COLDEBELLA, A.

FONGARO, G.

FORNARI, M. B.

JAENISCH, F. R. F.

LEDUR, M. C.

MARCHESI, J. A. P.

NEIS, K. L.

PEIXOTO, J. de O.

PERI, E.

RIBEIRO, J. B.

TESSMANN, A. L.

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CAPÍTULO 3 Marcadores moleculares para características produtivas em frangos de corteJane de Oliveira PeixotoArlei ColdebellaFátima Regina Ferreira JaenischAlexandre Luis TessmannJoão Batista RibeiroMarcelo Batista Fornari Jorge Augusto Petroli MarchesiKarina Luzia NeisGislaine FongaroEdimara PeriMônica Corrêa Ledur 45Marcadores moleculares para características produtivas em frangos de corte...IntroduçãoO grande avanço na geração de conhecimentos sobre os genomas vem contribuindo para decifrar parte do controle genético de características FGKPVGTGUUGGEQPÊOKEQ#KFGPVKƒEC¼µQFGOCTECFQTGUOQNGEWNCTGUassociados a essas características importantes, como as características produtivas, tem sido objeto de muitas pesquisas. Inúmeros marcado-res estão em fase de desenvolvimento, principalmente em populações segregantes F2, visando a implementação de informações genômicas em complemento aos métodos tradicionais de avaliação genética em programas de melhoramento. Contudo, os resultados obtidos em popu-lações experimentais precisam ser validados em linhas puras, que são a base para formação dos rebanhos comerciais. Portanto, a validação, que é uma etapa importante para a incorporação da tecnologia dos mar-cadores na avaliação genética, foi o objeto dessa pesquisa.Objetivosũ Validar em linha elite de frango corte marcadores nos genes ACTA1 (alfa actina 1), GHRL (grelina) e LEPR (receptor da leptina);ũ Formar um banco de dados fenotípicos e de DNA de uma linha pura paterna de frango de corte.Resultados e discussãoA população utilizada foi obtida pela expansão de uma linhagem pater-na de frango de corte (TT) pertencente ao Programa de Melhoramento Genético de Aves da Embrapa Suínos e Aves. Foram utilizados pintos de um dia de idade, de ambos os sexos, provenientes de cinco incuba-ções. Aos 42 dias de idade, 1.465 aves foram abatidas. Essa popula-ção apresenta banco de DNA genômico, registro de pedigree e banco fenotípico com 80 características de interesse para a avicultura, entre elas características de desempenho, carcaça e de integridade óssea. 46 Relatório de Projetos Concluídos 2011Nesse estudo foram investigados marcadores nos genes ACTA1, GHRL G.'24KFGPVKƒECFQURTGXKCOGPVGPCRQRWNC¼µQUGITGICPVG(FC'/-BRAPA (NINOV et al., 2008 e PEIXOTO et al., 2008). Os marcadores ACTA1 e LEPR são SNPs e foram genotipados pela técnica de PCR-4(.2RQNKOQTƒUOQPQVCOCPJQFGHTCIOGPVQFGTGUVTK¼µQGQOCTEC-FQT)*4.¾WO+0&'.GHQKIGPQVKRCFQPCRTÉRTKCCORNKƒEC¼µQAs análises descritivas, de parâmetros genéticos (herdabilidades e EQTTGNC¼ËGUGFGCUUQEKC¼µQGPVTGQRQNKOQTƒUOQGCUECTCEVGTÃUVKECUfenotípicas foram realizadas utilizando-se o programa QxPak (PEREZ--ENCISO; MISZTAL, 2004), que utiliza procedimentos de máxima verossimilhança. De acordo com a observação dos desvios-padrão e dos valores mínimos e máximos para cada característica, existe varia-bilidade fenotípica considerável entre os indivíduos dessa população, apesar da seleção praticada dentro de linha desde 1992. Isso demons-tra que a variabilidade se mantém dentro de linhagens, mesmo em populações intensamente selecionadas em programas de melhoramento IGP¾VKEQ'UUGHCVQVCOD¾OƒECGXKFGPVGEQOCGZKUV¿PEKCFGJGTFC-bilidades moderadas para muitas das características analisadas. Como exemplo, na Tabela 1, são apresentadas as herdabilidades e correlações genéticas entre as características de desempenho. Possivelmente, essa variabilidade fenotípica, causada por variações genômicas, permite