HUNGRIA, M.

PASQUALINI, D.

SANTOS, J. C. P.

STOCCO, P.

VARGAS, V. P.

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Caracterização morfológica de isolados de rizóbio em feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.), no Estado de Santa Catarina.

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122 	Embrapa Soja. Documentos, 276 Caracterização morfológica de isolados de rizóbio em feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.), no Estado de Santa Catarina Priscila Stocco 1 ; Julio O. P. Santos 2 ; Vitor P. Vargas 3 ; Diego Pasqualini 1 ; Mariangela Hungria 4. 1 Mestrando em Ciência do Solo ! CAV-UDESC-Centro de Ciências Agroveterinárias - Universidade do Estado de Santa Catarina; 2Professor Depto de Solos, CAV-UDESC; 3Acadêmico do Curso deAgronomia CAV-UDESC; 4 Pesquisadora Embrapa Soja. Introdução No Brasil, o feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) ocupa lugar de destaque na agricultura, destacando-se como um produto de mercado interno, cujos grãos representam uma fonte importante de proteínas e de minerais para a população. O feijoeiro, a exemplo de outras leguminosas, apresenta a capacida-de de associação simbiótica com bactérias fixadoras de nitrogênio da ordem Rhizobiales. Uma das principais características da simbiose no feijoeiro é a elevada promiscuidade da planta hospedeira com diversos microssimbiontes. A caracterização das propriedades morfológicas das bactérias representa um primeiro passo para o levantamento da biodi-versidade, fundamental para o conhecimento das comunidades nativas de rizábios. Este trabalho teve como objetivo a caracterização morfológica de isolados de rizábios, obtidos a partir de nódulos de feijoeiro coletados em diversos locais do Estado de Santa Catarina. Material o Métodos Foram coletados nódulos de raízes de feijoeiros, a partir de plantas, colhi-das ao acaso, e amostras de solo, em 34 áreas do extremo/meio oeste e do planalto sul catarinense. 1/Jornada Académ/ca da Embrapa Soja 	 123 No laboratório, dez nódulos foram retirados ao acaso, procedendo-se o isolamento e obtenção de culturas puras de bactérias, de acordo com metodologia descrita por Vicent (1970). Para isso, os nódulos foram desinfestados superficialmente durante 1 minuto em álcool (95%), 5 minutos em hipoclorito de sódio comercial e lavados em água desti-lada/esterilizada por cinco vezes; em seguida, foram macerados com uma pinça flambada e, com uma alça de platina, repicados em meio de cultura YM contendo o corante vermelho congo. Todas as estirpes foram caracterizadas quanto à produção de muco, transparência, cor, tamanho, borda, elevação e crescimento, aos três e sete dias de cres-cimento. Também foi observada, a partir do quinto dia de crescimento, a acidificação ou alcalinização do meio YM contendo o indicador de pH azul de bromotimol. O solo foi classificado conforme o mapa de classificação dos solos de Santa Catarina (Embrapa, 2006) e as análises químicas determinadas segundo os métodos propostos por Tedesco et ai. (1995). A caracterização química dos solos pode ser visualizada na Tabela 1. Resultados e Discussão Foram obtidos 117 isolados em cultura pura com características típicas de rizóbios. Foi constatado grande variabilidade morfológica em diversos caracteres, com ênfase para a produção de muco. Os isolados apresen-taram crescimento rápido, sendo possível realizar a caracterização em apenas três dias. Os grupos predominantes foram aqueles que apresen-taram colônias de cor branca opaca em YMA e produção moderada de muco. Aproximadamente 97% dos isolados apresentaram reação ácida em meio YMA contendo azul de bromotimol; quanto a coloração 89% dos isolados apresentaram colônia branca opaca, 8,5% translúcida e 2,5% rosa (Tabela 2). Estes isolados estão sendo analisados, atualmente, com o uso de mar-cadores moleculares, como o BOX Al R - PCR e o RFLP - PCR do gene ribossomal 16S, o que possibilitará a realização de estudos de diversidade e taxonomia. 124 	 Embrapa Soja. Documentos, 276 O 	 O 	 000NCDCONN fl.00O 	 NO) N COO) 	 CO CO c 	 O 	 CO CO CO 	 CO N N 0) 	 N O N CO LO CO CO LO CO CO — u) O 	 O 	 0 Cl 0 Cl O 	 CO Cl Cl O 0) Cl 0 CO 	 CO O C) O CO O h Cl 	 CO CIO Cl 	 0)0 Cl OU) Cl 	 0000) Cl O 	 N- O 'tOCO Cl CO 	 0 	 CO N. o LO fl '_OO) COO) Cl Cl z o o o o o o o o o o o o o o o o o o o O o o o O, o 	 CO O Cl CO CO CO O) LO CO CO 	 CO CO - 't 0) 0) Cl CO O 0) O .O CO O CO 	 CO O Cl CO 	 CO Cl 0 	 Cl O O O CO 	 - o o 	 • 	 COO) NOr Cl Cl COO)t-COCO 	 COCO i_ 	 O- 	 CO CO CO Cl e, 000 Cl COCO 00 Cl Cl - CO Cl CO CO CO CO CO Cl 	 - 	 CO 	 Cl CO 	 CO OCOCOOCOOCOCOOO COOCOL() O CO CO O COCO COOU) O 	 • 	 'tCOOONCOCOCOClCl 'tOOCO 	 CO N- 	 OO't NO 00 	ClCOO,COCOCO't 	 Cl 	 COO't COeI ClCl Ot 	 ooqooqU,oÔU000000qoqoquo COCO 	 CO 	 0Cl-OO-'tCOO) 't CO CO ClO. 1'. 	 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Caracterização realizada aos três dias de crescimento. Cor 	 Transparencia 	 Produção Reação em Número de de muco meio YMA isolados Branca 	 Opaca 	 Abundante Ácida 7 Moderada Ácida 79 Básica 2 Pouca Ácida 14 Básica 1 Neutra 1 Translúcida 	 Abundante Ácida 1 Moderada Ácida 9 Rosa 	 Opaca 	 Pouca 	 Ácida 	 3 Total 	 117 Refe ró n c ias EMBRAPA. Mapa de Solos do Estado de Santa Catarina. Disponível em: <http://mapserver.cnps.embrapa.br/website/pub/Santa_Catarina/viewer . htm>. Acesso em 25 de abril 2006. TEDESCO, J. M.; GIANELLO, C.; BISSANI, C. A.; BOHNEN; H. A.; VOLKWEISS, S. J. Análise de solo, plantas e outros matreriais. Porto Alegre: UFRGS, 1995. 174 p. VICENT, J. M. A Manual for the pratical study of r000t-nodule bacteria. Oxford: Blackwell Scientific, 1970. 164 p. (IBP Handbook, no 15) 

Caracterização morfológica de isolados de rizóbio em feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.), no Estado de Santa Catarina.

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