MITTELMANN, A.

PAULA, C. M. P. de

ROCHA, L. C.

SILVA, G. A.

SILVEIRA, R. A. D.

TECHIO, V. H.

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa

XXVI Congresso de Iniciação Científica da UFLACiências BiológicasPadrão de distribuição da histona H3 fosforilada na serina 10 em Loliummultiflorum Lam.Gabrielle Avelar Silva - 7°módulo de Engenharia Florestal, UFLA, iniciação científicaLaiane Corsini Rocha - Doutoranda em Genética e melhoramento de Plantas, UFLACristina Maria Pinto de Paula - Doutoranda em Genética e Melhoramento de Plantas, UFLARaphaela Aparecida Duarte Silveira - 5° módulo de Ciências Biológicas, UFLA, iniciaçãocientíficaVânia Helena Techio - Orientadora, DBI, UFLA.Andrea Mittelmann - Coorientadora, EMBRAPA Clima TemperadoResumoLolium multiflorum Lam., ou azevém anual, é uma gramínea forrageira nativa da bacia domediterrâneo, capaz de suprir a escassez de forragem em períodos de frio intenso. Por essemotivo, programas de melhoramento com Lolium estão sendo desenvolvidos no Brasil buscandoobter auto-sustentabilidade na produção de pastagens com maior produtividade e tolerância aofrio. A caracterização citogenética do germoplasma é importante para estabelecimento de umprograma de melhoramento genético, subsidiando o sucesso da seleção genotípica e ganhogenético. A caracterização epigenética permite conhecer o comportamento da cromatina e opapel das histonas durante a divisão celular. A unidade fundamental de empacotamento do DNAé o nucleossoma, um complexo protéico composto por duas subunidades de histonas centrais:H2A, H2B, H3, e H4 e uma histona H1 posicionada externamente ao octâmero. As cadeiasamino-terminais das histonas são alvo de uma série de modificações pós-traducionais quemodulam a estrutura da cromatina e a expressão gênica. Estas modificações são passíveis deserem analisadas a partir da técnica de imunolocalização. O objetivo deste trabalho foi avaliar opadrão de distribuição da fosforilação da histona H3S10, por meio da técnica deimunolocalização, em células meristemáticas de L. multiflorum tetraploide. Para isso, raízes de L.multiflorum foram fixadas em paraformaldeído 4% e submetidas à digestão enzimática.Posteriormente as lâminas foram confeccionadas pela técnica de esmagamento e submetidas àimunolocalização indireta usando o anticorpo primário policlonal de coelho contra H3S10f, o qualfoi detectado com anticorpo secundário conjugado com FITC (isotiacianato de fluorosceína). Ossinais de H3S10f não foram evidenciados na interfase e no início da prófase. Na prófase tardiafoi possível observar sinais de menor intensidade evidenciando a H3 modificada. Napró-metáfase e metáfase, os sinais apresentaram maior intensidade e foi possível observar que adistribuição da H3S10f foi correspondente à região pericentromérica. Após a separação dascromátides na anáfase, ocorre progressivamente a desfosforilação da histona H3, observadapela redução de intensidade dos sinais nas células. De acordo com os dados analisados eassociação com outros trabalhos pode-se inferir que para L. multiflorum, a fosforilação da H3 naserina 10 apresenta distribuição pericentromérica e está relacionada com a manutenção dacoesão das cromátides irmãs. Palavras-Chave: imunolocalização, epigenética, forrageira.Instituição de Fomento: Fapemig, Capes, CnpqIdentificador deste resumo: 2616-6-2570 Outubro de 2013

Padrão de distribuição da histona H3 fosforilada na serina 10 em Lolium multiflorum Lam.

PAULA, C. M. P.

XXVI Congresso de Iniciação Científica da UFLACiências BiológicasPadrão de distribuição da histona H3 fosforilada na serina 10 em Loliummultiflorum Lam.Gabrielle Avelar Silva - 7°módulo de Engenharia Florestal, UFLA, iniciação científicaLaiane Corsini Rocha - Doutoranda em Genética e melhoramento de Plantas, UFLACristina Maria Pinto de Paula - Doutoranda em Genética e Melhoramento de Plantas, UFLARaphaela Aparecida Duarte Silveira - 5° módulo de Ciências Biológicas, UFLA, iniciaçãocientíficaVânia Helena Techio - Orientadora, DBI, UFLA.Andrea Mittelmann - Coorientadora, EMBRAPA Clima TemperadoResumoLolium  multiflorum  Lam.,  ou  azevém  anual,  é  uma  gramínea  forrageira  nativa  da  bacia  domediterrâneo,  capaz  de  suprir  a  escassez  de  forragem  em  períodos  de  frio  intenso.  Por  essemotivo, programas de melhoramento com Lolium estão sendo desenvolvidos no Brasil buscandoobter auto-sustentabilidade na produção de pastagens com maior produtividade e tolerância aofrio.  A  caracterização  citogenética  do  germoplasma  é  importante  para  estabelecimento  de  umprograma  de  melhoramento  genético,  subsidiando  o  sucesso  da  seleção  genotípica  e  ganhogenético.  A  caracterização  epigenética  permite  conhecer  o  comportamento  da  cromatina  e  opapel das histonas durante a divisão celular. A unidade fundamental de empacotamento do DNAé o nucleossoma, um complexo protéico composto por duas subunidades de histonas centrais:H2A,  H2B,  H3,  e  H4  e  uma  histona  H1  posicionada  externamente  ao  octâmero.  As  cadeiasamino-terminais  das  histonas  são  alvo  de  uma  série  de  modificações  pós-traducionais  quemodulam a estrutura da cromatina e a expressão gênica.  Estas modificações são passíveis deserem analisadas a partir da técnica de imunolocalização. O objetivo deste trabalho foi avaliar opadrão  de  distribuição  da  fosforilação  da  histona  H3S10,  por  meio  da  técnica  deimunolocalização, em células meristemáticas de L. multiflorum tetraploide. Para isso, raízes de L.multiflorum  foram  fixadas  em  paraformaldeído  4%  e  submetidas  à  digestão  enzimática.Posteriormente as lâminas foram confeccionadas pela técnica de esmagamento e submetidas àimunolocalização indireta usando o anticorpo primário policlonal de coelho contra H3S10f, o qualfoi detectado com anticorpo secundário conjugado com FITC (isotiacianato de fluorosceína). Ossinais de H3S10f não foram evidenciados na interfase e no início da prófase. Na prófase tardiafoi  possível  observar  sinais  de  menor  intensidade  evidenciando  a  H3  modificada.  Napró-metáfase e metáfase, os sinais apresentaram maior intensidade e foi possível observar que adistribuição  da  H3S10f  foi  correspondente  à  região  pericentromérica.  Após  a  separação  dascromátides  na  anáfase,  ocorre  progressivamente  a  desfosforilação  da  histona  H3,  observadapela  redução  de  intensidade  dos  sinais  nas  células.  De  acordo  com  os  dados  analisados  eassociação com outros trabalhos pode-se inferir que para L. multiflorum, a fosforilação da H3 naserina  10  apresenta  distribuição  pericentromérica  e  está  relacionada  com  a  manutenção  dacoesão das cromátides irmãs. Palavras-Chave: imunolocalização, epigenética, forrageira.Instituição de Fomento: Fapemig, Capes, CnpqIdentificador deste resumo: 2616-6-2570 outubro de 2013

Portuguese

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/982898/1/Padrao-de-distribuicao-da-histona-H3-fosforilada.pdf

Padrão de distribuição da histona H3 fosforilada na serina 10 em Lolium multiflorum Lam.

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa