição de C35. Observou-se, de maneira geral, a predominância dos n-alcanos de cadeias ímpares sobre os de cadeias pares, o que está de acordo com os dados de pesquisa de vários autores (DOVE e MAYES, 2006). Também foram encontradas diferenças no perfil de concentração dos n-alcanos entre plantas, o que permitiria o uso dessas espécies para estimar a composição botânica das dietas pelo método proposto por DOVE e MAYES (1999).  4.CONCLUSÕES  Os perfis de n-alcanos nas espécies estudadas mostraram potencial para uso desses indicadores para estimar composição da dieta de ruminantes em pastejo, usando a metodologia dos n-alcanos.   5.REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS  BAKKER, M.L., ALVARADO, P.I., GENRO, T.C.M. Conteúdo e padrão de n-alcanos em espécies forrageiras nativas do Bioma Pampa. In: Reunião Anual Da Sociedade Brasileira De Zootecnia, 46, 2009, Maringá. Inovação Científica e Tecnológica em Zootecnia. São Carlos: Aptor software, 2009.sn. CD-ROOM. DOVE, H. Using the n-alkanes of plant cuticular wax to estimate the species composition of herbage mixtures. Australian Journal of Agricultural Research, v.43, p.1711-1724, 1992. DOVE, H.; MAYES, R.W. Protocol for the analysis of n-alkanes and other plant-wax compounds and for their use as markers for quantifying the nutrients upply of large mam Malian herbivores. Nature Protocols, 1:1680-1697, 2006. DOVE, H.; MAYES, R.W. The use of plant wax alkanes as marker substances in studies of the nutrition of herbivores: a review. Aust. J. Agric. Res., Collingwood, v. 42, p. 913-952, 1991. FERREIRA, L.M.M., OLIVÁN, M., CELAYA, R., GARCIA, U., RODRIGUES, M.A.M., OSORO, K. The use of n-alkanes to estimate diet composition of ruminants grazing on species diverse plant communities — Effect of feeding selectivity on diet composition estimates. Livestock Science, v.111, p.114–123, 2007. LAREDO, M.A. et al. The potential for using n-alkanes in tropical forages as a marker for the determination of dry matter by grazing ruminants. J. Agric. Sci., Cambridge, v. 117, p. 355-361, 1991.  

Quantificação de n-alcanos presentes em gramíneas nativas do bioma Pampa.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/973795/1/GenroCA864.pdf

Quantificação de n-alcanos presentes em gramíneas nativas do bioma Pampa.

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