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Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa

III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 39Efeito da Adição de Ácidos Graxos Poli-Insaturados na Dieta Sobre a Cinética Espermática do Sêmen de CarneirosJosé Eduardo Matos1; Tarsizio da Silva Santos2; Rebeca Santos da Silva3; MaianaSilva Chaves4; Ana Claudia França de Freitas5; Pábola Santos Nascimento6; AllanAndrade Rezende7; Paulo César Falanghe Carneiro8; Alexandre Nizio Maria9; Anselmo Domingos Ferreira Santos10; Carollina Florido Pires11; Hymerson Costa Azevedo12ResumoEste trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de dietas com diferentes concentrações de ácidos graxos poli-insaturados complexados com sais de cálcio(AGP-Ca+) sobre a cinética espermática computadorizada do sêmen de carneiros.Foram utilizados 24 carneiros da raça Santa Inês (SI) distribuídos em quatro grupos experimentais que se diferiram na quantidade consumida diariamente deAGP-Ca+ a partir da ingestão de uma dieta base como segue: G3 – grupo controlecom 3% de extrato etéreo (EE), sem adição de AGP-Ca+ e, G6, G9 e G12 comadição de AGP-Ca+ e 6, 9 e 12% de EE, respectivamente. Um ejaculado de cada1 Zootécnico, mestre em Zootecnia, professor substituto da Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão, SE.2 Biólogo, mestrando de Recursos Naturais do Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia da Universidade Federal de Sergipe, Aracaju, SE.3 Médica-veterinária, mestranda de Zootecnia da Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão, SE.4 Médica-veterinária, mestranda de Sanidade e Reprodução de Ruminantes da Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, PE.5 Médica-veterinária, mestranda de Zootecnia da Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão, SE.6 Médica-veterinária, mestranda de Sanidade e Reprodução de Ruminantes da Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, PE.7 Mécido-veterinário, mestrando de Medicina Veterinária da Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG.8 Engenheiro-agrônomo, doutor em Zootecnia, professor da Universidade Federal de Sergipe, pesquisador da Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracaju, SE.9 Zootécnico, doutor em Produção Animal, professor da Universidade Federal de Sergipe, pesquisador da Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracaju, SE.10 Médico-veterinário, doutor em Zootecnia, professor da Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão, SE.11 Graduanda em Medicina Veterinária da Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão, SE.12 Médico-veterinário, doutor em Reprodução Animal, pesquisador da Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracaju, SE.III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros40carneiro foi colhido totalizando 24 amostras de sêmen em cada momento doperíodo experimental como segue: dia 0 (M0), aos 30 dias (M30), aos 60 dias(M60) e aos 90 dias (M90) do início da administração das dietas experimentais. Cada ejaculado foi avaliado quanto à cinética espermática computadorizada, sendo obtidos os seguintes parâmetros: motilidade total, motilidade progressiva,velocidade em linha reta, velocidade curvilinear, velocidade média do percurso, retilinearidade, linearidade, deslocamento lateral da cabeça e frequência de batimento fl agelar cruzado. Não houve interação signifi cativa (P>0,05) entre asvariáveis independentes, grupo experimental e momento. Os grupos não diferiramsignifi cativamente entre si (P>0,05) quanto aos parâmetros de cinética. Observou-se que os parâmetros de cinética espermática apresentaram mudanças(P<0,05) ao longo do período experimental sendo que a maioria dos incrementosforam a partir dos 60 dias coincidindo, aproximadamente, com