CONCEICAO, H. E. O. da

MONTEIRO, A. L. C.

OLIVEIRA, C. de S.

SOARES, M. C. L.

VIEIRA, I. M. S.

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1 Bolsista do PIBIC/CNPq/FCAP – Acadêmico do 30 semestre do Curso de Agronomia da FCAP.2 Orientadora / Profa Dra., DQT – FCAP.3 Co-orientador / Pesquisador Dr., Embrapa Amazônia Oriental4  Bolsistas do PIBIC/CNPq/FCAP – Acadêmicas do 70 semestre do Curso de Agronomia da FCAP.PROPAGAÇÃO E CULTIVO IN VITRO DE COPAÍBA (Copaifera multijuga, HAYNE)OLIVEIRA, Cleber de Souza1; VIEIRA, Irenice Maria Santos2; CONCEIÇÃO, Heraclito Eugenio Oliveira3; SOARES,Maria Carolina Leal4 e MONTEIRO, Albene Liz Carvalho4.A copaíba (Copaifera multijuga Hayne) é uma essência florestal freqüente na Região Amazônica, da Família Leguminosae- Caesalpinioideae. Em sua fase adulta, pode atingir até 36 metros de altura, com DAP superior a 25 cm, de copa densa ecasca lisa e áspera (Loureiro, 1968). Possui grande importância econômica e terapêutica por produzir óleo-resina e óleoessencial que podem ser utilizados como matérias-primas para fabricação de vernizes, fixador, perfumes, lacas, tintas,combustível e como antiinflamatório, anticancerígeno, cicatrizante e infecções tetânicas. Sua madeira pode também serutilizada para construção civil e fabricação de carvão. Na Amazônia, devido as suas características químicas e medicinais,vem sendo utilizada pelas populações como remédio contra diversos males que afligem o homem moderno. A estruturaquímica dos constituintes do óleo-resina foi descrito por Soares Maia et al (1978), contendo sesquiterpernos, entre os quaiso cubeno, α-cadileno e α-tocoferol, cumarina ácidos graxos (linoleico, oleico, palmítico, beênico e aracquídico). A madeiraapresenta extrato com álcool-benzeno (6,3%), extrato com água (8,5%); possui elevada taxa de hemicelulose (19%) eporcentagem reduzida de lignina (23%). A porcentagem de celulose (40%) relativamente é reduzida em comparação com aporcentagem média das madeiras tropicais. Esta pesquisa tem por objetivo estabelecer protocolos de cultura de células emsuspensão e de micropropagação ou propagação vegetativa in vitro de copaíba (C. multijuga, Hayne). Os trabalhos estãosendo desenvolvidos no Departamento de Química e Tecnologia - Laboratório de Biotecnologia Vegetal da Faculdade deCiências Agrárias do Pará - FCAP. Para os experimentos de cultura de células em suspensão, estão sendo usados, comofontes de explantes, segmentos foliares de cerca de 1 cm de diâmetro, oriundos de plântulas germinadas in vitro. A induçãoe a formação de calos de copaíba está sendo feita de acordo com Moraes (2002). Após a obtenção dos calos, serádeterminado o (s) meio (os) de manutenção de calos e a curva de crescimento de calos da seguinte maneira: a) manutençãode calos – serão usados como explante, fragmentos de calos de cerca de 0,5 cm de comprimento, que serão inoculados emmeio de cultura WPM (Lloyd e McCown, 1981), suplementado com 1,0 + 1,0; 1,0 + 2,0; 1,5 + 1,5 e 1,5 + 3,0 mg/l  de 2,4-D + BAP, além de sacarose a 3%, gelrite a 0,2% e pH ajustado para 5,8 ± 0,2. A cultura será mantida durante 30 dias emfotoperíodo de 16 horas, sob intensidade luminosa de 50 µmol/m2/s. Em seguida, os calos oriundos do melhor tratamentode manutenção, serão subcultivados duas vezes, afim de aumentar a quantidade de calos e, posteriormente, far-se-á aconstrução de curva de crescimento de calos durante 30 dias, com tomadas de dados de pesos de massa fresca e massa seca,a cada três dias; b) cultura de células em suspensão – calos mantidos em meio de cultura de manutenção serão transferidospara erlenmayer contendo meio de cultura líquido de formulação similar, cultivados no escuro sobre placa agitadora,mantida a 100 rpm, com subcultivos a cada 30 dias e depois determinado o crescimento de calos (agregados de células)através de pesos de massa fresca e massa seca; c) micropropagação – serão usados como explantes segmentos nodais comcerca de 2 cm de comprimento, oriundos de plântulas germinadas in vitro.  Os explantes serão inoculados em meio decultura WPM (Lloyd e McCown, 1981), suplementado com 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 3,0 e 4,0 mg/l de BAP; 0,5; 1,0 e 2,0mg/l de TDZ, além de sacarose a 3%, gelrite a 0,2%, PVP 100 mg/l e pH ajustado para 5,8 ± 0,2. A cultura será mantidadurante 30 dias em fotoperíodo de 16 horas, sob intensidade luminosa de 50 µmol/m2/s, para indução de brotação. Emseguida, as brotações obtidas pelo (s) melhor (es) tratamento (s) serão isoladas e subcultivadas nestes meios de culturas,durante 30 dias; determinar-se-á, também, nesta fase, a taxa de multiplicação da cultura. Paralelamente, algumas brotaçõesserão submetidas a tratamento usando-se o mesmo meio de cultura básico, sem regulador de crescimento, para alongamentoda brotação e/ou a indução de raiz. Para indução de raiz, as brotações serão cultivadas em meio de cultura WPM,suplementado com 0,0; 0,5 e 1,0 mg/l de AIB; 0,5 + 1,0 mg/l de AIB + ANA, durante 14 e 21 dias, nas mesmas condiçõesde cultivo. As plântulas regeneradas serão aclimatadas em condições de estufa, em bandejas de plástico contendo 64 célulasde 6 cm de lado e 10 cm de profundidade, preenchidas com  plantmax. Nestas condições, serão medidos o desenvolvimentoe a taxa de sobrevivência das mudas.

Propagação e cultivo in vitro de copaíba (Copaifera multijuga, Hayne).

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