KFGPVKƒECTIGPGUGOCTECFQTGUCUUQEKCFQU¯UECTCEVGTÃUVKECUFGKPVGTGU-se, uma vez que a existência de variabilidade indica a segregação de alelos nas populações. Resultados importantes foram apresentados nas publicações geradas nesse projeto: Peixoto et al. (2010a) apresentou a avaliação genética das características de desempenho nessa população referência, concluindo que existe variabilidade genética considerável entre os indivíduos TT para as características de crescimento. Venturini et al. (2010) apresentou os parâmetros genéticos conversão alimentar e os rendimentos de coxa, sobrecoxa e peito. De acordo a observação de herdabilidades moderadas para os rendimentos dos cortes, concluiu-se que existe resposta à seleção para o maior rendimento desses cortes na população TT. Cruz et al. (2011) geraram estimativas de parâme-tros genéticos para peso corporal, gordura abdominal e peso de peles. 47Marcadores moleculares para características produtivas em frangos de corte...Observou-se que a seleção para P42 poderá aumentar a deposição de gordura na carcaça e nas peles, o que não é desejável para a indústria, o mercado consumidor a para o ambiente.Tabela 1. Herdabilidades e correlações genéticas entre as características de desempenho1Características PNAS P21 P35 P41 P42 PPSD PCRPNAS 0,66 0,38 0,20 0,18 0,18 0,18 0,16P21 0,31 0,77 0,66 0,65 0,63 0,65P35 0,28 0,93 0,92 0,91 0,92P41 0,25 0,98 0,97 0,95P42 0,24 0,99 0,97PPSD 0,25 0,98PCR 0,241Herdabilidades na diagonal e correlações genéticas acima da diagonal.PNAS - peso ao nascer, P21 - peso aos 21 dias de idade, P35 - peso aos 35 dias de idade, P41 - peso aos 41 dias de idade, P42 - peso aos 42 dias de idade; PPSD - peso pós sangria e depena, PCR - peso da carcaça resfriada.A estimação dos parâmetros genéticos de uma população é fundamen-tal para se obter informações sobre a natureza da ação dos genes en-volvidos na herança dos caracteres e estabelecer a base para a escolha dos métodos de melhoramento genético mais convenientes. De acordo EQO%CORQUG2GTGKTCCSWCPVKƒEC¼µQFCXCTKC¼µQIGP¾VKECCFK-tiva das características, indicada pelas herdabilidades, e as associações genéticas entre as características, fornecidas nas correlações genéticas, permitem estabelecer estratégias de melhoramento animal e o moni-toramento da variabilidade genética dos indivíduos de uma população. Além das contribuições no melhoramento, o conhecimento desses pa-râmetros populacionais pode subsidiar a interpretação de resultados de CP±NKUGUIGPÊOKECURCTCKFGPVKƒEC¼µQFGTGIKËGUFGKPVGTGUUGRTKPEKRCN-mente, nas abordagens de análise de loci que controlam características quantitativas (QTLs) e de genes candidatos.48 Relatório de Projetos Concluídos 2011No estudo de validação dos genes candidatos, os três genótipos pos-síveis foram encontrados na população avaliada, indicando que os marcadores estão segregando satisfatoriamente na linha pura TT. Os padrões de fragmentos obtidos para os marcadores na eletroforese es-tão apresentados na Figura 1. As frequências gênicas e genotípicas são apresentadas na Tabela 2. A elevada heterozigozidade é uma excelente ECTCEVGTÃUVKECFQUOCTECFQTGU#%6#G)*48GTKƒEQWUGSWGQCNGNQmenos frequente foi o G do marcador LEPR (22,09%), sendo a frequ-ência do homozigoto GG igual a 4,85%. Os alelos apresentaram boa segregação na população. Essas frequências garantem a precisão nas análises estatísticas e permitem que o valor aditivo de cada marcador possa ser calculado, uma vez que este é obtido por meio de contrastes entre os homozigotos.Figura 1. Padrões de fragmentos dos marcadores ACTA1(a), LEPR (b) e GHRL (c) e seus respectivos genótiposQuanto à validação dos três marcadores estudados, com