o ciclo completo da produção e liberação dos espermatozoides em ovinos. Conclui-se que a administração de dietas suplementadas com AGP-Ca+ não tem infl uência sobre a cinética espermática do sêmen de carneiros.Palavras-chave: gordura protegida, gordura inerte, espermatozoides, lipídios, sêmen, Santa Inês.IntroduçãoEntre as várias biomoléculas que exercem efeito sobre a fi siologia dos gametas masculinos estão os lipídios poli-insaturados que têm sido incorporados à dietacom o objetivo de proporcionar melhorias na qualidade do sêmen  de várias espécies como em ovinos (FARAJI et al., 2012;). A dieta dos ruminantes,entretanto, não deve apresentar grandes concentrações de ácidos graxos poli-insaturados devido a seu efeito tóxico sobre os microrganismos, e consequentemente, diminuição da digestibilidade das fi bras no rúmen (GRUNERTet al., 2005). Experimentos que envolvam a suplementação de óleos insaturadosem dietas para ruminantes são benefi ciados pela adição de um protetor que reduza a saturação dos ácidos graxos no rúmen, resultando em maior absorção no intestino (DE GRAAF et al., 2007). A gordura protegida no rúmen consiste basicamente em uma fonte de ácidos graxos insaturados, normalmente ácidos linoleico e -linolênico protegidos, obtendo-se melhor aproveitamento de suas características particulares (CERVONI, 2011), por isso também é conhecida também como ácidos graxos poli-insaturados complexados com sais de cálcio (AGP-Ca+).III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 41Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de dietas com diferentes concentrações de AGP-Ca+ sobre a cinética espermática do sêmen de carneiros.Material e MétodosForam utilizados 24 carneiros da raça Santa Inês (SI) contemporâneos, com idadeentre 21 e 22 meses e peso vivo médio de 50 Kg, selecionados por meio deexames clínico-andrológicos. Os carneiros passaram por um período de adaptaçãode sete dias a uma dieta base (feno de capim tifton-85, milho triturado, farelo desoja, cloreto de sódio e fosfato bicálcico), formulada para atender as exigências de ganho mínimo de 100g/dia. Após o período de adaptação, os animais foram distribuídos aleatória e equitativamente em quatro grupos: G3, G6, G9 e G12. Os grupos experimentais diferiram-se na quantidade consumida diariamente de AGP-Ca+ a partir da ingestão da dieta base formulada sem e com adição de diferentes níveis de Megalac-E® (Church & Dwight Co., Nova Jersey, EUA): G3 -grupo controle com 3% de extrato etéreo (EE), sem adição de AGP-Ca+ e, G6,G9 e G12 com adição de AGP-Ca+ e 6, 9 e 12% de EE, respectivamente. Durante todo o período experimental os alimentos foram fornecidos na forma de dieta total, com consumo ad libitum de água e das dietas.Um ejaculado de cada carneiro foi colhido por meio de vagina artifi cial, totalizando24 amostras de sêmen em cada momento do período experimental como segue:dia 0 (M0), aos 30 dias (M30), aos 60 dias (M60) e aos 90 dias (M90) do início da administração das dietas experimentais. Cada ejaculado foi avaliado quanto à cinética espermática computadorizada utilizando-se o Sperm Class Analyzer (SCA®), sendo obtidos os seguintes parâmetros dos espermatozoides (SPTZ): motilidade total (MT), motilidade progressiva (MP), velocidade em linha reta (VSL), velocidade curvilinear (VCL), velocidade média do percurso (VAP), retilinearidade (STR), linearidade (LIN), deslocamento lateral da cabeça (ALH) e frequência de batimento fl agelar cruzado (BCF).Os dados foram analisados pelo teste de Kolmogorov-Smirnov para avaliar a normalidade da distribuição dos resíduos. Os dados normais foram submetidos àanálise de variância (ANOVA) e as médias ao teste Scott-Knott, ao nível de signifi cância de 5% de probabilidade. As médias que apresentaram diferença