ANDRADE, L. B. da S.

BRITO, M. S. de

FIGUEIREDO, M. F.

OLIVEIRA, T. dos R. de

SALLES, H. O.

SOUSA, E. M. de

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12/12/13 www.sbpcnet.org.br/livro/65ra/resumos/resumos/2639.htmwww.sbpcnet.org.br/livro/65ra/resumos/resumos/2639.htm 1/265ª Reunião Anual da SBPCC. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 6. BioquímicaATIVIDADE DE GLICOSIDASES EM SEMENTES DE Caesalpinia pyramidalis Tul.Tadeu dos Reis de Oliveira - Aluno de Ciências Biológicas - Bacharelado (UVA)-Bolsista IC/FUNCAPEfigênia Maria de Sousa - Aluna de Ciências Biológicas - Bacharelado (UVA)-Bolsista IC/FUNCAPMônica Silva de Brito - Graduada em Ciências Biológicas-UVAMarlene Feliciano Figueiredo - Profa. Dra. Curso de C. Biológicas/Universidade Estadual Vale do Acaraú (UVA)Hévila Oliveira Salles - Dra./Pesquisadora Embrapa Caprinos e OvinosLúcia Betânia da Silva Andrade - Profa. Dra./Orientadora - Curso de C. Biológicas/Univ. Est. Vale doAcaraú(UVA)INTRODUÇÃO:Enzimas são moléculas capazes de acelerar reações químicas e regulam diversos processos biológicos. Asenzimas hidrolíticas são alvos da pesquisa biotecnológica pelo grande potencial de aplicação no setorindustrial (BON et al., 2008). Amilases e celulases são glicosidases que catalisam a hidrólise de ligaçõesglicosídicas de oligossacarídeos ou polissacarídeos. Estas glicosidases estão entre as mais importantesenzimas industriais usadas no beneficiamento de produtos de indústrias têxteis, produção de papel,indústrias farmacêutica e alimentícia, sendo que a maior parte destas enzimas comercialmente disponível éde origem microbiana (GUPTA et al., 2003; ZHANG et al., 2006). C. pyramidalis, conhecida no Ceará comocatingueira, é uma leguminosa nativa da caatinga de ampla dispersão no Nordeste e é utilizada na medicinapopular em tratamentos de infecções respiratórias e diarreias. Considerando a importância e aplicação deglicosidases, a investigação de vegetais como produtores destas enzimas amplia a possibilidade do usoindustrial de fontes alternativas de amilases e celulases.OBJETIVO DO TRABALHO:Verificar a atividade de amilases e celulases em sementes de Caesalpinia pyramidalis e avaliar a melhorsolução para extração dessas enzimas.MÉTODOS:Os frutos da catingueira foram coletados de plantas da área urbana da cidade de Sobral - CE. As sementesforam retiradas dos frutos manualmente, descascadas e os cotilédones triturados em moinho elétrico até aformação de uma fina farinha. Os extratos proteicos (EP) foram obtidos pela extração da farinha com quatrodiferentes soluções: tris/HCl 50mM pH 7,5, NaCl 0,2 M, fosfato de sódio 0,1 M pH 6,7 e água, na proporção de1:10 (m/v), sob agitação por 1 hora, centrifugados a 10.000x g, por 30 minutos, a 4°C. O sobrenadante (EP)foi usado como fonte de glicosidases. A análise qualitativa para atividade de amilases e celulases foirealizada pelo método de difusão radial em ágar, usando como substrato amido e carboximetilcelulose,respectivamente (CARVALHO et al., 2010; MANDELS et al., 1974,). A atividade enzimática foi evidenciada peloaparecimento de um halo de hidrólise no ágar. A quantificação de proteínas totais no EP foi determinada pelométodo de Bradford (1976). Para caracterizar o perfil de proteínas do EP, foi realizada uma eletroforese emgel de poliacrilamida contendo SDS (LAEMMLI, 1970). O gel foi corado com uma solução de 1% de coomassieblue R-250.RESULTADOS E DISCUSSÃO:Os extratos (EP) obtidos com as diferentes soluções de extração apresentaram atividade para amilases ecelulases, não havendo diferenças qualitativas aparentes na atividade dessas enzimas entre as diversassoluções usadas na extração. O teor de proteínas foi menor no extrato obtido com água (140,82 mg/g defarinha) quando comparados aos extratos obtidos com tampão Tris/HCl (162,02 mg/g de farinha), tampãofosfato (158,88 mg/g de farinha) ou solução salina 0,2 M (152,07 mg/g de farinha) e o perfil eletroforético nãoapresentou diferenças entre os diversos extratos, ocorrendo 3 bandas proteicas de maior intensidade abaixode 30 kDa. Tradicionalmente, a maioria das enzimas disponíveis comercialmente é produzida por bactérias oufungos e a identificação e uso de novos organismos produtores de hidrolases são o foco de muitas pesquisas(HAKI et al., 2003). A facilidade de obtenção de amilases e celulases a partir de extratos aquosos desementes, como já reportado por Cavalheiro et al. (2009) para sementes de Caesalpinia ferrea, indica quesementes de leguminosas, incluindo C. pyramidalis, possuem potencial para a extração desses compostos,podendo, desta forma, representar mais um recurso na aquisição dessas enzimas para fins tecnológicos.CONCLUSÕES:Sementes de C. pyramidalis avaliadas nesse estudo são uma fonte para extração de importantes enzimaspara aplicação na indústria. Estudos posteriores no intuito de isolar e caracterizar essas enzimas poderãoidentificar essas novas moléculas e avaliar a sua possível aplicação biotecnológica, promovendo o aumentodo conhecimento sobre o uso de nossa biodiversidade.Palavras-chave: Amilase, Celulase, Enzimas hidrolíticas.12/12/13 www.sbpcnet.org.br/livro/65ra/resumos/resumos/2639.htmwww.sbpcnet.org.br/livro/65ra/resumos/resumos/2639.htm 2/2Palavras-chave: Amilase, Celulase, Enzimas hidrolíticas.

Atividade de glicosidases em sementes de Caesalpinia pyramidalis Tul.

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