base na aná-NKUGFGCUUQEKC¼µQEQPENWKWUGSWGQRQNKOQTƒUOQPQIGPGFCITGNKPCnão apresenta associação com características de grande relevância nes-sa população; o marcador genético ACTA1 apresenta associação com a deposição de carne na sobrecoxa e no peito, que são características importantes na avicultura de corte (VENTURINI et al., 2011); o polimor-ƒUOQ.'24CRTGUGPVCCUUQEKC¼µQEQOECTCEVGTÃUVKECUFGETGUEKOGPVQGde carcaça em frangos de corte. Esses resultados estão apresentados nas publicações geradas nesse projeto (PEIXOTO et al., 2010b).49Marcadores moleculares para características produtivas em frangos de corte...Tabela 2. Frequências gênicas e genotípicas dos marcadores ACTA1, GHRL e LEPRMarcador Frequência gênica (%) Frequência genotípica (%)ACTA1 65,73 (G) 34,27 (C) 41,58 (GG) 48,30 (GC) 10,12 (CC)GHRL1 59,06 (A) 40,94 (B) 34,74 (AA) 48,64 (AB) 16,62 (BB)LEPR 77,91 (A) 22,09 (G) 60,68 (AA) 34,47 (AG) 4,85 (GG)1Alelos do marcador GHRL: a – alelo com a inserção e b – alelo com a deleção.Tecnologia geradaInsumo agropecuário: Desenvolvimento de uma população referência para validação de estudos genômicos e desco-berta de genes em frango de corteA população referência foi desenvolvida para a validação de resultados obtidos nas pesquisas em genômica de aves, principalmente, frango de corte. A população foi formada pelo acasalamento de 20 machos com 92 fêmeas. Aos 42 dias de idade, 1.465 aves de ambos os sexos foram abatidas e várias características fenotípicas mensuradas. Essa população apresenta banco de DNA genômico, registro de pedigree e banco fenotípico com características de interesse para a avicultura. Além disso, foram estimados seus parâmetros genéticos. De acordo com a observação dos desvios-padrão e a existência de herdabilidades moderadas para as características de desempenho e outras caracterís-ticas de cortes de carcaça e peso de órgãos, existe variabilidade fenotí-pica considerável entre os indivíduos dessa população. Os dados dessa população referência poderão ser utilizados por instituições nacionais ou internacionais, mediante convênios e parcerias com a Embrapa Suí-nos e Aves, tanto para validação de marcadores como para descoberta de genes, sendo úteis para uso em programas de melhoramento genéti-co e também para o avanço do conhecimento.Principais publicaçõesCRUZ, V. A. R.; VENTURINI, G. C.; PEIXOTO, J. O.; LEDUR, M. C.; SCHMIDT, G. S.; MUNARI, D. P. Estimativas de parâmetros genéticos para peso corporal, gordura abdominal e peso de peles em linhagem pura de frangos de corte. In: CONFERÊNCIA FACTA DE CIÊNCIA E TECNOLOGIA AVÍCOLAS, 2011, Santos, SP. Anais... Santos: FACTA, 2011. Trabalhos de Pesquisa José Maria Lamas da Silva. 1 CD-ROM.PEIXOTO, J. O., SAATKAMP, M. G., TESSMANN, A.L., FIGUEIREDO, E. A. P., MUNARI, D. P., LEDUR, M. C. Avaliação genética de ca-racterísticas de desempenho em população referência para validação de estudos genômicos em frango de corte. In: Simpósio Brasileiro de Melhoramento Animal, 8., 2010, Maringá, PR. Anais... Maringá: SBMA, 2010a.PEIXOTO, J. de O.; PERI, E.; NINOV, K.; JARDIN, S.N.; FONGARO, G.; COUTINHO, L.L.; LEDUR, M.C. Validação do marcador molecular LEPRI A>G para características de crescimento em linhagem paterna de fran-go de corte. In: SIMPÓSIO BRASILEIRO DE MELHORAMENTO ANIMAL, 8., 2010. Maringá, PR. Anais... Maringá: SBMA, 2010b. 1 CD-ROM.VENTURINI, G. C.; GROSSI, D. A.; BUZANSKAS, M. E.; EL FARO, L.; LEDUR, M. C.; SCHMIDT, G. S.; MUNARI, D. P. Genetic evaluation of body weight, skin and carcass yield of broilers. In: WORLD CONGRESS ON GENETICS APPLIED TO LIVESTOCK PRODUCTION, 9. 