foram submetidas a analise de regressão. As análises foram realizadas peloprograma computacional Sistema para Análise de Variância – SISVAR (FERREIRA,2000).III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros42Tabela 1. Efeito dos diferentes níveis de ácidos graxos poli-insaturados complexados com sais de cálcio (AGP-Ca+) na dieta de carneiros sobre a cinética espermática analisada por computador.Continua...Parâmetro Grupo1Momento2M0 M30Motilidade total (%)G3 93,27 ± 3,89 94,47 ± 1,03G6 88,38 ± 6,82 91,05 ± 10,00G9 91,39 ± 5,57 97,21 ± 2,39G12 84,97 ± 7,86 96,86 ± 1,40Média 89,53 ± 6,54B 94,90 ± 5,47AMotilidade progressiva (%)G3 45,82 ± 6,79 48,86 ± 7,23G6 49,80 ± 6,50 46,07 ± 13,01G9 53,67 ± 3,78 52,64 ± 10,38G12 52,68 ± 6,96 54,59 ± 3,34Média 50,49 ±3,52B 50,54 ± 3,81BVelocidade em linha reta (μm/s)G3 101,49 ± 17,58 97,30 ± 11,63G6 97,13 ± 19,39 94,88 ± 18,64G9 94,58 ± 8,33 104,03 ± 7,58G12 92,59 ± 8,36 110,28 ± 10,96Média 96,45 ± 3,84B 101,62 ± 6,95BVelocidade curvilinear (μm/s)G3 232,86 ± 31,83 233,68 ± 25,34G6 216,76 ± 50,31 225,32 ± 42,98G9 217,56 ± 26,81 248,35 ± 23,62G12 213,92 ± 23,20 258,61 ± 31,06Média 220,27 ± 8,53B 241,49 ±14,86BResultados e DiscussãoA análise dos dados indicou que não houve interação signifi cativa (P>0,05) entreas variáveis independentes, grupo experimental e momento (Tabela 1). Os gruposnão diferiram signifi cativamente entre si (P>0,05) quanto aos parâmetros de cinética.III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 43Tabela 1. Continuação.ParâmetroMomento2M60 M90 MédiaMotilidade total (%)96,35 ± 1,87 96,39 ± 3,81 95,15 ± 3,0395,90 ± 3,59 92,67 ± 6,29 92,00 ± 7,1496,83 ± 2,17 95,94 ± 2,27 91,53 ± 3,7995,47 ± 4,16 95,81 ± 1,60 93,28 ± 6,1996,14 ± 2,93A 95,20 ± 3,97AMotilidade progressiva (%)58,14 ± 5,34 63,67 ± 6,70 54,12 ± 8,2461,77 ± 6,44 66,85 ± 13,57 56,12 ± 9,8063,65 ± 8,68 65,77 ± 6,58 58,93 ± 6,7464,07 ± 6,51 68,05 ± 7,19 59,85 ± 7,4061,90 ± 2,70A 66,08 ± 1,86AVelocidade em linha reta (μm/s)135,67 ± 15,11 134,77 ± 10,91 117,30 ± 20,76141,10 ± 14,49 143,08 ± 24,02 119,04 ± 26,64146,17 ± 10,12 131,04 ± 14,45 118,95 ± 23,83144,11 ± 12,61 137,35 ± 12,98 121,08 ± 23,97141,76 ± 4,56A 136,56 ± 5,06AVelocidade curvilinear (μm/s)297,08 ± 22,45 294,10 ± 19,55 264,61 ± 36,22296,08 ± 25,75 290,81 ± 30,94 257,24 ± 42,00308,82 ± 19,97 281,40 ± 28,29 264,03 ± 39,64298,12 ± 20,35 283,95 ± 17,32 263,65 ± 36,96300,20 ± 5,81A 287,57 ± 5,90AContinua...III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros44Tabela 1. Continuação.Parâmetro Grupo1Momento2M0 M30Velocidade média do percurso (μm/s)G3 133,56 ± 19,99 128,39 ± 14,19G6 125,04 ± 28,65 126,08 ± 25,08G9 122,21 ± 12,67 137,27 ± 9,72G12 117,56 ± 13,83 144,84 ± 14,26Média 124,59 ± 6,73B 134,14 ± 8,61BRetilinearidade (%)G3 75,78 ± 3,02 75,73 ± 2,42G6 78,07 ± 3,32 75,43 ± 4,44G9 77,54 ± 2,63 75,87 ± 4,30G12 79,00 ± 3,18 76,15 ± 1,16Média 77,60 ± 1,35B 75,80 ± 0,30BLinearidade (%)G3 43,44 ± 3,03 41,60 ± 1,14G6 45,08 ± 2,46 42,24 ± 4,03G9 43,65 ± 2,00 42,08 ± 3,66G12 43,41 ± 2,50 42,77 ± 1,78Média 43,90 ± 0,80B 42,17 ± 0,48BDeslocamento lateral da cabeça (μm)G3 3,41 ± 0,27 3,59 ± 0,31G6 3,38 ± 0,52 3,52 ± 0,39G9 3,30 ± 0,34 3,65 ± 0,49G12 3,43 ± 0,19 3,76 ± 0,44Média 3,38 ± 0,06B 3,63 ± 0,10AFrequência de batimento fl agelar cruzado (Hz)G3 46,59 ± 7,68 41,63 ± 2,65G6 43,46 ± 5,08 41,64 ± 3,54G9 40,30 ± 3,64 41,50 ± 2,92G12 39,97 ± 7,00 41,70 ± 2,50Média 42,58 ± 3,10B 41,62 ± 0,08BContinua...III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 45Tabela 1. Continuação.ParâmetroMomento2M60 M90 MédiaVelocidade média do percurso (μm/s)170,59 ± 15,79 168,16 ± 14,80 150,17 ± 22,29176,58 ± 18,18 171,73 ± 23,14 149,86 ± 28,13180,96 ± 13,31 161,80 ± 16,84 150,56 ± 26,02176,16 ± 14,58 167,07 ± 13,21 151,41 ± 26,12176,07 ± 4,25A 167,19 ± 4,11ARetilinearidade (%)79,44 ± 2,74 80,20 ± 1,85 77,79 ± 2,3779,94 ± 2,51 83,02 ± 3,98 79,12 ± 3,1980,84 ± 3,14 80,98 ± 2,60 78,81 ± 2,5281,87 ± 4,10 82,14 ± 1,81 79,79 ± 2,8180,52 ± 1,07A 81,59 ± 1,25ALinearidade (%)45,52 ± 3,15 45,79 ± 0,83 44,09 ± 1,9647,66 ± 2,61 48,98 ± 4,29 45,99 ± 2,9847,36 ± 2,33 46,65 ± 3,39 44,94 ± 2,4948,37 ± 3,21 48,30 ± 2,03 45,71 ± 3,0447,23 ± 1,21A 47,43 ± 1,47ADeslocamento lateral da cabeça (μm)3,96 ± 0,39 3,89 ± 0,19 3,71 ± 0,263,71 ± 0,23 3,83 ± 0,23 3,61 ± 0,203,84 ± 0,26 3,85 ± 0,34 3,66 ± 0,263,73 ± 0,21 3,74 ± 0,22 3,67 ± 0,163,81 ± 0,12A 3,83 ± 0,06AFrequência de batimento fl agelar cruzado (Hz)51,03 ± 5,47 50,30 ± 4,58 47,39 ± 4,3051,98 ± 3,55 52,24 ± 3,90 47,33 ± 5,5753,10 ± 3,72 47,09 ± 5,59 45,50 ± 5,8753,92 ± 3,93 50,44 ± 3,56 46,51 ± 6,7452,51 ± 1,27A 50,02 ± 2,14A1 G3 – 3% de extrato etéreo (EE), sem adição de AGP-Ca+ e, G6, G9 e G12 com adição de AGP-Ca+ e 6, 9 e 12% de EE, respectivamente.2 M0, M30, M60 e M90 = dia zero, 30, 60 e 90 dias da administração da dieta, respectivamente. SPTZ - espermatozoides.Médias seguidas de mesma letra não diferem estatisticamente entre si ao nível de 5%, maiúscula na linha e minúscula na coluna.Apesar dos relatos dos benefícios dos ácidos graxos poli-insaturados aumentandoa motilidade dos espermatozoides (FARAJI et al., 2012), o presente trabalho não apresentou vantagens da adição destes elementos na dieta para melhoria da cinética espermática no sêmen de carneiros. Uma das hipóteses é de que os III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros46ácidos graxos oriundos do gordura protegida da dieta talvez não tenham sido transferidos para o sêmen e consequentemente para os espermatozoides.Analisando-se as médias, independentemente do grupo, observou-se que osparâmetros de cinética espermática apresentaram mudanças (P<0,05) ao longodo período experimental. Os parâmetros MT e ALH aumentaram signifi cativamente(P<0,05) a partir do M30. Quanto aos demais parâmetros MP, VCL, VSL, VAP, STR e BCF, foram observados incrementos signifi cativos (P<0,05) a partir do M60.A maturação dos espermatozoides no epidídimo dura em torno de 13 a 15 dias, ocorrendo mudanças substanciais nas suas funções, composição e organização da sua membrana com consequente aquisição da motilidade e habilidade defertilização do ovócito (KNOBIL; & NEILL, 2006) que podem ter sido responsáveispela melhoria precocemente observada na função cinética dos espermatozoides. Mudanças aos 30 dias, entretanto não podem ser totalmente associadas ao período que compreende o tempo de espermatogênese somado ao trânsito doespermatozoide no epidídimo em ovinos, uma vez que nesta espécie, este intervalo é de aproximadamente 60 a 70 dias (CUNNINGHAM; & KLEIN, 2008).Em contrapartida, alguns efeitos benéfi cos das dietas ao longo do período experimental sobre a cinética espermática (MP, VCL, VSL, VAP, LIN, STR e BCF)coincidiram com o ciclo completo da produção e liberação dos espermatozoides em ovinos.ConclusãoA administração de dietas energéticas baseadas na suplementação com ácidos graxos poli-insaturados complexados com sais de cálcio (AGP-Ca+) não tem infl uência sobre a cinética espermática do sêmen de carneiros.AgradecimentosCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Fundaçãode Apoio à Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe (FAPITEC/SE) e Conselho Nacional de Desenvolvimento Científi co e Tecnológico (CNPq) pela concessão das bolsas de mestrado e de PIBIC.III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 47ReferênciasCERVONI, J. 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Efeito da adição de ácidos graxos poli-insaturados na dieta sobre a cinética espermática do sêmen de carneiros.

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