ALMEIDA, R. F. C. de

ANDREOTTI, R.

COMINETTI, M. C.

GONÇALVES, G. M. do A.

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 ÁREA TEMÁTICA: H) MISCELÂNEA/ OUTROS P-803 TÍTULO: MONITORAMENTO INFECÇÃO DE TRIATOMÍNEOS POR TRYPANOSOMA CRUZI UTILIZANDO REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE, NO ESTADO DE MATO GROSSO DO SUL  AUTOR(ES): MARLON CEZAR COMINETTI , ROBSON FERREIRA CAVALCANTE DE ALMEIDA, GUILMARA MARIA DO AMARAL GONÇALVES, RENATO ANDREOTTI INSTITUIÇÃO: UFMS  Introdução: O presente estudo avaliou a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) como método diagnóstico para a infecção pelo Trypanosoma cruzi em triatomíneos, que foi previamente determinado por um exame microscópico, no estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Material e Métodos: No total, 515 amostras foram coletadas e examinadas para a presença de T. cruzi por método microcópico. A extração de DNA do material a partir do trato digestivo de cada triatomino foi feita usando o protocolo Fenol/Clorofórmio/Alcool Isoamílico (25:24:1) e posteriormente analisado usando a PCR, com o conjunto de iniciadores 121/122. As freqüências foram comparadas estatisticamente utilizando o teste do qui-quadrado (X2) e a concordância entre os métodos foi determinada utilizando o índice kappa.Resultados: Entre as amostras analisadas, 58 (11,26%) foram positivas na microscopia e 101 (19,61%) foram PCR positivo (p = 0,001; kappa = 0,617). A possível presença de resultados falso-negativos no exame de microscopia foi indicada pela PCR, que mostrou maior sensibilidade do que a microscopia. Discussão: O exame microscópico do material do trato digestivo dos insetos é rotina no monitorameno da distribuição de protozoários flagelados (possivelmente T. cruzi). No entanto, o exame microscópico não permite a identificação precisa do T. cruzi, pois outras espécies de tripanossomas são morfologicamente indistinguíveis, gerando resultados falso-positivos (ou falso-negativos). Em uma das amostras, a análise molecular foi realizada a partir de material fixado em uma lâmina de microscópio, anteriormente classificados como inconclusiva para T. cruzi. Os resultados inconclusivos em exames microscópicos podem ocorrer devido às deformações provocadas nos parasitas durante a preparação de esfregaço tornando difícil a identificação do protozoário. A identificação do flagelado encontrado por microscopia foi confirmada como sendo T. cruzipela PCR, demonstrando a sua eficácia, especialmente em pontos controversos que possam surgir durante o trabalho de identificação. A combinação de PCR e microscopia óptica para monitorar T. cruzi em triatomíneos poderia garantir melhores resultados quanto à sensibilidade, como evidenciado nas amostras de diferentes municípios examinados, bem como para a especificidade. No presente estudo, a porcentagem de resultados falso-negativos foi de aproximadamente 8,17%. Assim, considerando os verdadeiros níveis de sensibilidade e especificidade do exame de microscopia, surge a dúvida: Qual a situação real da distribuição do parasita entre os triatomíneos? Conclusões: A análise dos dados mostrou que uma combinação das duas técnicas pode melhorar o trabalho de vigilância entomológica.   

Monitoramento infecção de triatomíneos por trypanosoma cruzi utilizando reação em cadeia da polimerase, no estado de Mato Grosso do Sul.

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