2010, Leipzig. Abstracts. Leipzig: Gesellschaft fur Tierzuchtwissenschaften, 2010. p. 256.VENTURINI, G. C.; CRUZ, V. A. R.; SOUZA, C. G.; LEDUR, M. C.; PEIXOTO, J. O.; MUNARI, D. P. Validation of a molecular marker in the alpha-actin 1 gene for performance and carcass traits in broilers. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 57., 2011. Resumos. Águas de Lindóia: SBG, 2011. p.185.50 Relatório de Projetos Concluídos 2011%QPUKFGTC¼ËGUƒPCKUũ Os marcadores moleculares LEPR e ACTA1 foram validados na linha pura TT. As associações evidenciadas indicam que esses marcadores apresen-tam potencial uso em programas de melhoramento de aves.ũ Existe variabilidade genética considerável entre os indivíduos TT para as características analisadas, indicando o potencial dessa população para validar resultados em genômica aplicados a frango de corte.ReferênciasCAMPOS, E. J.; PEREIRA, J. C. C. Melhoramento genético das aves, In: PEREIRA, J, C, C, Melhoramento genético aplicado a produção ani-mal. Belo Horizonte: FEP-MVZ, 1999. p. 284-314.CRUZ, V. A. R.; VENTURINI, G. C.; PEIXOTO, J. O.; LEDUR, M. C.; SCHMIDT, G. S.; MUNARI, D. P. Estimativas de parâmetros genéticos para peso corporal, gordura abdominal e peso de peles em linhagem pura de frangos de corte. In: CONFERÊNCIA FACTA DE CIÊNCIA E TECNOLOGIA AVÍCOLAS, 2011, Santos, SP. Anais... Santos: FACTA, 2011. Trabalhos de Pesquisa José Maria Lamas da Silva. 1 CD-ROM.NINOV, K.; LEDUR, M. C.; NONES, K.; COLDEBELLA, A.; BERTOL, T. /%#'6#01#4%176+0*1..2QNKOQTƒUOQFGDCUGÐPKEC(SNP) no gene do receptor da leptina associado com características de rendimento e composição de carcaça de galinhas. In: Simpósio Brasi-leiro de Melhoramento Animal, 7., 2008, São Carlos, SP. Anais... São Carlos: SBMA, 2008.PEIXOTO, J. O.; JARDIM, S. N.; AMAZONAS, E. A.; ALVES, H. J.; %176+0*1...'&74/%#UUQEKC¼µQGPVTGRQNKOQTƒUOQPQgene da alfa actina e características produtivas em galinha. In: Con-ferencia Apinco de Ciência e Tecnologia Avícolas, 2008, Santos, SP. Anais... Campinas: FACTA, 2008.51Marcadores moleculares para características produtivas em frangos de corte...PEIXOTO, J. O.; SAATKAMP, M. G.; TESSMANN, A. L.; FIGUEIRE-DO, E. A. P.; MUNARI, D. P.; LEDUR, M. C. Avaliação genética de características de desempenho em população referência para validação de estudos genômicos em frango de corte. In: Simpósio Brasileiro de Melhoramento Animal, 8., 2010, Maringá, PR. Anais... Maringá: SBMA, 2010a.PEIXOTO, J. de O.; PERI, E.; NINOV, K.; JARDIN, S. N.; FONGARO, G.; COUTINHO, L. L.; LEDUR, M. C. Validação do marcador molecular LEPRI A>G para características de crescimento em linhagem paterna de frango de corte. In: SIMPÓSIO BRASILEIRO DE MELHORAMENTO ANIMAL, 8., 2010. Maringá, PR. Anais... Maringá: SBMA, 2010b. 1 CD-ROM.PÉREZ-ENCISO, M.; MISZTAL, I. Qxpak: a versatile mixed model appli-cation for genetical genomics and QTL analyses. Bioinformatics, v. 20, p. 2792-2798, 2004.VENTURINI, G. C.; GROSSI, D. A.; BUZANSKAS, M. E.; EL FARO, L.; LEDUR, M. C.; SCHMIDT, G. S.; MUNARI, D. P. Genetic evaluation of body weight, skin and carcass yield of broilers. In: WORLD CONGRESS ON GENETICS APPLIED TO LIVESTOCK PRODUCTION, 9. 2010, Leipzig. Abstracts. Leipzig: Gesellschaft fur Tierzuchtwissenschaften, 2010. p. 256.VENTURINI, G. C.; CRUZ, V. A. R.; SOUZA, C. G.; LEDUR, M. C.; PEIXOTO, J. O.; MUNARI, D. P. Validation of a molecular marker in the alpha-actin 1 gene for performance and carcass traits in broilers. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 57., 2011. Resumos. Águas de Lindóia: SBG, 2011. p.185.52 Relatório de Projetos Concluídos 2011

Marcadores moleculares para características produtivas em frangos de corte.

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